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Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)酶试剂盒Takara

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Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6166 Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 100 Rxns ￥1,001 Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
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■ 制品内容 (100 次量)*1
Forward Titer Primer FRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
Reverse Titer primer RRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
RNA Control Template (5×108 copies/ μl) 10 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR) 1 ml×2
DNase I (RNase Free) (5 U/μl) 40 μl
10X DNase I Buffer 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
 
*1 Real Time RT-PCR 100次反应，DNase I 可以处理 20次。
 
■ 制品说明
Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 是利用Real Time RT-PCR法测定基于MLV (murine leukemia virus: 小鼠白血病病毒) 改造的逆转录病毒载体的基因组RNA量，确定逆转录病毒滴定度的制品。本制品与One Step TB Green® PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. :RR066A/RR086A)一起使用，4小时内即能直接测定病毒上清液中RNA的滴定度。另外，本制品扩增的是MLV病毒包装信号的序列区，可以测定几乎所有的以MLV为基础改造的逆转录病毒载体的RNA滴定度。
逆转录病毒载体感染效率测定时，目的细胞被逆转录病毒载体感染后，通常是利用荧光和抗药性等测定感染效率，然后算出滴定度。这个方法需要数日，而且，如果没有报告基因和抗药性基因，使用此方法不能进行测定。另外，根据生物学滴定度决定感染复数 (MOI) 进行细胞感染时，滴定度测定需要数日，因此病毒上清液需要冷冻保存，冻融容易使病毒滴定度降低，并造成感染复数 (MOI) 不准，同时易造成污染。
本制品是对逆转录病毒载体的基因组RNA量进行测定，对没有报告基因和抗药性基因的逆转录病毒载体也能够测定滴定度。由于在4小时内即可得到测定结果，因此病毒上清液不需要冷冻保存，并可以根据测定的感染复数 (MOI) 进行感染。
配套使用的One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 是采用嵌合荧光染料法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase (RTase H free) 和TaKaRa Ex Taq HS，具有高扩增效率和高扩增特异性，能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
RNA Control Template: -80℃
其他组份：-20℃
 
 

页面更新：2022-05-13 08:58:41

Set of three units of Temperature Stabilizer(Phase Change Material)-36 套装（迷你6.6保温箱+3块36-蓄热板） 品牌：Sanplatec

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品牌：Sanplatec
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

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WEB28646

 – 1 set – 咨询 – –


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Set of three units of Temperature Stabilizer(Phase Change Material)-24 套装（迷你6.6保温箱+3块24-蓄热板） 品牌：Sanplatec

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品牌：Sanplatec
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

WEB28647

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Fructooligosaccharides Set 低聚果糖标准品套装 品牌：Wako

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品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

295-73401

 for High Performance Liquid Chromatography 1 set – 3,530.00
Fructooligosaccharides Set 低聚果糖标准品套装 品牌：Wako 		– –


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• 1-Kestose, 99.0+% (HPLC)   250 mg x 1 vial 

• Nystose, 99.0+% (HPLC)       250 mg x 1 vial 

• 1F-Fructofuranosylnystose, 80.0+% (HPLC) 250 mg x 1 vial 

1-Kestose, 99.0+% (HPLC) (for Biochemistry)

Nystose Trihydrate, 98.0+% (HPLC) (for Biochemistry)

此套装包含蔗果三糖250 mg 、蔗果四糖250 mg、蔗果五糖 250 mg. 

1、蔗果三糖, 99.0+% (HPLC)     250 mg x 1 vial
  CAS No. 470-69-9; C18H32O16 = 504.44 

2、 蔗果四糖, 99.0+% (HPLC)    250 mg x 1 vial
  CAS No. 13133-07-8; C24H42O21 = 666.58 

3、 蔗果五糖, 80.0+ % (HPLC)    250 mg x 1 vial
  CAS No. 59432-60-9; C30H52O26 = 828.72

低聚果糖是一种天然活性物质。

甜度为蔗糖的0.3-0.6倍。既保持了蔗糖的纯正甜味性质，又比蔗糖甜味清爽。是具有调节肠道菌群，增殖双歧杆菌，促进钙的吸收，调节血脂，免疫调节，抗龋齿等保健功能的新型甜味剂，被誉为继抗生素时代后很大潜力的新一代添加剂——促生物质；

