|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
167-25501 |
for Genetic Research | 5 mg | – |
替代品：161-28681 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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PA 标签含有14个氨基酸(GVAMPGAEDDVV)PA标签融合蛋白
氨基酸序列： NH2-EGGVAMPGAEDDVV-COOH
分子式：C55H88N14O23S
分子量：1345.43
纯度：95 %(HPLC)
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
163-25503 |
for Genetic Research | 25 mg | – |
替代品：167-25501 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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PA 标签含有14个氨基酸(GVAMPGAEDDVV)PA标签融合蛋白
氨基酸序列：NH2-EGGVAMPGAEDDVV-COOH
分子式：C55H88N14O23S
分子量：1345.43
纯度：95 %(HPLC)
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
011-25953 |
for Immunochemistry | 1 ml | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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PA tag融合蛋白单抗
应用： WB( 1 : 1,000-100,000 )。
免疫动物：兔子。
浓度：见标签。
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
161-26861 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点C端插入PA tag序列载体。可在哺乳动物细胞内表达。
大小：5.1kbp
组成：10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度：1.0 μg/μL
选择标记（E.coli和哺乳动物细胞） ：博来霉素
多克隆位点启动子：CAG。
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
165-26901 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
替代品：169-26921 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点C端插入PA tag序列载体。可在哺乳动物细胞内表达。
大小: 6.0kbp
组成 : 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度 : 1.0 μg/μL
选择标记（E.coli和哺乳动物细胞）：潮霉素B。
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
168-26871 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点N端插入PA tag和白介素-2信号序列。
载体大小：5.2 kbp
组成 ：10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度 ：1.0 μg/μL
选择标记：博来霉素
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
016-25844 |
for Immunochemistry | 50 ml(Net 25 ml) | – |
替代品：018-25843 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 用于纯化PA tag融合蛋白的树脂。树脂上偶联有抗PA tag抗体。该磁珠在弱酸溶液的洗涤后可再生。组成： 1 x PBS 水溶液和0.05w/v% .叠氮化钠, pH 7.2
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
162-26891 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
替代品：167-27701 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点N端插入PA tag和白介素-2信号序列。
载体大小：5.2 kbp
组成：10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度 ：1.0 μg/μL
选择标记 ：博来霉素
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
165-26881 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点C端插入PA tag序列载体。可在哺乳动物细胞内表达。
大小: 4.7kbp
组成 : 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度 : 1.0 μg/μL
选择标记（E.coli和哺乳动物细胞）：杀稻瘟菌素S 盐酸盐
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
162-26911 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点N端插入PA tag和白介素-2信号序列。
载体大小： 5.2 kbp
组成：10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度： 1.0 μg/μL
选择标记 ：博来霉素 (Sh ble) gene (BLEOCIN, Zeocin)
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
166-26931 |
for Genetic Research | 20 ug | – |
替代品：169-26921 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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pCAG-Ble载体的多克隆位点N端插入PA tag和白介素-2信号序列。
载体大小：5.2 kbp
组成：10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度：1.0 μg/μL
选择标记 ： 博来霉素
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
169-26921 |
for Genetic Research | 20 ug | – | 7,290.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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pCAG-Ble载体的多克隆位点C端插入PA tag序列载体。可在哺乳动物细胞内表达。
大小: 5.2kbp
组成 : 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
浓度 : 1.0 μg/μL
选择标记（E.coli和哺乳动物细胞）： G418/卡那霉素(E. coli)
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
137-18751 |
for Immunochemistry | 2 ml | – | 7,290.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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重组蛋白纯化检测用
PA标签系统
◆特点
● 通过树脂再生，降低运行成本
● 超高亲和性抗体，实现高回收率、高纯度纯化
● 在动物细胞表达系（HEK293T细胞、CHO细胞等）中，有效纯化蛋白
● PA标签系统是使用可识别肽标签（12个氨基酸残基）的单抗（NZ-1）。日本开发的亲和性纯化标签系统。
● NZ-1单抗对PA tag具有高亲和性和特异性，可应用于Western Blotting、细胞流式分析、免疫组化（ICC）。
通过免疫沉淀，可纯化PA标签融合蛋白以及树脂再生。
● PA标签系统，可一步纯化高纯度PA标签融合蛋白。
◆PA标签系统
Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affi nity antibody against a dodecapeptide derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).
Fujii, Y. et al.
