Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector酶试剂盒Takara

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Human iPS Cell Generation All-in-One Vector
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3671 Human iPS Cell Generation All-in-One Vector 10 μg ¥10,014 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
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□ 浓度 0.5 μg/μl
     
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
Limited Use Label License: [L44]
 
■ 制品说明
本制品是制备Human iPS细胞诱导用逆转录病毒所使用的载体。在高效、高表达逆转录病毒载体pDON-5 DNA(Code No.: 3658)上,插入了iPS细胞诱导用基因OCT3/4SOX2KLF4LIN28NANOG,各基因以Thosea asigna virus 的2A*1序列连接在一个载体上。本载体与Retrovirus Packaging Kit Ampho(Code No.: 6161)中的pGP Vector以及pE-ampho Vector共转染至逆转录病毒制备用细胞G3T-hi(Code No.: 6163)后,可以制备iPS诱导用逆转录病毒。如此制备的重组逆转录病毒由于和RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)(Code No.: T100A/B)有高亲和性,所以在向目的细胞中导入基因时,使用经RetroNectin®处理后的培养皿或平板,可以得到较高的基因导入率,有效提高iPS细胞的诱导效率。
*1 5种基因转录在同一个mRNA上,翻译时在2A序列的特定位点被分割,使5种蛋白质可以等量表达。
 
■ 保存
-20
 
■ 各载体的遗传信息
  基因名   GenBank Accession No.
  OCT4   NM_002701.4
  SOX2   NM_003106.2
  KLF4   NM_004235.3*2
  LIN28   NM_024674.4
  NANOG   NM_024865.2
*2 更新的NM_004235.4中,CDS的5’端追加了对应9个氨基酸的碱基。本制品的KLF4基因中不含N端的这9个氨基酸的序列,已经确认可以有效诱导iPS细胞。
 
■ 载体图谱
Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
 
 
 
 
 

页面更新:2022-03-30 09:27:27

StemSure® on-feeder hPSC培养基 人ES/iPS细胞培养用液体培养基

  • 产品特性
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  • 参考文献

人ES/iPS细胞培养用液体培养基StemSure® on-feeder hPSC培养基                              人ES/iPS细胞培养用液体培养基

StemSure® on-feeder hPSC培养基

 


  本产品是用于在饲养层细胞上培养人ES/iPS细胞的培养基。

  由于已经预先混合了基础培养基,血清替代品,氨基酸溶液,还原剂等,可以节省制备培养基的时间。由于不含bFGF,请在使用前加入bFGF。


StemSure® on-feeder hPSC培养基                              人ES/iPS细胞培养用液体培养基



◆特点


● 优秀的未分化维持性

● 预混型,仅需添加bFGF即可使用。

 


◆实验项目


● 无菌试验

● pH

● 渗透压

● 内毒素

● 支原体检测

 


数据


■ 细胞形态

StemSure® on-feeder hPSC培养基                              人ES/iPS细胞培养用液体培养基



■ 碱性磷酸酶染色

StemSure® on-feeder hPSC培养基                              人ES/iPS细胞培养用液体培养基


  使用本产品和其他公司同等产品培养人iPS细胞201B7株,显示了传代3次后碱性磷酸酶的染色结果。可观察到使用本产品的每个培养皿中的分化集落数量很少,确认其具有良好的未分化维持性能。



◆产品列表

产品编号

产品名称

规格

包装

195-18275

StemSure® on-feeder hPSC Medium
StemSure® on-feeder hPSC培养基

细胞培养用

500 mL



◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

包装

064-04541

Fibroblast Growth Factor(basic),

Human, recombinant [bFGF/FGFb/FGF2]
人重组碱性成纤维细胞生长因子

细胞生物学用

50 μg

060-04543

100 μg

064-05381

Fibroblast Growth Factor(basic),Human, recombinant, Animal-derived-free [bFGF/FGFb/FGF2]
人重组碱性成纤维细胞生长因子,无动物源

细胞生物学用

50 μg

068-05384

100 μg

030-24021

CultureSure® Y-27632 endotoxin, mycoplasma tested
CultureSure® Y-27632内毒素,支原体测试完成

细胞培养用

1 mg

036-24023

5 mg

034-24024

25 mg

253-00591

5mmol/L Y-27632 Solution
5mmol/L Y-27632溶液

细胞培养用

300 μL

039-24591

CultureSure® 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free
CultureSure® 10mmol/L Y-27632溶液,无动物源

细胞培养用

300 μL

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

StemSure® hPSC培养基△ 人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

  • 产品特性
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  • 参考文献

人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基StemSure® hPSC培养基△                              人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

StemSure® hPSC培养基△

  本品是在无饲养层条件下,可用于人ES/iPS细胞未分化维持培养的无动物血清培养基。继代培养时添加 Y-27632,可实现单细胞的继代培养。(本品不含Bfgf)


StemSure® hPSC培养基△                              人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

◆ 特点


● 不含动物来源成分或白蛋白,批次差异小

● 非医药用外毒物、剧毒物,处理简单

● 可使用 Matrgel®、iMtrix-511、玻璃粘连蛋白等涂层剂

● 可使用 Accutase、TrypLE™ Select、TrypLE™ Express、hPSC 解离溶液等解离液

 

细胞形态


  本产品的培养的人iPS细胞,不观察分化的形态,也可稳定地培养。


StemSure® hPSC培养基△                              人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

【细胞株】

人iPS细胞 201B7株

【培养基组成】

StemSure® hPSC 培养基△+35 ng/ml Bfgf

【涂层剂】

Matrigel®

【播种细胞数】

1X10cells/well(用6孔板)

 

 数据提供:

 国立研究开发法人 产业技术综合研究所 创药基盘研究部门 干细胞工学研究组 小沼泰子、伊藤弓弦

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
197-17571 StemSure® hPSC MediumΔ 100ml 细胞培养用
193-17573 StemSure® hPSC MediumΔ 100mlX4 细胞培养用

灵长类ES/iPS细胞用培养基 Primate ES cell medium

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灵长类ES/iPS细胞用培养基灵长类ES/iPS细胞用培养基                              Primate ES cell medium

Primate ES Cell Medium

  ReproCELL灵长类动物胚胎干细胞培养基不含血清,可在饲养层上培养胚胎干细胞或多能性诱导干细胞。

 

◆特点


● 培养人ES/iPS细胞的最佳培养基。

● 已对所有批次进行了iPS细胞的培养试验、渗透压、pH值、灭菌、支原体检测等检查,请放心使用。

●  无血清。

注1)由于培养基里不含bfGF,进行人ES/iPS细胞培养时请自行添加。

※保存温度:-20℃

※含有医药用以外的剧毒物0.0008%的2-巯基乙醇

◆图例


灵长类ES/iPS细胞用培养基                              Primate ES cell medium

使用201B7株人iPS细胞、灵长类ES细胞用培养基

(RCHEMD001) +5 ng/mL bFGF (RCHEOT002) 

和饲养细胞(MEF) (RCHEFC003) 进行培养。

相关产品

产品编号 产品名称 规格

RCHEFM001

Freezing medium for human ES/iPS cells (25mL)

灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞冻存液

25mL

RCHETP002

Dissociation solution for human ES/iPS cells (30mL)

灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞分离液

30mL

RCHEMD007

ReproXF (500mL)

灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基(无异源蛋白成分)

500mL

RCHEMD006

ReproFF2 (500mL)

灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基(无饲养层培养)