在法国被称为原生素（PPE），已在乳制品、乳酸菌饮料、固体饮料、糖果、饼干、面包、果冻、冷饮等多种食品中应用。

因此，此标准套装主要可用于乳品厂、食品厂的检测。

Smart-SPE set of LC method 品牌：Asti Sci

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品牌：Asti Sci
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

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304-95081

 – 3 types×30 – 咨询 – –


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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara

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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ￥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成，适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化，例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠（已终卖）。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
产品详情请点击：磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
 
 

页面更新：2019-11-12 09:41:38

磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara

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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ￥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成，适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化，例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠（已终卖）。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
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页面更新：2019-11-12 10:16:45

LipoTrust Set LipoTrust™阳离子脂质体转染套装 品牌：Cosmo Bio

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品牌：Cosmo Bio
CAS No.：
储存条件：+4℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

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CSR-LTS-01-EX

 – 1 Set – 咨询 – –


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secondary container of Live transport set (Sheet,Flask pallet ,Box) 活细胞运输中间容器套装（吸液片6个、专用托盘2个、盒子1个） 品牌：Sanplatec

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品牌：Sanplatec
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

WEB28451

 – 1 set – 咨询 – –


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pCold™ Vector Set酶试剂盒Takara

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pCold™ Vector Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3360 pCold™ Vector Set 1 Set ￥5,007 pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set
Takara 3361 pCold™ I DNA 25 μg ￥3,004 pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set
Takara 3362 pCold™ II DNA 25 μg ￥3,004 pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set
Takara 3363 pCold™ III DNA 25 μg ￥3,004 pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set
Takara 3364 pCold™ IV DNA 25 μg ￥3,004 pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set pCold™ Vector Set
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
【注意】本制品仅限用于科研目的，凡用于商业用途，须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件，请致电4006518761或邮件联络service@takarabiomed.com.cn。
 
■ GenBank登录
      Accession No.
     pCold™ I DNA AB186388
     pCold™ II DNA AB186389
     pCold™ III DNA AB186390
     pCold™ IV DNA AB186391
 
■ 链长
     pCold™ I DNA 4,407 bp
     pCold™ II DNA 4,392 bp
     pCold™ III DNA 4,377 bp
     pCold™ IV DNA 4,359 bp
 
■ 保存
-20℃。
注意：自收到之日起，适当条件下保存，两年内有效。
 
■ 制品说明
在后基因组研究中，蛋白质结构与功能的解析是一个重要的课题，有效的蛋白质表达系统是一项必不可少的基础性技术。以大肠杆菌为宿主的表达系统广泛应用于重组蛋白质的生产中。大肠杆菌表达系统具有使用方便和成本低的优点，但是，有一些基因会出现表达困难或者表达的蛋白质不可溶等问题。为了解决这些问题，Takara公司与 Professor Masayori Inouye (University of Medicine and Dentistry of New Jersey, USA)联合研发了冷休克表达载体pCold DNA系列，它利用了大肠杆菌的低温表达基因 (冷休克基因)，并具备上述优点。随着蛋白质的功能解析、结构解析工作的开展，这个系列制品成为蛋白质研究的重要工具。
[产品概述及特点]
当培养温度切换到低温时，大肠杆菌暂时停止生长，大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少，但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。pCold DNA I～IV是应用冷休克基因之一的cspA基因启动子而设计并可以有效表达蛋白质的冷休克表达载体。在cspA启动子下游插入了lac operator，可以严紧调控蛋白质表达。另外，在cspA启动子下游还有5’非编码区 (5’UTR)、TEE序列、His tag序列、Factor Xa切断序列和多克隆位点。因为本制品应用了大肠杆菌来源的启动子，所以大部分的大肠杆菌菌株都可以作为表达宿主使用。pCold系列载体根据TEE序列、His tag序列和Factor Xa切断序列的有无，分成四种pCold载体，可根据使用目的选择相应的载体。
 
■ pCold™ 载体图谱
pCold™ Vector Set
pCold™ Vector Set
 
 

页面更新：2020-04-17 15:00:11

Chaperone Plasmid Set酶试剂盒Takara

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Chaperone Plasmid Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3340 Chaperone Plasmid Set 1 Kit ￥1,602 Chaperone Plasmid Set Chaperone Plasmid Set Chaperone Plasmid Set
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■ 制品内容
     Plasmid pG-KJE8 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pGro7 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pKJE7 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pG-Tf2 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pTf16 (10 ng/μl) 100 μl
   