新型亲和标签系统“PA tag”的应用方法~蛋白的纯化及检测~
蛋白科学学会档案, 7, e075 (2014)
◆PA标签表达载体案例
|
载体 |
表达模式 |
宿主细胞 |
MCS启动子 |
|
pCAG |
瞬时表达 |
灵长类（人、猴）、犬细胞等粘着细胞 |
CAG |
和光还推出除上述抗性基因载体外的其他载体。（请点击参考。）
测序用引物序列、其他载体序列的相关详细信息，已附在产品现货说明书中。
另外可点击和光主页/TARGET标签，查看序列信息、Multi Cloning Site(MCS)信息。
◆用PA标签从培养上清中亲和提纯的案例
数据提供：大阪大学 蛋白研究所附属蛋白分析先进研究中心
分子创制学研究室 高木淳一老师，藤井勇树老师
◆Protocol目的蛋白的纯化
１．哺乳类动物细胞转染(HEK293T)
转染处于40-60%融合状态的细胞
培养基：D-MEM, 5%FBS
２．回收培养上清和吸附蛋白树脂
转染48-72小时后，回收约420 mL培养上清，加入8 mL抗PA标签抗体琼脂糖珠，混合2小时（2-10℃）
３．树脂回收
用50 mL的纯化柱。回收步骤2)中的琼脂糖珠
４．树脂洗涤
加入珠4倍量的TBS 缓冲液（20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl），清洗5次
５．PA标签肽从树脂中竞争性洗脱
加入经1×TBS溶液, pH 7.5溶解过的PA 标签肽（终浓度0.1 mg/mL），体积量需为珠的一倍，
然后分10次回收PA标签融合蛋白X
６．SDS-PAGE
样品量
c. sup：5 μL, flow through：5 μL, wash：5 μL,
肽洗脱（1-10）：各10 μL
可纯化PA标签融合蛋白X且不依赖PA标签。→可实现极高纯度的亲和纯化。
◆通过PA tag降低背景的方法
|
|
M: Marker |
在20 mL的昆虫细胞溶解液中加入蛋白Z，使其浓度变为1.0 mg/L后，添加200 μL抗PA标签抗体琼脂糖珠，4℃温度条件下，搅拌3小时。
分别用不同浓度的TBS溶液（0.15 M、0.5 M、1.0 M NaCl）进行调整，用琼脂糖珠50倍量清洗。在回收的各珠中加入0.5 mL 0.1 M Glycine-HCl(pH 2.7)，室温条件下平稳震动5 min。
离心后回收上清，用1 M Tris-HCl (pH 9.0)做中和处理。
SDS-PAGE后进行银染，比较去除污染蛋白之后，不同浓度下的结果。
◆使用案例：Western Blotting
|
地域革新领域 加藤 幸成老师，金子 美华老师 NZ-1显示出与天然抗体具有相同的高检测灵敏度。 |
Lane 1 一抗：抗IDH1抗体（RcMab-1）, 1 μg/mL 二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释 一抗：抗PA tag抗体, 1 μg/mL 二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释 一抗：抗DYKDDDDK标签抗体, 3.5 μg/mL 二次抗体：抗小鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释 |
◆PA标签系列
|
产品名称 |
子类克隆号 |
适用实验 |
规格 |
产品编号 |
包装 |
|
单抗 |
|||||
|
抗PA标签, 大鼠单抗 Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody |
大鼠IgG2a |
IP, WB, FCM, ICC |
免疫化学用 |
016-25861 |
200 μL |
|
012-25863 |
1 mL |
||||
|
HRP标签单抗 |
|||||
|
抗PA标签, 大鼠单抗,过氧化酶结合 Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated |
大鼠IgG2a NZ-1 |
WB |
免疫化学用 |
015-25951 |
200 μL |
|
011-25953 |
1 mL |
||||
|
产品名称 |
子类克隆号 |
规格 |
产品编号 |
包装 |
|
|
抗体结合琼脂糖珠 |
|||||
|
抗PA标签抗体琼脂糖珠 Anti PA tag Antibody Beads |
大鼠IgG2a NZ-1 |
免疫化学用 |
012-25841 |
2 mL(Net 1 mL) |
|
|
018-25843 |
10 mL (Net 5 mL) |
||||
|
016-25844 |
50 mL (Net 25 mL) |
||||
|
识别N端、C端的PA标签 |
|||||
|
抗体结合磁珠 |
|||||
|
MagCaptureTM HP 抗PA标签抗体磁珠 MagCapture™ HP Anti PA tag Antibody Magnetic Beads |
大鼠IgG2a NZ-1 |
免疫化学用 |
137-18751 |
2 mL |
|
|
溶液组成：1×TBS(pH 7.4), 50% glycerol, 0.05 w/v% sodium azide |
|||||
|
产品名称 |
备注 |
规格 |
产品编号 |
包装 |
|
肽 |
||||
|
PA标签肽 PA tag Peptide |
含量（HPLC）95%以上 |
基因研究用 |
167-25501 |
5 mg |
|
163-25503 |
25 mg |
|||
|
清洗溶液 |
||||
|
PA标签清洗溶液 PA tag Washing Solution |
已过滤消毒 |
基因研究用 |
169-27261 |
50 mL |
|
产品名称 |
可选Marker |
产品编号 |
包装 |
|
|
大肠杆菌 |
动物细胞 |
|||
|