500mL

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
RCHEMD001 Primate ES cell medium
灵长类胚胎干细胞/诱导多能干细胞培养基
500mL

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) 新型人iPS/ES细胞标记抗体

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新型人iPS/ES细胞标记抗体iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

iPSelector<Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)>



iPSelector是一款使用人iPS细胞作为免疫原制备的,可识别lacto-N-fucopentaoseⅠ(LNFPⅠ)的抗体。LNFPⅠ是存在于未分化的人ES细胞、人iPS细胞表面的糖链,由于细胞分化后不再表达LNFPⅠ,因此iPSelector可作为未分化iPS/ES细胞的标记物使用。

另外,由于该产品与未分化人iPS/ES细胞结合会发挥细胞伤害作用,因此亦可用于去除未分化iPS/ES细胞。

 

※ 本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。

※ 本产品基于立命馆大学 综合科学技术研究机构与药学部及(独)医药基础、健康、营养研究所的共同研究成果

 商品化而成。



关于人iPS/ES细胞标记抗体


迄今为止,iPS/ES细胞标记抗体(TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等)被广泛用于确认人iPS/ES细胞的未分化状态。然而,这些抗体大部分都是使用胚胎癌细胞(embryonal carcinoma细胞:EC细胞)作为免疫原开发的抗体,与EC细胞交叉性很强。而且,如TRA(tumor rejecton antigen)的名字所示,TRA抗体能够与多种癌细胞反应。综上所述,TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等并不能称为iPS/ES的特异性抗体。

iPSelector <Anti-LNFP I, Human, Mouse-Mono(R-17F)>来源于人iPS细胞作为免疫原制备的杂交瘤细胞,从中筛选出满足人iPS细胞阳性、人EC细胞阴性条件的单克隆抗体。由于本产品几乎不与EC细胞交叉反应,能够高选择性、特异性地识别未分化人iPS/ES细胞,因此可以用作新型人iPS/ES细胞标记抗体。

 


◆特点


● 特异性识别未分化人iPS/ES细胞的小鼠单克隆抗体(亚型:IgG1,克隆号:R-17F)

● 可用作识别人iPS/ES细胞的标记抗体。

● 即使是人iPS/ES细胞集落的内部,也能够均匀地染色所有人iPS / ES细胞的细胞膜。

● 与未分化人iPS/ES细胞结合时会发挥细胞伤害作用,可用于去除未分化iPS/ES细胞。

 

■ 比较iPSelector与现有标记抗体的细胞结合性


不同于目前常用的人多能干细胞标记抗体TRA-1-60,TRA-1-81等,iPSelector虽然与iPS细胞(Tic)以及ES细胞(KhES-3,H9)结合良好,但基本不与EC(2102Ep,NCR-G3)细胞结合。

细胞

本产品

TRA-1-60

TRA-1-81

SSEA-3

SSEA-4

SSEA-1*

Nanog

表位

糖脂质

硫酸角质素

硫酸角质素

球蛋白

球蛋白

LeX

转录因子

Tic (iPS)

++++

++++

++++

++++

++++

+

+++

KhES-3 (ES)

+++

++++

++++

+++

++++

+

+++

H9 (ES)

++++

++++

++++

+++

++++

+/-

+++

2102Ep (EC)

+/-

++++

++++

+++

+++

+

+++

NCR-G3 (EC)

++

++++

++++

+++

++++

++

++++

*SSEA-1小鼠ES/iPS标记抗体

 


◆应用实例

■ 蛋白印迹

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

进行5 μg细胞裂解液的蛋白印迹。


左:人iPS细胞(LNFPⅠ表达)

右:HEK293细胞(LNFPⅠ不表达)

稀释度:2,000倍(0.5 μg/mL)

二抗:Anti-Mouse IgG, Goat-Poly, HRP(KPL公司 #5220-0337)

化学发光底物:Trident plus Western HRP Substrate(GNT公司 #GTX400006)

检测:使用LuminoGraph I (ATTO)在1 min内检测

 

由于LNFPⅠ为糖链,可在蛋白印迹中观察到多条条带。这些条带都为未分化人iPS特异性条带,而在HEK293细胞中未检测出。

■ 免疫细胞染色

使用iPSelector和现存的标记抗体,染色人iPS细胞集落。在SSEA-3抗体和SSEA-4抗体中,无法染色所有人iPS细胞,但iPSelector可以均匀染色细胞集落中包含的所有人iPS细胞的细胞膜。

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

■ 流式细胞仪


将iPSelector用于流式细胞仪。

由图可知,阴性对照无法识别未分化人iPS细胞(仅二抗/下图紫色部分),但iPSelector可以识别(下图橙色部分)。

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

■ Functional Assay(对人iPS细胞的浓度依赖性细胞毒性)


iPSelector显示出较强的人iPS/ES细胞特异性细胞毒性(补体非依赖性)(左图)。通过二抗处理大幅增加了细胞毒性(右图)。

已经确认了不仅对单细胞悬液中的细胞的毒性,而且对形成细胞集落的细胞也有毒性。细胞死亡的机制是通过坏死而非凋亡。

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

左图:iPSelector与人iPS细胞株(Tic细胞)在4°C下孵育45 min后的活细胞数。iPSelector与同型的α-MBP抗体

左图:(对照)不同,拥有抗体浓度依赖性的细胞伤害作用。

右图:iPSelector浓度为1 μg/100 μL时添加二抗能进一步增强细胞毒性。添加0.1μg/100μL二抗时,90%以上的细

左图:胞被杀死。

■ iPSelector的人ES/iPS细胞伤害活性


除了Tic细胞株(人iPS细胞)以外,iPSelector对世界上常用的人iPS细胞株201B7和人ES细胞株H9以及KhES-3也显示相同的细胞伤害活性。将细胞和抗体在4℃下孵育45 min,活细胞数量随iPSelector浓度的增加而减少。

iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))                              新型人iPS/ES细胞标记抗体

◆抗体信息


● 免疫原:人iPS细胞(Tic)

● 小鼠单克隆抗体(克隆号:R-17F)

● 亚型:IgG1

● 验证交叉性:人

● 表位:存在于人iPS/ES细胞膜表面的糖脂质的糖链部分lacto-N-fucopentaoseⅠ 

● (LNFPⅠ: Fuc 1-2Gal 1-3GlcNAc 1-3Gal 1-4Glc)

● 应用:免疫细胞染色、蛋白印迹、流式细胞术、去除未分化人iPS/ES细胞

● 产品规格:Protein A纯化((1mg/mL,添加50%甘油,未添加防腐剂)

 


◆参考文献


1. Kawabe, K., et al., Glycobiology, 23, 322, (2013).

2. Matsumoto, S., et al., J. Biol. Chem., 290, 20071, (2015).

3. Nakao, H., et al., Glycoconj. J., DOI 10.1007/s10719-0169-9710-2



 ※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
FDV-0014A iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) 25 μL
FDV-0014B iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) 100 μL

未分化标记抗体 用于人iPS细胞检出

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用于人iPS细胞检出未分化标记抗体                              用于人iPS细胞检出

未分化标记抗体



  Nanog、Oct3/4、Sox2是与促进自我复制能力和维持未分化状态相关的转录因子。由于发现在人ES/iPS细胞中高水平表达,Nanog、Oct3/4、Sox2可作为人ES/iPS细胞的未分化标记被广泛使用。



◆抗Nanog,兔


● 抗原:小鼠Nanog

● 形式:磷酸盐缓冲液,50w/v%甘油

● 提取:从兔血清中亲和提取

● 稀释倍数:Western Blot 1:500

               免疫组化 1:200

※在使用时请选择适合实验的浓度

数据


人iPS细胞201B7株(稀释倍数×200)


未分化标记抗体                              用于人iPS细胞检出



◆抗Oct3/4,兔


● 抗原:小鼠Oct3/4(1-134 aa.)