【注意】本制品仅限用于科研目的，凡用于商业用途，须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件，请致电4006518761或邮件联络service@takarabiomed.com.cn。
 
■ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
蛋白质的结构和功能分析是后基因组学领域面临的挑战之一，现已受到广泛关注。表达的大量重组蛋白质需要对其结构和功能进行测定，为了满足这一需求，便开发了多种表达系统。
大肠杆菌由于系统简单，在表达系统的选择上范围广泛，因此通常被用作蛋白质表达的宿主菌。但是，外源蛋白质在E.coli中表达时，常常出现表达的蛋白质形成包涵体或被蛋白酶降解的情况，原因大多是表达的蛋白质没能进行正确的折叠，这不利于研究蛋白质功能。
已证实，分子伴侣 (Molecular Chaperones) 或称伴侣蛋白参与蛋白质的折叠过程。为探究蛋白质的体内折叠机理，已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, Inc.在分子伴侣研究领域做出了显著的贡献。 本Chaperone Plasmid Set含有五种类型的质粒，每一种质粒都能有效表达不同类型的伴侣蛋白组，各伴侣蛋白组协同作用、共同参与蛋白质折叠。据报道，目的蛋白质与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收率，而使用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的 (参见图1)。
Chaperone Plasmid Set
图1. 伴侣蛋白对胞内蛋白质合成体系的作用
〈可使用大肠杆菌表达体系〉
伴侣蛋白质粒含有pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr基因)，通常应用在大肠杆菌表达体系中，与ColE1型、具有氨苄抗性 (Ampr) 筛选标记的表达载体共存。各伴侣蛋白质基因位于araB启动子或Pzt-1 (tet) 启动子下游，而目的基因处于lac或其它启动子的控制之下，目的蛋白质与伴侣蛋白可分别诱导表达。另外，质粒上也具备启动子必要的元件 (araC或tetR)。需注意的是该伴侣蛋白质粒不可以与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。例如，常用的pET系列载体等可以使用E.coli BL21 (DE3) 作为宿主，却不可以使用E.coli BL21 (DE3) pLysS和E.coli BL21 (DE3) pLysE，因为它们分别包含了带有Cmr基因、pACYC复制起点的pLysS或pLysE质粒。
此外，可以考虑使用的宿主还有E.coli JM109。
 
质粒 伴侣蛋白 启动子 诱导物 抗性标记
 pG-KJE8   dnaK-dnaJ-grpE araB  L-Arabinose Cm
  groES-groEL Pzt-1  Tetracyclin
 pGro7   groES-groEL araB  L-Arabinose Cm
 pKJE7   dnaK-dnaJ-grpE araB  L-Arabinose Cm
 pG-Tf2   groES-groEL-tig Pzt-1  Tetracyclin Cm
 pTf16   tig araB  L-Arabinose Cm
表1：各质粒编码的伴侣蛋白质种类及诱导物
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Chaperone Plasmid载体图谱
Chaperone Plasmid Set
 
 
 
 

页面更新：2021-02-25 11:22:53

SPP System™ Set酶试剂盒Takara

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SPP System™ Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3366 SPP System™ Set 1 Set ￥13,278 SPP System™ Set SPP System™ Set SPP System™ Set
Takara 3367 SPP System™ I 1 Set ￥7,050 SPP System™ Set SPP System™ Set SPP System™ Set
Takara 3368 SPP System™ II 1 Set ￥7,050 SPP System™ Set SPP System™ Set SPP System™ Set
Takara 3369 SPP System™ III 1 Set ￥7,050 SPP System™ Set SPP System™ Set SPP System™ Set
Takara 3370 SPP System™ IV 1 Set ￥7,050 SPP System™ Set SPP System™ Set SPP System™ Set
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■ 制品内容
SPP System Set (Code No.: 3366)  
1. SPP System Set
   pCold I (SP-4) DNA、pCold II (SP-4) DNA
   pCold III (SP-4) DNA、pCold IV (SP-4) DNA		 各20 μg
2. pMazF DNA (20 ng/μl) 0.5 μg
3. pCold I (SP-4) envZB DNA (20 ng/μl) 0.2 μg
   
SPP System I～IV (Code No.: 3367～3370)  
1. pCold I～IV (SP-4) DNA中一个(0.5 μg/μl) 20 μg
2. pMazF DNA (20 ng/μl) 0.5 μg
3. pCold I (SP-4) envZB DNA (20 ng/μl) 0.2 μg
   