瞬时载体 |
||||
|
pCAG-Ble PA 标签-C pCAG-Ble PA tag-C |
Bleomycin |
161-26861 |
20 μg |
|
|
pCAG-Ble PA 标签-N 信号 增加型 pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus |
Bleomycin |
168-26871 |
20 μg |
|
|
pCAG-Bsd PA 标签-C pCAG-Bsd PA tag-C |
Blasticidin S |
165-26881 |
20 μg |
|
|
pCAG-Bsd PA 标签-N 信号 增加型 pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus |
Blasticidin S |
162-26891 |
20 μg |
|
|
pCAG-Neo PA 标签-C pCAG-Hyg PA tag-C |
Hygromycin B |
165-26901 |
20 μg |
|
|
pCAG-Hyg PA 标签-N 信号 增加型 pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus |
Hygromycin B |
162-26911 |
20 μg |
|
|
pCAG-Neo PA 标签-C pCAG-Neo PA tag-C |
Kanamycin |
G418 |
169-26921 |
20 μg |
|
pCAG-Neo PA 标签-N 信号 增加型 pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus |
Kanamycin |
G418 |
166-26931 |
20 μg |
◆相关产品
内参照
下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。
|
产品名称 |
规格 |
产品编号 |
包装 |
|
抗β肌动蛋白单抗 |
免疫化学用 |
013-24553 |
200 μg |
|
011-24554 |
1 mg |
||
|
017-24556 |
5 mg |
||
|
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated |
免疫化学用 |
017-24573 |
200 μL |
|
抗α-微管蛋白, 单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody |
免疫化学用 |
011-25034 |
10 μg |
|
017-25031 |
200 μg |
||
|
013-25033 |
1 mg |
||
|
Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody |
免疫化学用 |
018-25044 |
10 μg |
|
014-25041 |
200 μg |
||
|
010-25043 |
1 mg |
||
|
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody |
免疫化学用 |
016-25523 |
200 μg |
|
014-25524 |
1 mg |
||
|
010-25526 |
5 mg |
||
|
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated |
免疫化学用 |
015-25473 |
200 μL |
蛋白酶抑制剂系列
|
产品名称 |
规格 |
产品编号 |
包装 |
|
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized |
通用型 |
165-26021 |
1 mL用 |
|
161-26023 |
1 mL用×5 |
||
|
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） |
动物细胞 |
163-26061 |
1 mL |
|
169-26063 |
1 mL×5 |
||
|
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） |
2D电泳 |
162-26031 |
1 mL |
|
168-26033 |
1 mL×5 |
||
|
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） |
植物细胞 |
164-26091 |
1 mL |
|
160-26093 |
1 mL×5 |
||
|
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） |
His Tag 纯化※ |
167-26101 |
1 mL |
|
163-26103 |
1 mL×5 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
亲和标签比较表
|
亲和标签 |
TARGET |
PA |
6xHis |
|
氨基酸序列 |
(YPGQ)5V |
GVAMPGAEDDVV |
HHHHHH |
|
残基数 |
21 |
12 |
6 |
|
分子量 (kDa) |
2.34 |
1.16 |
0.84 |
|
等电点（pI） |
5.52 |
3.49 |
7.21 |
|
配体 |
TARGET tag |
PA tag |
Ni, Co, Zn, Cu |
|
亲和珠回收 |
40% Propyleneglycol, |
3M MgCl2, MES(pH6.0) |
0.5M Imididazole(pH7.4) |
|
单抗边界强度 （KD（M）） |