● 形式:磷酸盐缓冲液,50w/v%甘油

● 提取:从兔血清中亲和提取

● 稀释倍数:Western Blot 1:1,000

      免疫组化 1:500

※在使用时请选择适合实验的浓度

数据


人iPS 细胞201B7株(稀释倍数×500)


未分化标记抗体                              用于人iPS细胞检出



◆抗Sox2,兔


● 抗原:小鼠Sox2

● 形式:磷酸盐缓冲液,50w/v%甘油

● 提取:从兔血清中亲和提取

● 稀释倍数:Western Blot 1:1,000

               免疫组化 1:200~500

※在使用时请选择适合实验的浓度

数据


人iPS 细胞201B7株(稀释倍数×200)


未分化标记抗体                              用于人iPS细胞检出



◆产品列表

产品编号

产品名称

规格

包装

018-27521

Anti Nanog, Rabbit

免疫化学用

100 μL

015-27531

Anti Oct3/4, Rabbit

免疫化学用

100 μL

012-27541

Anti Sox2, Rabbit

免疫化学用

100 μL


◆相关产品


荧光标记rBC2LCN

  

rBC2LCN对人ES/iPS细胞表面的足糖萼上的粘蛋白样O 型糖链H-type3(Fucα 1-2Galβ 1-3GalNAc)具有高亲和性,因此可用作人ES/iPS细胞的未分化标记。用荧光素标记后,只需添加到培养液中,就能对未分化人ES/iPS活细胞进行染色。


产品编号

产品名称

规格

包装

029-18061

BC2LCN(AiLecS1) Lectin, recombinant, Solution
BC2LCN(AiLecS1)凝集素

糖链研究用

1 mg

025-18063

1 mg×5

180-02991

rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)
人iPS未分化标记染料rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)

细胞染色用

100 μL

186-02993

100 μL×5

186-03211

rBC2LCN-547 (AiLecS1-547)
人iPS未分化标记染料rBC2LCN-547 (AiLecS1-547)

细胞染色用

100 μL

182-03213

100 μL×5

185-03161

rBC2LCN-635 (AiLecS1-635)
人iPS未分化标记染料rBC2LCN-635 (AiLecS1-635)

细胞染色用

100 μL

181-03163

100 μL×5

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

抗硫酸角质素单克隆抗体(R-10G) 人iPS/ES细胞标记抗体

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抗硫酸角质素单克隆抗体(R-10G)抗硫酸角质素单克隆抗体(R-10G)                              人iPS/ES细胞标记抗体

人iPS/ES细胞标记抗体

◆特点


● 高选择性识别人iPS/ ES细胞,几乎不识别EC细胞

● 使用简便的IgG1型抗体



◆案例


抗硫酸角质素单克隆抗体(R-10G)                              人iPS/ES细胞标记抗体

〈检测条件〉

一抗 :

   A. TRA-1-81抗体(阳性对照)

   B. 抗硫酸角质素,单克隆抗体(R-10G)

 

二抗 :

   FITC标记二抗

 

细胞:人iPS细胞 201B7株 On-Feeder培养


: DAPI

绿 : FITC(抗体)


参考文献

Kawabe, K. et al., Glycobiology, 23(3), 322 (2013).


欲了解更多相关产品请点击文字:A-83-01, MF



产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
011-25811 Anti Keratan Sulfate,Monoclonal  Antibody(R-10G) 200 μL
017-25813 Anti Keratan Sulfate,Monoclonal  Antibody(R-10G) 1 mL

荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)

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  • 参考文献

荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)未分化人ES/iPS细胞检测试剂

仅需添加培养液便可检出人ES/iPS细胞!

荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)



◆rBC2LCN(AiLecS1)

  rBC2LCN(AiLecS1)是在伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cenocepacia)来源凝集素 BC2L-C 的 N末端域表达的重组凝集素。

  由于 rBC2LCN 对存在于人ES/iPS细胞表面的足糖萼蛋白(Podocalyxin)上的粘蛋白样O-型糖链的H型3(Fucα1-2Galβ1-3GalNAc)具有高亲和力,因此可用作人 ES/iPS 细胞的未分化标志物。

  本产品是荧光染色标记,能直接添加到人 ES/iPS 细胞的培养液中,实现未分化活细胞分析。 适用于未分化细胞检测用标记。可用于细胞染色,流式细胞仪。另外,使用本品持续培养数日已确认细胞无毒性。

  我们供应绿色荧光标记(FITC),黄色荧光标记(Cy3),红色荧光标记(Cy5)的三种类型的系列商品。


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)


◆特点


● 添加到培养基即可进行染色

● 无需固定细胞,活细胞也可直接进行明显染色

● 细胞毒性低,染色后也可培养

● 识别 Tra-1-60, Tra-1-81, SSEA-3, SSEA-4 细胞表面存在的糖链

● 可用于细胞染色和流式细胞仪



产品概述


● 已进行无菌试验(0.1 μm 过滤器进行灭菌)

● PBS(-) 溶液

● 使用时稀释比

   Live Cell Imaging 1:100~1,000
   Flow Cytometry 1:100~1,000

● 激发波长/发射波长


Excitation

Emission

rBC2LCN-FITC

495 nm

520 nm

rBC2LCN-547

551 nm

565 nm

rBC2LCN-635

634 nm

654 nm



◆使用方法


细胞染色

活细胞染色(Live Cell Imaging)

1. 准备培养中的人 ES/iPS 细胞

2. 每 1 mL 的培养基添加 1~10 μL 的荧光标记 rBC2LCN

3. 37℃,5%CO孵育 30 分钟。

4. 更换新的培养基或者 HBSS(+)。

5. 利用荧光显微镜观察


固定细胞染色

1. 准备培养中的人 ES/iPS 细胞

2. 除去培养基,用 HBSS(+) 洗净。

3. 添加 4%多聚甲醛(PFA)溶液,室温静置 10~20 分钟。

4. 除去 PFA 后,用 D-PBS(-) 洗净三次。

5. 添加 D-PBS(-)。

6. 每 1 mL 的 D-PBS(-) 添加 1~10 μL 荧光标记 rBC2LCN。

7. 37℃,5% CO孵育 30 分钟。

8. 更换 D-PBS(-)。

9. 利用荧光显微镜观察。


流式细胞仪

1. 准备培养中的人 ES/iPS 细胞。

2. 使用细胞分散液,分散成单细胞。

3. 将细胞分散液移至管内,1,000 rpm 离心 3 分钟。

4. 除去上清液,用 FCM Buffer* 重悬细胞,离心后,舍弃上清液。

* FCM Buffer: D-PBS(-)和HBSS(-)含有 10 mmol/L EDTA,1% BSA

5. 用 FCM Buffer 重悬出 5×10cells/mL 的细胞悬浮液

6. 每 1 mL 细胞悬浮液,添加 1~10 μL 的荧光标记 rBC2LCN。

7. 室温,避光静置30分钟。

8. 1,000 rpm 离心三分钟,除去上清液。

9. 用 FCM Buffer 重悬细胞,离心后,除去上清液。

10.  适量的 FCM Buffer 再悬浮细胞。

11.  进行流式细胞术。


使用注意

1. rBC2LCN 染色可以维持 2~3天。

2. 使用含有血清的培养基可能使信号背景变高

3. 根据流式细胞仪进行细胞分选时,当细胞分散或 FCM 缓冲液的终浓度到达 10 μmol/L 时,请添加 Y-27632。



◆人iPS细胞的活细胞染色(Live Cell Imaging)


