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Matchmaker Gold酵母单杂交系统
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630491	Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System	5 Rxns	￥21,865 ￥17,492
Clontech	630496	Matchmaker Insert Check PCR Mix 1	100 Rxns	￥2,094 ￥1,675

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■ 制品说明

酵母单杂交系统—Matchmaker Gold

Clontech Matchmaker Gold酵母单杂交（Y1H）文库筛选系统为鉴定蛋白质-DNA相互作用提供了简便高效的方法。所有的Matchmaker Gold系统均采用筛选强度较高的Aureobasidin A（AbAr）抗生素报告基因。这种新型的报告子可以高效杀死非抗性克隆，从而大大降低了背景克隆的生长。

Matchmaker Gold酵母单杂交系统

在Matchmaker Gold酵母单杂交系统中，目标/bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi报告载体上。用同源重组的方法将携带bait的pAbAi载体整合到Y1HGold酵母基因组中，用于后续文库的筛选。

一步法构建和筛选文库

在文库中，可能与bait DNA序列相互作用的prey蛋白的cDNA与GAL4 AD融合表达，文库通过SMART技术与同源重组技术直接构建于Y1HGold[Bait-AbAi]报告菌株中。当prey蛋白与bait序列结合时，相应的GAL4 AD会激活AbAr的表达，酵母可在添加了AbA的培养基上生长。在文库筛选中，编码prey蛋白的质粒可以较容易地从酵母克隆中分离出来进行后续的验证分析。

快速获得结果！

Matchmaker Gold 单杂交文库筛选过程直接、快速、简单！ 第一步：将1-3个目标DNA序列（bait）重复串联后克隆到pAbAi中。 第二步：将线性化的pBait-AbAi载体整合到Y1HGold酵母基因组中，获得携带bait的酵母菌株，                 并在SD/-Ura培养基上筛选。 第三步：利用Insert Check PCR Mix 1，通过PCR对整合到酵母基因组的bait DNA序列进行验证分析。 第四步：利用SMART技术合成与线性化的pGADT7-Rec末端具有相同序列的Prey蛋白的cDNA。 第五步：将合成的cDNA和线性化的pGADT7-Rec共转化到上述Y1HGold bait菌株中构建文库，同                 时利用AbA选择培养基进行筛选。 第六步：收集获得的阳性克隆，并用Matchmaker Insert Check PCR Mix 2对文库中的插入片段进行分析。

菌落PCR分析

在Y1H及Y2H筛选中，菌落PCR是分析bait菌株并对阳性克隆进行分类的简便、快速的方法。用Matchmaker Insert Check PCR Mix 1可以验证整合到Y1H酵母基因组的bait DNA序列，用Matchmaker Insert Check PCR Mix 2可以快速分析单杂及双杂筛选中阳性克隆子的插入片段。

酵母单杂交培养基

我们的酵母单杂交培养基套装里包含有配套于Clontech Matchmaker Gold One-Hybrid操作中所用到的全套的培养基。

■ 制品特点

1. 表现较好的酵母单杂交系统 2. AbA抗性筛选大大消除背景克隆 3. 在酵母体内直接完成文库构建和筛选

产品详情请点击：

页面更新：2019-12-29 15:03:26

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Matchmaker Gold酵母双杂交系统
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630489	Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System	Each	￥12,038 ￥9,630

自激活检测                   自激活检测               ↓     自激活检测     → OR → → ↓               确认诱饵蛋白质表达

■ 制品说明

Matchmaker Gold 酵母双杂交系统

Matchmaker Gold酵母双杂交系统是我们深受欢迎的Matchmaker产品线中研究蛋白—蛋白相互作用的一款产品。这得益于系统中所包含的新的Y2H Gold酵母菌株、更加严密的筛选报告基因、简单易用的文库、高水平表达的载体以及基于SMART技术的文库构建试剂盒。

Matchmaker酵母双杂交系统

在基于GAL4的Matchmaker酵母双杂研究中，bait蛋白与GAL4的DNA结合域（BD）融合表达，而作为文库的prey蛋白与GAL4的激活结构域（AD）融合表达。当bait蛋白与库（prey）蛋白有相互作用时，DNA-BD与AD之间相互接近从而激活4个相互独立的报告基因（AUR1-C、 ADE2、HIS3和 MEL1）的表达。

Matchmaker酵母双杂交系统的功能

·发现新的与已知蛋白互作的蛋白 ·确认两个蛋白之间的相互作用 ·鉴定参与蛋白相互作用的区域

为什么需要4个报告基因？

酵母双杂系统只采用HIS3营养报告基因筛选蛋白-蛋白互作时，经常会获得大量的背景克隆和假阳性。背景克隆是由于营养报告基因泄露表达引起的，而假阳性是由于prey蛋白无需与bait蛋白互作即可识别和结合报告基因上游序列引起的。 Matchmaker Gold系统是采用4个报告基因/3个不同bait识别序列的双杂交系统。Matchmaker Gold系统采用新型的、稳定的酵母双杂抗生素AbA，可以有效杀死非抗性克隆，从而大大降低了背景克隆的生长。同时，Matchmaker Gold系统有效地缩减了假阳性，这是由于任何prey蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列，激活4个报告基因的表达。

4个报告基因

Matchmaker Gold双杂交系统采用1个AbA抗生素筛选报告基因、2个营养筛选报告基因、1个蓝白斑筛选报告基因。

酵母双杂交培养基套装

我们的酵母双杂交培养基套装里包含配套于Clontech Matchmaker Gold Two-Hybrid 操作中所用到的全套的培养基。

■ 制品特点

1. 较低的假阳性率 2. 4个报告基因，包括 Aureobasidin A（AbA）抗生素抗性筛选基因 3. 简便的“Mating”，接合方法 4. 具有广泛兼容性的“Mate & Plate”文库

产品详情请点击：

页面更新：2019-12-30 13:16:56