1.0×10-8 |
4.9×10-10 |
Ni-NTA: |
|
单抗 Clone No. |
P20.1(Mouse) |
NZ-1(Rat) |
Merck:HIS. H8(Mouse) |
|
亲和力 |
++++ |
+++++ |
+++ |
|
提纯成本 |
+ |
+ |
+ |
|
多肽洗脱 |
+++ |
+++ |
Imidazole |
|
背景 （培养上清） |
+ |
+ |
+++++ |
|
背景 （细胞裂解物） |
+ |
+ |
++++ |
|
亲和标签 |
DYKDDDDK |
c-Myc |
HA |
GST |
|
氨基酸序列 |
DYKDDDDK |
EQKLISEEDL |
YPYDVPDYA |
– |
|
残基数 |
8 |
10 |
9 |
218 |
|
分子量 (kDa) |
1.01 |
1.20 |
1.10 |
26 |
|
等电点（pI） |
3.97 |
4.00 |
3.56 |
– |
|
配体 |
DYKDDDDK tag |
c-Myc tag |
HA tag |
GST |
|
亲和珠回收 |
Tris-HCl, |
Tris-HCl, |
Tris-HCl, |
Glutathione, |
|
单抗边界强度 （KD（M）） |
2.8×10-8 |
2.2×10-9 |
2.8×10-9 |
Glutathione: |
|
单抗 Clone No. |
M2(Mouse) |
9E10(Mouse) |
3F10(Mouse) |
Wako:5A7(Mouse) |
|
亲和力 |
++++ |
++++ |
++++ |
++++ |
|
提纯成本 |
++ |
++ |
++ |
+ |
|
多肽洗脱 |
+++ |
++ |
++ |
Glutathione |
|
背景 （培养上清） |
++++ |
+++ |
+++ |
++++ |
|
背景 （细胞裂解物） |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
追加PA tag系列磁珠
MagCapture™ HP抗PA tag抗体磁珠
PA tag系统是在日本开发并使用的利用多肽标签（12个氨基酸残基）与大鼠单克隆抗体（NZ-1）结合的亲和纯化标签系统1）。NZ-1对PA tag具有高亲和性和特异性，通过免疫沉淀可一步纯化出高纯度的PA tag融合蛋白2）。它还可以应用于蛋白印迹，流式细胞术，免疫细胞染色，利用PA tag洗涤溶液，可以简单地回收使用过的磁珠1,3）。近年来，通过解析PA tag和NZ-1复合物的晶体结构，明确了PA tag标记β-转角的方法4）。利用该特点还发表了《将PA tag插入膜蛋白环区中的应用》的应用文章4）。
这一次，FUJIFILM Wako推出了抗PA tag抗体固相化的磁珠。可用于免疫沉淀法中PA tag融合蛋白的纯化和检测。
◆特点
● 非特异性结合少
● 可对PA tag进行竞争性洗脱、酸洗脱或2 mol/L MgCl2溶液洗脱
● 无需离心
● 可回收利用
◆数据
重组PA tag融合EGFP蛋白的回收实验
确认了对K562细胞裂解液中表达的PA tag融合EGFP蛋白的回收性能。结果表明，可在各种洗脱条件下纯化得到高纯度的重组PA tag融合EGFP蛋白。
抗PA tag抗体磁珠的回收实验
确认了抗PA tag抗体磁珠可再回收性能。结果表明，即使回收使用三次，也不会降低回收性能，可提取到重组PA tagg融合EGFP蛋白。另外，回收使用了PA tag Washing Solution［产品编号：169-27261］。
PA tag肽竞争性洗脱次数的研讨实验
研讨了是否能通过多次重复竞争性洗脱，提高回收量。结果表明，通过多次重复PA tag的竞争性洗脱，可以提高重组PA tag融合EGFP蛋白的回收量。
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
137-18751 |
MagCapture™ HP Anti PA tag Antibody Magnetic Beads |
免疫化学用 |
2 mL |
◆相关产品（载体列表）
| 产品名称（载体名称） | 抗性 | 规格 | 产品编号 | |
| 大肠杆菌抗性 | 真核细胞抗性 | |||
| pCAG-Ble PA tag-C | Bleomycin | 20 μg | 161-26861 | |
| pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus | 20 μg | 168-26871 | ||
| pCAG-Bsd PA tag-C | Blasticidin S | 20 μg | 165-26881 | |
| pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus | 20 μg | 162-26891 | ||
| pCAG-Hyg PA tag-C | Hygromycin B | 20 μg | 165-26901 | |
| pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus | 20 μg | 162-26911 | ||
| pCAG-Neo PA tag-C | Kanamycin | G418 | 20 μg | 169-26921 |
| pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus | 20 μg | 166-26931 | ||
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
[1] Fujii, Y. et al. : Protein Expr. Purif., 95, 240（2014）.