● 用 rBC2LCN-FITC, rBC2LCN-635 以及 Hoechst33342 对人 iPS 细胞 201B7 株进行染色处理。(无细胞固定)


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)


(稀释倍数 1:1,000)



● 用 rBC2LCN-FITC、Tra-1-60、Tra-1-81、SSEA-4 对人 iPS 细胞 201B7 株进行染色处理。

   2小时后确认染色图像。(未固定细胞)


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)


(稀释倍数 1:100)       



★ 与 Tra-1-60、Tra-1-81 相比较,rBC2LCN 的活细胞染色度更强。

★ 即使交换培养基,rBC2LCN 染色第二天后染色效果依然明显。



◆人ES细胞的活细胞染色(Live Cell Imaging)


  使用 rBC2LCN-FITC 对人 ES 细胞 WA01 株进行染色(未细胞固定)。细胞的一部分无法维持未分化状态而进行分化。如果使用 rBC2LCN-FITC 对活细胞进行染色,以维持未分化状态部分已染色,而已分化部分未染色来进行区分。


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)


<数据提供 国家研究与发展公司先进工业科学和技术研究院 新药开发的基础研究部门恭子小沼老师,伊藤弦老师>

◆人 iPS 细胞固定后染色


  将人 iPS 细胞 201B7 株用多聚甲醛固定后,使用 rBC2LCN 和 DAPI 进行细胞染色。


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)


对于人 iPS 细胞毒性评估

  向人 iPS 细胞 201B7 株的培养液中分别添加其 1/1,000、1/100、1/50 量的 rBC2LCN-FITC,持续培养。其结果是,不存在 rBC2LCN-FITC 浓度对毒性影响,不同浓度的细胞增殖程度相同程度。


 荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)

 

〔细胞株〕
 人iPS细胞 201B7株

〔培养基组成〕
 StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF

〔涂层〕
 Matrigel® hESC-Qualified Matrix

〔细胞接种数目〕
 4×10cells/well(12孔板)

 使用Flow Cytometry进行人iPS细胞分离

 使用rBC2LCN-FITC及rBC2LCN-6547、rBC2LCN-635对人iPS细胞201B7细胞株和人正常二倍体成纤维细胞染色,进行流式细胞术。

 实验结果:未分化的人iPS细胞与分化的人二倍体成纤维细胞成功分离。


荧光标记 rBC2LCN(AiLecS1)



产品列表


产品编号

产品名称

等级

容 量

180-02991
186-02993

人iPS未分化标记染料rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)

rBC2LCN-FITC 【AiLecS1-FITC】
    Ex. 495nm, Em. 520nm

用于细胞染色

100 μL
  100 μL×5

186-03211
182-03213

 人iPS未分化标记染料rBC2LCN-547   (AiLecS1-547)

rBC2LCN-547 【AiLecS1-547】
    Ex. 551nm, Em. 565nm

用于细胞染色

100 μL
  100 μL×5

185-03161
181-03163

人iPS未分化标记染料rBC2LCN-635   (AiLecS1-635) 

rBC2LCN-635 【AiLecS1-635】
    Ex. 634nm, Em. 654nm

用于细胞染色

100 μL
  100 μL×5


◆相关产品


★ rBC2LCN 剥离液 ★

本产品能够将结合在人ES细胞▪ 人iPS细胞表面糖链的 rBC2LCN 凝集素从细胞里面剥离出来。剥离 rBC2LCN 之后的细胞能够进行抗体染色,可以继续培养。


产品编号 产品名称 等级 规格
182-03171

rBC2LCN剥离溶液

rBC2LCN Stripping Solution

【AiWashS1】

用于细胞培养 10 mL

★ BC2LCN 凝聚素,重组体、溶液未标识 rBC2LCN 系列


产品编号

产品名称

等级

规格

029-18061
025-18063

BC2LCN (AiLecS1)凝集素 

BC2LCN 【AiLecS1】 Lectin, recombinant, Solution

糖链研究用

1 mg
1mg×5


★ StemSure® hPSC 培养基Δ无饲养层细胞条件下可用于维持培养人多功能干细胞(ES/iPS细胞)的无血清液态培养基。原料不含动物体来源成分。


产品编号

产品名称

等级

规格

197-17571
193-17573

StemSure人多能干细胞培养基

StemSure® hPSC Medium Δ

用于细胞培养

100 mL
100 mL×4

064-05381
068-05384
060-05383

成纤维细胞生长因子(碱性),人,重组,无动物衍生物

Fibloblast Growth Factor (basic), Human, recpmbonant,   Animalderived-free 【bFGF/FGF2】

細胞生物学用

50 μg
100 μg
1mg

160-27051

hPSC解离溶液

hPSC Dissociation Solution

 人类iPS細胞用单体细胞分散剂。

用于细胞培养

100 mL



★ StemSure® 系列
   已通过小鼠 ES 细胞 D3 株品质测验。


产品编号

产品名称

等级

规格

197-16275

StemSure D-MEM(高糖)含酚红和丙酮酸钠

StemSure® D-MEM with Phenol Red and Sodium Pyruvate

用于细胞培养

500 mL

198-15781

StemSure10 mmol/L 2-巯基乙醇

StemSure® 10mmol/2-Mercaptoethanol Solution(×100)

用于细胞培养

100 mL

195-15791

StemSure50 mmol/L 硫代甘油(×100)

StemSure® 50mmol/Monothioglycerol Solution(×100)
  可与2ME同等使用的还原剂。医药用外不适用。

用于细胞培养

100 mL

190-15805

StemSure 0.1w/v%明胶溶液

StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution

用于细胞培养

500 mL

195-16031

StemSure干细胞冻存液

StemSure® Freezing Medium

含有BSA的ES细胞・iPS细胞冻存液

用于细胞培养

100 mL

197-17831

StemSure® 人多能细胞冻存液

StemSure® hPSC Freezing Medium, AF

无动物体成分的ES·iPS细胞冻存液

用于细胞培养

100 mL

199-16051
195-16053

StemSure® 白细胞抑制因子溶液,小鼠,重组

StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 

用于细胞培养

10units
  10units×10

● ES・iPS细胞研究用试剂
  2007年iPS细胞确立发表后,许多与iPS细胞相关的文献纷纷发表。在各种各样的文献中报道出来的与ES细胞・iPS细胞的未分化能维持和分化诱导相关的低分子化合物也逐渐阵容化。



● 液态培养基・细胞培养用试剂
  我们有着以液态培养基为首的平衡盐溶液、细胞剥离·分散液、抗生物质溶液、细胞外基质等丰富的产品种类。


参考文献


·   Onuma, Y., et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 431, 524, (2013).

·   Tateno, H., et al.: Stem Cells Transl. Med., 2, 265, (2013).

·   Tateno, H., et al.: Sci. Rep., 4, 4069, (2014).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

ES/iPS细胞培养试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

ES/iPS细胞培养试剂ES/iPS细胞培养试剂


保持ES和iPS细胞处于未分化状态并提高重编程效率

Wako Cat. #

产品简介

级别

CAS No.