 
■ GenBank登录
      Accession No.
     pCold I (SP-4) DNA AB248600
     pCold II (SP-4) DNA AB248601
     pCold III (SP-4) DNA AB248602
     pCold IV (SP-4) DNA AB248603
 
■ 链长    
     pCold I (SP-4) DNA 4,407 bp
     pCold II (SP-4) DNA 4,392 bp
     pCold III (SP-4) DNA 4,377 bp
     pCold IV (SP-4) DNA 4,359 bp
 
■ 制品说明
根据美国新泽西州医学与牙科大学的井上正顺博士小组的研究，大肠杆菌的蛋白质MazF是一种能够识别并切断单链RNA特定序列 (ACA) 的核酸内切酶 (mRNA Interferase)。利用MazF可以抑制宿主蛋白质表达，只表达目的蛋白质。利用这一技术，开发了Single Protein Production (SPP) System。
在SPP System中，在保持氨基酸序列不变的情况下用非ACA序列置换目的基因中的ACA序列，然后与MazF基因共表达。大部分宿主蛋白的mRNA因为有ACA序列而被MazF分解，表达被抑制，但是目的基因的转录mRNA中不含有ACA序列，不能被MazF切断，从而使目的蛋白得到高效表达。由于目的蛋白质的不同，也有比单纯使用冷休克表达载体进行表达时表达量低的情况。构建SPP系统，首先需要通过化学合成或点突变的方法制备无ACA序列的目的基因。设计无ACA基因的时候，在确保氨基酸序列不变的情况下将ACA序列替换，同时加入必须的酶切位点。其次，将无ACA基因克隆至含有无ACA转录区域的pCold (SP-4) 载体中。至此，用于目的片段的SPP系统表达的载体准备完毕，将其与能够表达足量的MazF的pMazF载体共转化至E.coli中，形成了目的片段的SPP。
SPP System用的冷休克表达载体与pCold冷休克表达载体一样，根据TEE序列、His tag和Factor Xa酶切位点序列有无，分成4个载体，分别是pCold I～IV (SP-4) DNA，pCold IV (SP-4)在多克隆位点的上游没有附加的序列。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 特长
同位素标记方便：标记的目的蛋白质最大可达到宿主胞内新生蛋白质的90%。
使用宿主广泛：CspA启动子来源于大肠杆菌，所以大部分的大肠杆菌都可作为宿主使用。因为共表达用载体pMazF DNA的筛选标记是氯霉素，所以具有氯霉素抗性的大肠杆菌 (例如：Rosseta等)不能作为宿主使用。
 
■ 纯度
用于pCold (SP-4) DNA系列载体。
1. 用双脱氧测序法确认多克隆位点。
2. 确认多克隆位点上的限制酶Nde I, Sac I, Kpn I, Xho I, BamH I, EcoR I, Hind III, Sal I, Pst I 和Xba I只有一个酶切位点。
 
■ SPP System 原理图
SPP System™ Set
 
■ SPP System冷休克表达载体图谱
  TEE序列 His tag序列 Factor Xa切断序列
pCold I (SP-4) DNA ○ ○ ○
pCold Ⅱ (SP-4) DNA ○ ○ ×
pCold Ⅲ (SP-4) DNA ○ × ×
pCold Ⅳ (SP-4) DNA × × ×
 
SPP System™ Set
SPP System™ Set
 
■ MazF表达质粒pMazF DNA载体图谱
SPP System™ Set
 

页面更新：2019-09-25 11:39:57

Toxinometer® ET-6000/E nonpart11 Set 品牌：Wako

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品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

299-33969

 No grade 1 set – 咨询 – –


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4 Internal Standard Set for Quantitative NMR NMR定量分析用的4种内标 品牌：Wako

发表于由

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：2-10℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

093-06731

 for qNMR 1 set – 咨询 – –


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植物激素组

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  • 产品特性
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  • Q&A
  • 参考文献

植物激素组植物激素组



◆构成成分（各1 g）


2,4- Dichlorophenoxyacetic Acid

Potassium 3-Indoleacetate

Potassium 1-Naphthylacetate

6-Benzylaminopurine

6-Furfurylaminopurine

 

植物激素组

植物研究用试剂

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
165-13831 5 Plant Growth Regulators Set A 5 
植物生长调节剂 A		 1 Set 植物组织培养用