[2] 藤井勇樹 他 : 蛋白質科学会アーカイブ, 7, e 075（2014）.
[3] Kaneko, M. K. et al. :Biochem. Biophys. Res. Commun., 432, 40（2013）.
[4] Fujii, Y. et al. : J. Cell Sci., 129, 1512（2016）.
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
PA tag
亲和纯化标签蛋白！
PA tag 系统是利用高亲和性&高特异性单抗（NE-1）识别肽标签（GVAMPGAEDDVV）的重组蛋白新型检测系统。PA tag 系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化 PA tag 融合蛋白，并可在洗涤后获得再生。中性 pH 条件下 PA tag 肽简单方便地竞争性洗脱 PA tag 融合蛋白。
PA tag 系统的亲和性和特异性优于现有标签系统，抗体琼脂糖可再生 60 次，极大地降低成本，可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术，是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。
◆原理
◆载体列表
|
产品名称（载体名称） |
抗性 |
规格 |
产品编号 |
|
|
大肠杆菌抗性 |
真核细胞抗性 |
|||
|
pCAG-Ble PA tag-C |
Bleomycin |
20 μg |
161-26861 |
|
|
pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus |
20 μg |
168-26871 |
||
|
pCAG-Bsd PA tag-C |
Blasticidin S |
20 μg |
165-26881 |
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|
pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus |
20 μg |
162-26891 |
||
|
pCAG-Hyg PA tag-C |
Hygromycin B |
20 μg |
165-26901 |
|
|
pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus |
20 μg |
162-26911 |
||
|
pCAG-Neo PA tag-C |
Kanamycin |
G418 |
20 μg |
169-26921 |
|
pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus |
20 μg |
166-26931 |
||
◆优点、特色
◆案例、应用
【使用例子：PA 标签抗体，大鼠单克隆抗体（NZ-1）】
NZ-1 是特异性识别 PA tag（GVAMPGAEDDVV）的单克隆抗体，能用于检测动物细胞表达的 PA tag 融合蛋白，亲和性很高并能简单地用肽洗脱！已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。
浓度： 标签表示（约1.0 mg/mL）
配方： 1× PBS（pH 7.5）水溶液
克隆号： NZ-1
亚型： IgG2a
应用： 免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL
免疫沉淀 10 – 50 μg/assay
流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL
免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL
保存条件：2–10°C 避免反复冻融
【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】
标记抗PA tag抗体
PA tag-EGFP-6×His tag，重组，溶液
亲和标签比较
|
亲和标签 |
TARGET |
PA |
6 x His |
c-Mys |
HA |
GST |
|
序列 |
(YPGQ)5V |
GVAMPGAEDDVV |
HHHHHH |
EQKLISEEDL |
YPYDVPDYA |
– |
|
残基数 |
21 |
12 |
6 |
10 |
9 |
218 |
|
分子量（kDa） |
2.34 |
1.16 |
0.84 |
2.34 |
1.16 |
0.84 |
|
配位子 |
TARGET tag |
PA tag |
Ni, Co, Zn, Cu |
c-Myc tag |
HA tag |
GST |
|
抗体琼脂糖的 再利用 |
最高可再生循环利用40次 |
最高可再生循环利用60次 |
不可再生 |
不可再生 |
不可再生 |
不可再生 |
|
重组蛋白 纯化成本 |
+ |
+ |
+ |
++ |
++ |
+ |
|
单克隆抗体结合力（KD(M)）（数字越小，亲和力越高） |
1.0×10-8 |
4.9×10-10 |
Ni-NTA: 1.0×10-5~6 |
2.2×10-9 |
2.8×10-9 |
Glutathione: 1.0×10-5~6 |
|
亲和性 |
++++ |
+++++ |
+++ |
++++ |
++++ |
++++ |
|
和动物细胞外（培养基）的蛋白非特异性结合 |
+ |
+ |
+++++ |
+++ |
+++ |
++++ |
|
和动物细胞内蛋白的非特异性结合 |
+ |
+ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
|
肽洗脱 |
+++ |
+++ |
咪唑洗脱 |
++ |
++ |
谷胱甘肽洗脱 |
本比较表由富士胶片和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化，不能保证各种亲和标签的性能。
Target tag 系统和 Pa tag 系统同属Wako亲和标签系统，详情请联系经销商。
Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”：http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/14.html
1. Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against a dodecapeptide
derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).
2. Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法～蛋白質の精製および検出～蛋白質科学会アーカイブ, 7,e075
(2014)
3. Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 161-26861 | pCAG-Ble PA tag-C pCAG-Ble PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research |
| 168-26871 | pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus pCAG-Ble PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research |
| 165-26881 | pCAG-Bsd PA tag-C pCAG-Bsd PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research |
| 162-26891 | pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus pCAG-Bsd PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research |
| 165-26901 | pCAG-Hyg PA tag-C pCAG-Neo PA 标签-C |
2 0μg | for Genetic Research |
| 162-26911 | pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus pCAG-Hyg PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research |
| 169-26921 | pCAG-Neo PA tag-C pCAG-Neo PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research |
| 166-26931 | pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus pCAG-Neo PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research |
PA tag相关产品
PA tag-EGFP-6×His tag，重组，溶液
本产品是序列中含有PA tag、EGFP和6×His tag的肽，在N末端或C末端分别存在PA tag序列。本产品可用于蛋白质印迹和免疫沉淀的对照。
◆新型亲和标签系统“PA tag”是什么？
PA tag是利用了人平足蛋白的PLAG结构域内序列（GVAMPGAEDDVV）的亲和标签。由于PA tag与抗PA tag抗体的结合力强，特异性高，可以高效地纯化目的蛋白。此外，它可在中性条件下再生抗体结合磁珠，可以循环利用，降低运行成本。
已知PA tag形成蛋白环状结构中的II型的β-转角结构，抗PA tag抗体能与插入环状结构域内的PA tag相结合。为此，PA tag系统拥有环状结构，未来可应用于膜蛋白的纯化和检测。
◆产品概况
● 浓度：约 0.75 mg/mL
● 溶液组成：10 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0, 120 mmol/L NaCl，50 v/v% Glycerol
● 分子量：约 29,000（理论值）
● 宿主：大肠杆菌
● 肽序列：
PA Tag 新型标签系统
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 169-28361 | PA tag（Amino-terminal）- EGFP-6×His tag, recombinant, Solution PA tag（N端）- EGFP-6×His tag, 重组，溶液 |
150 μg | 基因研究用 |
| 166-28371 | PA tag（Carboxy-terminal）- EGFP-6×His tag, recombinant, Solution PA tag（C端）- EGFP-6×His tag, 重组，溶液 |
150 μg | 基因研究用 |
PA tag相关产品
标记抗PA tag抗体
本产品是用荧光素、生物素、红色荧光色素标记抗PA tag、大鼠单克隆抗体的抗体。可用于流式细胞分析。
◆特点
● 带标记，无需二抗
● 可以用于流式细胞分析
◆产品概况
● 抗体亚类：IgG2a
● 溶液组成：含有0.05％叠氮化钠的1×PBS溶液
● 浓度：约0.5 mg/mL（以产品标签为准）
● 免疫动物：大鼠
● 克隆号：NZ-1
● 适用：流式细胞分析
● 推荐浓度：荧光素标记 1:10-1,000
生物素标记 1:10-10,000
红色荧光色素标记 1:10-1,000
◆应用实例
运用红色荧光色素标记抗PA tag进行抗体流式细胞仪分析
PA Tag 新型标签系统
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 010-27721 | Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Fluorescein Conjugated 抗PA tag，大鼠单克隆抗体，荧光素偶联 |
100 μL | 免疫化学用 |
| 017-27731 | Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Biotin Conjugated 抗PA tag，大鼠单克隆抗体，生物素素偶联 |
100 μL | 免疫化学用 |
| 014-27741 | Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Red Fluorochrome（635）Conjugated 抗PA tag，大鼠单克隆抗体，生物素素共轭，红色荧光色素（635）偶联 |
100 μL | 免疫化学用 |
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
012-25863 |
for Immunochemistry | 1 ml | – | 11,000.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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PA tag融合蛋白单抗
克隆号：NZ-1
应用： WB( 1 : 1,000-10,000 ), IP( 10 – 50 μg/asssy), FC ( 1 : 100-10,000 )
免疫动物 :兔子。
浓度：见标签(约1.1mg/mL)
|
品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：室温 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
169-27261 |
for Genetic Research | 50 ml | – | 1,350.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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