单位

012-23021

ALK5抑制剂【TGF-β RI激酶抑制剂Ⅱ】

ALK5 Inhibitor [TGF-β RI Kinase Inhibitor II]

TGF-β RI 激酶/ALK5抑制剂

[Maherali N., et al.: Curr. Biol., 19, 1718 (2009)]

供细胞生物学使用
CAS 446859-33-2

1 mg

027-09951

(±)Bay K8644【L型钙离子通道激动剂】

(±) Bay K8644 [L type Ca²⁺Channel Agonist] 

与Oct3 / 4和Klf4一起使用时,BayK8644能够更有效地培养iPS细胞。

[Shi, Y., et al.: Cell Stem Cell, 3, 568 (2008)]

供生物化学使用
CAS 71145-03-4

5 mg

023-16401

BIX01294【组蛋白甲基转移酶抑制剂】

BIX01294 [Histone Methyltransferase inhibitor]

将神经祖细胞的重编程效率提高到与OCT4、KLF4导入体细胞产生iPS细胞相同的水

平。

[Shi, Y., et al.: Cell Stem Cell, 2, 525 (2008)]

[Shi, Y., et al.: Cell Stem Cell, 3, 568 (2008)]

供细胞生物学使用
CAS 935693-62-2

2 mg

021-17041

Ⅱ型肌球蛋白抑制剂

(-)-Blebbistatin, 98.0+ % (HPLC)    

针对miosin II的特异性抑制剂

组蛋白甲基转移酶抑制剂。在将Oct3/4和Klf4递送至神经干细胞期时,提高iPS细胞

诱导率。在Oct3/4和Klf4递送到成纤维细胞过程中,该产品与(±)BayK8644共

同使用时也会提高iPS细胞诱导率。

[Ohgushi, M., et al.: Cell Stem Cell, 7, 225 (2010)]

供细胞生物学使用
CAS 856925-71-8

1 mg

027-17043 5 mg

029-16241

6-Bromoindirubin-3'-oxime【BIO/GSK-3抑制剂Ⅸ】

6-Bromoindirubin-3'-oxime [BIO/GSK-3 Inhibitor IX]

在无饲养层细胞时可维持人和小鼠ES细胞处于未分化状态。溶于DMSO(确认

1mg/mL)

[Sato, N., et al.: Nature Med., 10, 55 (2004)]

供细胞生物学使用
CAS 667463-62-9

1 mg

029-05393

丁酸   

Butyric Acid

通过低细胞毒性调控细胞增殖。

[Liang, G., et al.: J. Biol. Chem., 285, 25516 (2010)]

Wako特级纯
CAS 107-92-6

25 mL

023-05396

500 mL

041-30101

DNA甲基转移酶抑制剂【RG108】

DNA Methyltransferase Inhibitor [RG108]

通过低细胞毒性调控细胞增殖。

[Tsumura, A., et al.: Genes Cells, 11, 805 (2006)]

10 mg

047-30103

25 mg

056-08221

EHNA盐酸盐   

EHNA Hydrochloride

磷酸二酯酶/腺苷脱氨酶抑制剂。可以用作bFGF的替代品。在无饲养层细胞时有效

且可逆地抑制人胚胎干细胞分化并维持多能性。

[Burton, P., et al.: Biochem. J., 575, 432 (2010)]

供细胞生物学使用 
CAS 58337-38-5 

10 mg

070-05921

GSK 269962A, 97.0+ % (HPLC)【ROCK抑制剂】     

GSK 269962A, 97.0+ % (HPLC) [ROCK Inhibitor]

据报道,ROCK抑制剂能抑制细胞凋亡并提高分离的人胚胎干细胞的存活率和克隆

形成率。

供细胞生物学使用
CAS 850664-21-0

2 mg

088-09281

H-1152二氢氯化物【ROCK抑制剂】

H1152 Dihydrochloride [ROCK Inhibitor]

据报道,ROCK抑制剂能抑制细胞凋亡并提高分离的人胚胎干细胞的存活率和克隆

形成率。

供细胞生物学使用
CAS 871543-07-6

1 mg

095-05951

IQ-1

与Wnt-3a结合并在无血清条件下维持小鼠ES细胞的增殖和多能性。

[Miyabayashi, T., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 104, 5658 (2007)]

供细胞生物学使用
CAS 331001-62-8

5 mg

110-00831

Kenpaullone GSK-3【CDKs抑制剂】

Kenpaullone GSK-3 [CDKs Inhibitor]

可以在生产iPS细胞时替代Klf4。

与Yamanaka因子(Oct3/4,Sox2,Klf4,c-Myc)组合使用时,可以提高重编程

效率。

可溶于DMSO(1mg/mL确认)

[Lyssiotis, CA., et.al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 106, 8912 (2009)]

供细胞生物学使用
CAS 142273-20-9

1 mg

116-00833

5 mg

162-25291 

PD0325901【MAPK 抑制剂】

PD0325901 [MAPK Inhibitor]

与CHIR99021共同使用来维持ES细胞的自体繁殖效率。与SB431542一起使用时,

能够显著提高对人iPS细胞的重编程效率。本品亦可提升编程速度。

可溶于DMSO(约20mg/mL)

[Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519 (2008)]

[Lin, T.,et al.: Nature Methods., 6,   2237 (2009)]

供细胞生物学使用
CAS 391210-10-9

5 mg

168-25293

25 mg

169-19211

PD-98059【MAPK抑制剂】

PD-98059 [MAPK Inhibitor]

促进胚胎干细胞的自体繁殖。 

[Burdon, T., et.al.: Dev. Biol., 210, 30 (1999)]

[Hamazaki, T., et.al.: Mol. Cell. Biol., 26, 7539 (2006)]

供生物化学使用
CAS 167869-21-8

5 mg

164-25011

PS48【PDK1抑制剂】

PS48 [PDK1 Inhibitor]

用于分离和维持胚胎干细胞。

[Zhu, S., et al.: Cell Stem Cell, 7, 651 (2010)]

供细胞生物学使用
CAS 1180676-32-7

5 mg

191-15411

小鼠胚胎细胞[Pluripotin]SC-1 (Pluripotin) RasGAP【ERK1抑制剂】

SC-1[Pluripotin] RasGAP [ERK1 Inhibitor]

即使在没有白血病抑制因子(LIF),饲养层细胞和血清的培养基中,也能够维持小

鼠ES细胞的未分化状态。

溶于DMSO(确认1mg/mL) 

[Chen, S., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 103, 17266 (2006)]

供细胞生物学使用
CAS 839707-37-8

1 mg

193-01522

丁酸钠【组蛋白脱乙酰酶抑制剂】

Sodium Butyrate [Histone deacetylase Inhibitor]

促进胚胎干细胞的自体繁殖。 

[Ware, CB., et.al.: Cell Stem Cell, 4, 359 (2009)]


CAS 156-54-7

25 g

197-01525

500 g

202-18011

Thiazovivin

与SB431542和PD0325901一起使用,可以将产生诱导多能干细胞(iPS)的重编

程效率提高200倍以上。 

[Lin T., et al.: Nat. Methods, 6, 805 (2009)]

供细胞生物学使用
CAS 1226056-71-8

1 mg

208-18013

5 mg

227-01071

丙戊酸【组蛋白脱乙酰酶抑制剂】

Valproic Acid [Histone deacetylase   Inhibitor]

提高Oct4,Klf4和Sox2的iPS细胞重编程效率。

[Huangfu, D., et al.: Nature Biotechnol., 25, 1269 (2008)]

供生物化学使用
CAS 99-66-1

5 g

225-01072

25 g

253-00591

全新!5 mmol/L Y-27632 溶液

NEW! 5 mmol/L Y-27632   Solution

Y-27632, diluted to 5 mmol/L with water.