3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase酶试剂盒Takara

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3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6106 3′-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 20 Rxns ￥1,893 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
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■ 制品内容 (20 次量)
制品内容1～9项为用于3’RACE实验的反转录用试剂，可用于20次反转录反应 (约100次3’RACE PCR反应)；10～12为Control实验用试剂，可进行5次Control实验。
1. PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
2. RNase Inhibitor(40 U/μl) 10 μl
3. 5 × PrimeScript Buffer 40 μl
4. dNTP Mixture (10 mM each) 20 μl
5. 3’RACE Adaptor (5 μM) 20 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml
7. 1 × cDNA Dilution Buffer II 1 ml
8. 3’RACE Outer Primer (10 μM ) 200 μl
9. 3’RACE Inner Primer (10 μM ) 200 μl
10. Control HL60 Total RNA (500 ng/μl)* 10 μl
11. 3’RACE Control Outer Primer (10 μM)* 10 μl
12. 3’RACE Control Inner Primer (10 μM)* 10 μl
   
* 用于扩增Human Prohibitin (PHB) 基因。
 
■ 制品说明
本试剂盒是高灵敏度、高特异性扩增cDNA 3’末端全长的试剂盒。对RNA结构进行分析时，一般先通过RT-PCR反应扩增目的区域，然后再对扩增出的目的DNA片段进行克隆、序列分析等。一般的RT-PCR反应很难得到全长的cDNA片段，然而在基因工程研究中，分析遗传基因的全长cDNA序列又是十分重要的。RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 法能有效地解决这一问题。3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase能够通过已知的cDNA序列，高灵敏度、高特异性地扩增cDNA的3’末端的全长序列。
本试剂盒中含有完成3’-RACE操作的主要试剂。试剂盒中使用的PrimeScript Reverse Transcriptase经过了本公司的特殊改良，反转录性能良好，无RNase H活性，大大增加了反转录性能。结合使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A) 进行PCR扩增时，其3’RACE的扩增性能大大优于其他同类产品。 本试剂盒应用了套式PCR原理，增加了PCR扩增的特异性与灵敏度，可以对少量样品或低丰度的基因进行3’RACE实验，并且对长片段的3’RACE扩增具有明显优势，我们曾经使用本试剂盒成功扩增了8 kb的3’RACE DNA片段。使用TaKaRa LA Taq™ 扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基，其产物可直接克隆于T-Vector中。反转录引物3’RACE Adaptor Primer含有由Takara特别设计的dT区域，反转录效率高。3’RACE Inner Primer中含有BamH I酶切位点，为克隆实验提供了方便。制品中的Control RNA及Control Primer可以用于Control实验。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列 (5’→3’)
   3’RACE Adaptor    含有由Takara特别设计的dT区域及Adaptor Primer部分
   3’RACE Outer Primer    TACCGTCGTTCCACTAGTGATTT
   3’RACE Inner Primer    CGCGGATCCTCCACTAGTGATTTCACTATAGG
   3’RACE Control Outer Primer    GAGTGCAGGACATTGTGGTAGGG
   3’RACE Control Inner Primer    ATCTTTGACTGCCGTTCTCGACC
 
 
■ 试剂盒原理
进行3’RACE 实验时，首先由PrimeScript Reverse Transcriptase将Poly(A)+RNA反转录成cDNA，然后再使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A)，以反转录的cDNA为模板，进行套式PCR反应。3’RACE Adaptor Primer作为反转录引物用于cDNA合成 (具体原理见图1)。
 
3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
图1. 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase的实验原理图
 
1. 以Total RNA为模板，使用3’RACE Adaptor引物进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。
2. 使用上游外侧特异性引物 (GSP1) 和3’RACE Outer Primer进行1st PCR反应。如果1st PCR反应未能得到目的产物，再使用上游内侧特异性引物 (GSP2) 和3’RACE Inner Primer进行2nd PCR反应。
3. PCR产物可以直接进行DNA测序或TA克隆。如果使用含有BamH I酶切位点的上游内侧特异性引物进行2nd PCR扩增时，可以使用限制酶 (BamH I) 对PCR产物进行酶切反应，然后克隆至相关的载体中。
 
■ 注意事项
1. 同时需要进行数次反转录反应或PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor等酶类时，应轻轻混匀，避免起泡，分取之前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放回-20℃中保存。
4. 为了防止Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室建议保存于-70℃至-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。
 
 

页面更新：2017-04-07 10:39:54

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