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DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞酶试剂盒Takara

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DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6023Q DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥150 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
Takara 6023 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥501
￥401 		DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞  
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 6023)
Ligation Mix 150 μl × 5
按每次反应使用7.5 μl 进行计算，可使用100次。
 
■ 制品说明
DNA片段连接反应频繁用于基因工程实验操作中。DNA的连接通常使用T4 DNA Ligase，但DNA片段的末端形状对T4 DNA Ligase连接反应速度影响很大。因此，根据DNA片段末端形状需要调整酶的添加量和反应时间。本公司研发的DNA Ligation Kit，不需要调整酶添加量和反应时间，可简便、快速地进行DNA连接反应。
DNA Ligation Kit〈Mighty Mix〉是以往DNA Ligation Kit 的升级产品，连接效率高。本制品具有以下特点：
1) 预混型
是酶和Buffer的预混型试剂，只需在DNA中加入Ligation Mix溶液即可高效完成连接反应，操作简便。本制品反复冻融后，反应性能仍然稳定。
2) 也适用于平滑末端和TA克隆
不仅适用于粘性末端连接，也可以高效地进行平滑末端的DNA连接和TA克隆。
3) 连接反应仅需5分钟
25℃反应5分钟即可完成插入片段与质粒载体的连接，节省实验时间。
 
DNA Ligation Kit的反应液量和反应条件
克隆编号 DNA溶液：Ligation Mix (体积比) 反应条件
[1] 质粒载体中插入外源DNA片段
[标准操作流程]
[快速操作流程]		 1：1
 
16℃，30分钟
25℃，5分钟
[2] PCR产物的T载体克隆 1：1 16℃，30分钟
[3] 线性DNA的分子内连接 (自身环化) 1：1 16℃，30分钟
[4] Linker Ligation，Adaptor Ligation质粒载体中插入linker DNA cDNA与连头 (Linker、 Adaptor) 连接
 
1：1
1：2
16℃，30分钟
[5] λ噬菌体中插入外源DNA片段(体外包装) 1：2 26℃，10分钟
* 说明书提供的实验结果是表中使用DNA Ligation Kit获得的实验数据，仅供参考。
 
■ 保存
-20℃。使用前在冰上融化 (5-10分钟)，吸打混匀。已证实反复冻融50次对反应性能没有影响。
 
■ DNA Ligation Kit的操作原理图
 
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
 
■ 使用注意
1. DNA Ligation是-20℃保存的冷冻品，反复冻融不会失活。使用前在冰上融化，吸打混合。
2. 使用本试剂盒获得的DNA连接反应液，可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如果进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，建议乙醇沉淀后再进行电泳。
3. DNA连接反应液直接进行苯酚抽提时，反应液会出现白色浑浊。
4. DNA连接反应后进行乙醇沉淀处理时，向反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇，-20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟后，4℃离心回收DNA。DNA含量较少时，加入Carrier使沉淀效果更好。
 
 

页面更新：2020-11-30 16:04:45

Mighty TA-cloning Kit酶试剂盒Takara

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Mighty TA-cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6028 Mighty TA-cloning Kit 20 Rxns ￥801
￥601 		Mighty TA-cloning Kit Mighty TA-cloning Kit Mighty TA-cloning Kit

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Mighty TA-cloning Kit → Mighty TA-cloning Kit → Mighty TA-cloning Kit → Mighty TA-cloning Kit → Mighty TA-cloning Kit
 
Mighty TA-cloning Kit
Mighty TA-cloning Kit  
Mighty TA-cloning Kit
 
 
■ 制品内容 (20 次量)
pMD20-T vector (50 ng/μl) 1 μg (20 μl)
Ligation Mighty Mix*1 50 μl × 2
Positive Control Insert*2 10 μl
   
*1: Ligation Mighty Mix与DNA Ligation Kit<Mighty Mix> (Code No.: 6023) 是同一种试剂。
*2: 3’端带有“A”突出端的DNA片段 (约200 bp)。 (以E.coli 基因组DNA为模板，使用TaKaRa Ex Taq 进行PCR反应得到的扩增产物。)(10 ng/μl)
 
■ 制品说明
使用Taq DNA聚合酶进行PCR反应，扩增获得的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基。利用3’端附有“A” 碱基的PCR产物进行克隆时，与含有3’-T末端的载体通过T-A碱基互补配对原则进行克隆，此种方法被称为T-A克隆。
Mighty TA-cloning Kit是在短时间内快速地将PCR产物进行T-A克隆的试剂盒。连接反应使用DNA Ligation Kit<Mighty Mix>，操作简便，可在短时间内高效地进行连接反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意事项
1. Ligation Mighty Mix在冰上融解，轻轻混合后再使用。
2. 长片段PCR产物（2 kb以上）进行DNA克隆时，连接反应时间请延长至数小时。
3. 克隆时，根据插入片段的长度和方向，有时即使插入了DNA片段也会有不出现终止密码或读码框不改变的情况发生，在蓝白选择培养基上会形成淡蓝色菌落。出现这种现象时，建议进行菌落PCR确认插入片段。
4. 进行切胶回收纯化DNA片段时要避免UV照射时间过长。长时间照射，DNA会受到损伤，影响克隆效率。
5. PCR用质粒模板与克隆载体 (pMD20-T vector；具有Ampr) 有同样的选择标记基因时，为防止出现质粒模板自身的转化菌落，将PCR反应液凝胶电泳后回收目的片段，纯化后再进行克隆。
 
 

页面更新：2022-07-27 15:04:22