Y-27632, 用水稀释至5 mmol/L

供细胞培养使用

300 μL

ES和iPS细胞的分化诱导/去分化

Wako Cat. #

产品简介

级别

CAS No.

单位

015-22531

5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸转甲酰酶【AMPK抑制剂】

AICAR [5-Amino-4-imidazolecarboxamide-1-beta-D-ribofuranoside] [AMPK

Inhibitor]

AICAAR抑制脂肪细胞分化并诱导神经干细胞向星形胶质细胞分化。

[Giri, S., et al.: Nutr. Metab (Lond), (2006)]

[Zang, Y., et al.: J. Biol. Chem., 283, 6201 (2008)]

供细胞生物学使用
CAS 2627-69-2

100 mg

011-22533

1 g

031-18963

环孢菌素A

Ciclosporin A

抑制Notch信号通路并诱导胚胎干细胞从胚体到神经元的分化。

[Fujiwara, M., et al.: PLoS. One,6, e16734    (2011)]

供细胞生物学使用
CAS 59865-13-3

50 mg

035-18961

200 mg

030-20981

环格列酮【PPARγ激动剂】

Ciglitazone [PPARγ agonist]

诱导人间充质干细胞分化为脂肪细胞并抑制其分化为成骨细胞。

 [Benvenuti, S., et al.: J. Endocrinol.   Invest., 30, RC26 (2007)]

供细胞生物学使用

5 mg

034-21501

CKI-7二氢氯化物

CKI-7 Dihydrochloride

酪蛋白激酶抑制剂(CK1)。与SB431542和Y-27632一起使用诱导人胚胎干细胞

和人iPS细胞在无血清和无饲养层细胞的培养基中分化成视网膜祖细胞。

[Takahashi, M., et al.: J. Cell Sci., 122, 3169 (2009)]

供细胞生物学使用

5 mg

047-18863

地塞米松

Dexamethasone

调节间充质干细胞的骨分化。

[Jaiswal, N., et al.: J. Cell. Biochem., 64, 295 (1997)

供生物化学使用
CAS 50-02-2

100 mg

041-18861

1 g

097-05911

Indolactam V

蛋白激酶C活化剂 

[Melton DA., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 106, 15768 (2009)]

供细胞生物学使用

1 mg

094-06381

IWR-1-endo

Wnt信号抑制剂。 稳定β-连环蛋白降解复合物(由Axin2,Apc,Ck1和Gsk3β组

成)并刺激β-连环蛋白的降解。 

供细胞生物学使用

5 mg

124-06011

LDN193189盐酸盐   

LDN193189 Hydrochloride

BMP I型受体和ALK2/ALK3的抑制剂。 BMP信号调节胚胎发育,并在成熟组织的

生理过程中起至关重要的作用。 

[Yu, P. B., et al.: Nat. Med., 14, 1363 (2008)]

供细胞生物学使用

2 mg

129-04861

LY-294002【磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂】

LY-294002 [phosphatidylinositol 3-kinase Inhibitor]

诱导小鼠ES细胞分化为胰岛素生成细胞。

供生物化学使用
CAS 154447-36-6

5 mg

125-04863

10 mg

123-04864

25 mg

166-23991

2,6,9-三取代嘌呤化合物【Hedgeog信号激动剂】

Purmorphamine [Hedgehog Signal Agonist]

诱导间充质干细胞和前成骨细胞分化为成骨细胞。 

供细胞生物学使用
CAS 483367-10-8

5 mg

186-01114

全反式维甲酸

all-trans-Retinoic Acid

诱导神经元分化。

供生物化学使用
CAS 302-79-4

50 mg

182-01116

100 mg

182-01111

250 mg

188-01113

1 g

184-02391

Reversine【人A3腺苷受体激动剂】

Reversine [Human A3 adenosine receptor Agonist]

去分化成肌细胞为干细胞。 [Chen, S., et al.: J. Am. Chem. Soc., 126, 410 (2004)]

供细胞生物学使用
CAS 656820-32-5

5 mg

192-16541

SB431542【ALK4,   ALK5, ALK7 抑制剂】

SB431542 [ALK4, ALK5, ALK7 Inhibitor]

刺激源自胚胎干细胞的内皮细胞的增殖,分化和细胞片层形成。与Thiazovivin及

PD0325901一起使用,可将重编程效率提高200倍以上,并提高重编程速度。

[Lin, T.,et al.: Nature Methods., 6, 2237 (2009)]

[Ogawa, K., et al.: J. Cell. Sci., 120, 55 (2007)]

供细胞生物学使用
CAS 301836-41-9

5 mg

198-16543

25 mg

198-09811

精胺

Spermine

诱导心肌细胞分化

供生物化学使用
CAS 71-44-3

250 mg

194-09813

1 g

203-17561

曲古柳菌素A【组蛋白脱乙酰酶抑制剂】

Trichostatin A [Histone deacetylase Inhibitor]

促进心肌细胞分化。 

[Oyama, T., et al.: J. Cell. Biol., 176, 329 (2007)]

供细胞生物学使用
CAS 58880-19-6

1 mg

209-17563

5 mg
207-17601

曲格列酮【PPAR γ 激动剂】

Troglitazone [PPAR γ Agonist]

在人类间充质干细胞中,曲格列酮诱导细胞分化为脂肪细胞并抑制向成骨细胞的分

化。 

[Benvenuti, S., et al.: J. Endocrinol. Invest., 30, RC26 (2007)]

供药理学使用
CAS 97322-87-7

5 mg

203-17603

50 mg

206-17671

TWS119【GSK-3β抑制剂XⅡ】

TWS119 [GSK-3β Inhibitor XⅡ]

在小鼠ES细胞中,TWS119诱导神经分化。

供细胞生物学使用
CAS 601514-19-6

1 mg

202-17673

5 mg



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级别

CAS No.

包装

195-16031

<可用于小鼠ES细胞的无血清细胞冻存液>

StemSure细胞冻存液

StemSure Freezing Medium

供细胞培养使用

100 mL

190-15805

StemSure 0.1w/v%明胶溶液,来源于猪皮肤

StemSure 0.1 w/v% Gelatin Solution, from Porcine skin

供细胞培养使用

500 mL

199-16051

<用于ES细胞培养>

StemSure 白细胞抑制因子溶液,小鼠,重组

StemSure LIF, Mouse, recombinant, Solution

供细胞培养使用

1,000,000 units

198-15781

<用于ES细胞培养>

StemSure 10 mmol/L 2-巯基乙醇溶液 (×100)

StemSure 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution (×100)

供细胞培养使用60-24-2

100 mL

195-15791

<用于ES细胞培养>

StemSure 50 mmol/L 硫代甘油溶液 (×100)

StemSure 50 mmol/L Monothioglycerol Solution (×100) 

相当于2-巯基乙醇 (可选2巯基乙醇)

供细胞培养使用

100 mL

Wako Cat. #

产品名称

级别

CAS No.

包装

129-05601

重组人白血病抑制因子,细胞上清
LIF, Human, recombinant, Culture Supernatant

供细胞培养使用

1 mL

125-05603

1 mL×10

Wako Cat. #

产品名称

级别

CAS No.

包装

141-09041

<神经细胞培养>

N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白(Apo)(×100)

N2 Supplement with Transferrin (Apo) (×100)

神经细胞培养过程中可替代血清

供细胞培养使用

5 mL

141-08941

<神经细胞培养>

N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白(Holo)(×100)

N2 Supplement with Transferrin (Holo) (×100)

神经细胞培养过程中血清的替代品,以转铁蛋白(Apo)制备。

转铁蛋白(Holo)十分常用,但含有转铁蛋白(Apo)的N2添加剂可以根据细

胞种类提高神经干细胞的增殖。 

供细胞培养使用

5 mL

Wako Cat. #

产品名称

级别

CAS No.

包装

016-21841

200 mmol/L L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 Solution (×100)
200 mmol/L L-Alanyl-L-Glutamine Solution (×100)

供细胞培养使用

100 mL

073-05391

200mmol/L L-谷氨酰胺溶液(×100)
200 mmol/L L-Glutamine Solution (×100)

供细胞培养使用

100 mL

078-05525

G-MEM 含有 L-谷氨酰胺和酚红
G-MEM with L-Glutamine and Phenol Red

供细胞培养使用

500 mL

139-15651

MEM含非必需氨基酸溶液(×100)
MEM Non-essential Amino Acids Solution (×100)

供细胞培养使用

100 mL

067-04031

人重组碱性成纤维细胞生长因子
Fibroblast Growth Factor (basic) Human, recombinant
bFGF/FGF2无信号肽序列(147a.a.)。

供生物化学使用

25 µg

064-04541

人重组碱性成纤维细胞生长因子  
Fibroblast Growth Factor (basic) Human, recombinant
bFGF/FGFB有信号肽序列(156a.a.)
[Takahashi, K., et al.: Cell, 131,861 (2007)]

供细胞生物学使用

50 µg

060-04543

100 µg

068-04544

1 mg

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

ES/iPS细胞分化诱导研究用小分子化合物

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

ES/iPS细胞分化诱导研究用小分子化合物ES/iPS细胞分化诱导研究用小分子化合物



  FUJIFILM Wako 提供大量ES/iPS未分化维持、分化诱导相关的低分子化合物,推出 CultureSure® A419259、三盐酸化物和 CKl-7二盐酸化物,MF 、CultureSure® KY03-Ⅰ等新品。


● ES·iPS细胞的分化诱导、脱分化等。


产品编号

品名 

规格

容量

作   用

034-24801

CultureSure® A419259 Trihydrochloride

CultureSure® A419259诱导剂

细胞培养用

1 mg

030-24803

5 mg

038-24804

25 mg

034-24806

100 mg

 Src家族抑制剂。使用本产品以及五种化合物(CHIR 99021,佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯,KY03-I,XAV939,AG1478),

 就无需使用细胞因子和白蛋白等的蛋白质就可以诱导人 iPS 细胞向心肌细胞分化。已完成内毒素测和支原体检测。

011-25291

A-769662

细胞生物学用

5 mg

017-25293

25 mg

 AMPK 活性化剂。AMPK 活性化对促进细胞生长、增殖、生存的 mTOR 信号传递有抑制作用。

015-22531

AICAR 

细胞生物学用

100 mg

011-22533

1 g

 AMPK催化剂。抑制脂肪细胞分化,将神经干细胞诱导为星型胶质细胞。

〔Giri, S., et al.: Nutr. Metab. (Lond), (2006).〕〔Zang, Y., et al.: J. Biol. Chem., 283, 6201 (2008). 〕

014-16631

Am580

生化学用

5 mg

合成类维生素A。比生长因子能更快速高效地将人iPS细胞和ES细胞诱导为中间中胚层。

〔Araoka, T., et al.: PLOS ONE, 9, e84881 (2014).〕

014-25421

AMD3100 Octahydrochloride

细胞生物学用

10 mg

 CXCR4 拮抗剂。可高效调动体内造血干细胞。

〔Lura, A., et al., : Exp Hematol., 39(3), 384 (2011).〕

031-24931

Ciclosporin   A

生化学用

50 mg

037-24933

200 mg

 提高从小鼠和人iPS细胞到心肌以及心肌祖细胞的诱导效率。

〔Fujiwara, M., et al. : PLOS ONE, 6, e16734 (2011).〕

030-20981

Ciglitazone

环格列酮

细胞生物学用

5 mg

 PPARγ 激动剂。诱导人类间充质干细胞分化成脂肪细胞、抑制成骨纤维细胞分化。

〔Benvenuti, S., et al.: J. Endocrinol. Invest., 30, RC26 (2007).〕

034-21501

CKI-7 Dihydrochloride

CKI-7二氢氯化物

细胞生物学用

5 mg

 蛋白激酶(CK1)抑制剂。在无血清无饲养细胞培养基中与 SB431542,   Y-27632 结合使用,将人 ES/iPS 细胞分化诱导成视网

 膜前驱细胞。

〔Takahashi, M., et al.: J. Cell Sci., 122, 3169 (2009).〕

043-33581

DAP【γ-Secretase InhibitorⅨ】

DAPT(β-分泌酶抑制剂)

细胞生物学用

5 mg

 γ-Secretase 抑制剂。抑制 Notch 信号,诱导 ES 细胞胚状体分化为神经。

〔Nelson, BR., et al.: Dev. Biol., 304, 479 (2007).〕

〔Crawford, TQ., et al.: Dev. Dyn., 236, 886 (2007).〕

035-23971

CultureSure® CKI-7 Dihydrochloride

细胞培养用

5 mg

 酪蛋白激酶(CK1)抑制剂。通过配合SB431542,   Y-27632使用,可以在不含血清和饲养层细胞的培养基中诱导人ES·iPS细胞向

 视网膜祖细胞分化。已完成内毒素检测、支原体检测,已确认细胞毒性实验。

〔Osakada, F., et al. : J. Cell Sci., 122, 3169 (2009).〕

039-24611

CultureSure® 3 mmol/L CKI-7 Dihydrochloride Solution, Animal-derived-free

CultureSure® 3 mmol/l CKI-7 二盐酸盐溶液,无动物来源

细胞培养用

1 mL

 本产品是 3 mmol/L CKI-7二盐酸盐的水溶液。产品原料和制作工序中不使用人和动物来源成分。已过滤除菌。

043-33581

DAPT【γ-Secretase InhibitorIX】

DAPT(β-分泌酶抑制剂)

细胞生物学用

5 mg

049-33583

25 mg

 γ分泌酶抑制剂。抑制Notch信号,诱导ES细胞的胚状体向神经细胞分化。

〔Nelson, BR., et al. : Dev. Biol., 304, 479 (2007).〕〔Crawford, TQ., et al . : Dev. Dyn., 236, 886 (2007).〕

047-18863

Dexamethasone

地塞米松

生化学用

100 mg

041-18861

 1 g

 调节间充质干细胞的骨分化。

〔Jaiswal, N., et al. : J. Cell. Biochem., 64, 295 (1997).〕

044-33751

Dorsomorphin

细胞生物学用

1 mg

040-33753

5 mg

 AMPK 和 BMP 信号的抑制剂。可以诱导小鼠ES细胞向心肌细胞分化。

〔Hao, J., et al. : PLOS ONE, 3, e2904 (2008).〕

041-33881

DMH1

细胞生物学用

10 mg

 BMP 特异性抑制剂。不作用于 AMPK,   ALK5, VEGFR2, PDGFR。高效诱导小鼠ES细胞向心肌细胞分化。

067-02191

Forskolin
毛喉素

生化学用

10 mg

063-02193

25 mg

 腺苷酸环化酶催化剂。与bFGF一起使用,可诱导间充质干细胞分化为神经细胞。

〔Jang, S. et al.: BMC Cell Biol., 11, 25 (2010).〕

034-24301

CultureSure® IWP-2

细胞培养用

5 mg

030-24303

25 mg

 通过 Porcupine(Porcn)的失活抑制 Wnt 蛋白质的棕榈酰化,促进人iPS细胞分化为心肌细胞。已经支原体、细胞毒性检测确认。

Minami, I. et al.: Cell Rep., 2, 1448 (2012).〕

034-24301

CultureSure® IWR-1-endo

细胞培养用

5 mg

030-24303

25 mg

 Wnt 信号抑制剂。稳定分解β-连环蛋白的复合物(由 Axin2,   Apc, Ck1, Gsk3β 组成),并促进β-连环蛋白的分解。本产品已

 完成内毒素检测和支原体检测。

032-24721

CultureSure® KY03- I

CultureSure® KY03-I诱导剂

细胞培养用

2 mg

038-24723

10 mg

036-24724

25 mg

 Wnt 信号抑制剂。有报告称 KY02111 作为诱导人 ES·iPS 细胞向心肌细胞分化的化合物,但本产品无需使用血清、蛋白或细胞因

 子,就可以在低浓度下高效地诱导分化为心肌细胞。已完成内毒素检测和支原体检测。

094-06381

IWR-1-endo

细胞生物学用

5 mg

 Wnt 信号抑制剂。稳定分解 β- catenin 的复合体(由 Axin2, Apc, Ck1, Gsk3β 组成),促进 β- catenin 的分解。

124-06011

LDN193189 HydrochlorideLDN193189
盐酸盐 

细胞生物学用

2 mg

 BMP I 型受体/ALK2,ALK3 抑制剂。调节 BMP 信号的产生,在成熟组织中起着极其重要的作用。

〔Yu, P.B., et al.: Nat. Med., 14, 1363 (2008).〕

129-04861

LY294002

生化学用

5 mg

125-04863

10 mg

123-04864

25 mg

 磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂。可以诱导分化为小鼠ES细胞的胰岛素生成细胞。

166-23991

Purmorphamine
    2,6,9-三取代嘌呤化合物,PM

细胞生物学用

5 mg

 Hedgehog 信号激动剂。诱导间充质前驱细胞或前造骨性细胞分化成成骨细胞。

〔Wu, X., et al.: Chem. Biol., 11, 1229 (2004).〕

186-01114

all-trans-Retinoic Acid

全反式维甲酸

生化学用

50 mg

182-01116

100 mg

182-01111

250 mg

188-01113

1 g

 诱导神经细胞的分化。

031-24291

CultureSure® SB431542

细胞培养用

5 mg

037-24293

25 mg

 ALK4,   ALK5,   ALK7 抑制剂。促进ES细胞源内皮细胞的增殖、分化和片形成。本产品配合 PD0325901 和噻唑巴肽一起使用时,

 重编程效率可以提高 200 倍以上,并且速度也有提高。另外还有报告称使用本产品和 CHIR99021,Dorsomorphin 的3种低分子化

 合物诱导的细胞,向目标细胞分化的分化效率以及速度大幅度提高。已完成内毒素检测、支原体检测、细胞毒性确认。

〔Ogawa, K., et al. : J. Cell. Sci.,120, 55 (2007).〕〔Lin T., et al. : Nat. Methods, 6, 805 (2009).〕

〔Fujimori, K., et al. : Stem Cell Reports., 9, 1 (2017).〕

193-18031

SB431542, MF

细胞培养用

5 mg

199-18033

25 mg

 在药物注册登记处登记(MF)的产品(主文件)。已完成内毒素检测、支原体检测、无菌检测。

033-24631

CultureSure® 5 mmol/L SB431542 DMSO Solution,

Animal-derived-free

CultureSure® 5 mmol/l SB431542 DMSO溶液,无动物来源

细胞培养用

1 mL

 本产品是将 SB431542 用 DMSO 配制为 5 mmol/L 溶液。产品原料和制作工序中不使用人和动物源成分。已完成过滤灭菌。

193-15231

Sodium Cromoglicate

色甘酸钠

药理研究用

1 g

 促进人 iPS 细胞向脏内分泌细胞的分化。

〔Kondo, Y., et al. : Diabetologia, 60(8), 1454 (2017).〕

184-02391

Reversine

细胞生物学用

5 mg

 人A3腺苷受体激动剂。成肌细胞脱分化为干细胞。

〔Chen, S., et al.: J. Am. Chem. Soc., 126, 410 (2004).〕

192-16541

SB431542

细胞生物学用

5 mg

198-16543

25 mg

 ALK4,   ALK5,   ALK7 抑制剂。促进 ES 细胞源内皮细胞的增殖、分化、膜形成。本品和 PD0325901、Thiazovivin 使用的话,可

 将细胞重组效率提高200倍以上,加速细胞重组。

〔Lin T., et al.: Nat. Methods, 6, 805 (2009).〕〔Ogawa, K., et al.: J. Cell. Sci.,120, 55 (2007).〕

198-09811

Spermine
精胺

生化学用

250 mg

194-09813

1 g

 诱导心肌细胞分化。

〔Sasaki, T., et al.: Differentiation, 76, 1023 (2008).〕

203-17561

Trichostatin A
曲古柳菌素A

细胞生物学用

1 mg

209-17563

5 mg

 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。诱导心肌细胞分化。

〔Oyama, T., et al.: J. Cell. Biol., 176, 329 (2007).〕

209-19481

Troglitazone
曲格列酮

细胞生物学用

5 mg

205-19483

50 mg

 PPARγ 激动剂。诱导人间充质干细胞分化为脂肪细胞,抑制其分化为成骨细胞。

〔Benvenuti, S., et al.: J. Endocrinol. Invest., 30, RC26 (2007).〕

204-14171

TTNPB

生化学用

5 mg

 视黄酸(维生素A酸)受体(RAR)激动剂。相比使用生长因子的方法,可以更快速高效地将人iPS细胞和人ES细胞分化诱导为中胚层。

〔Araoka, T., et al.: PLOS ONE, 9, e84881 (2014).〕

206-17671

TWS119【GSK-3β   InhibitorⅩⅡ】

TWS119 [GSK-3β抑制剂XⅡ]

细胞生物学用

1 mg

202-17673

5 mg

 GSK-3β 抑制剂。诱导小鼠 ES 细胞的神经分化。

〔Ding, S., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 100, 7632 (2003).〕

038-25541

CultureSure® 3,3',5-Triiodo-L-thyronine Sodium Salt
CultureSure® 3,3',5-三碘-L-甲状腺素钠

细胞培养用

50 mg

 甲状腺激素,也被称为T3(三碘甲状腺原氨酸)。促进间充质干细胞分化诱导成脂肪细胞,以及促进人iPS细胞源心肌细胞的成熟。

247-00951

XAV939

XAV939蛋白通路抑制剂

细胞生物学用

5 mg

243-00953

25 mg

 Wnt /β-连环蛋白途径的抑制剂。Wnt信号对各种干细胞的自我增殖十分重要。如果用含有 LIF,CHIR99021,PD0325901, JNK 

 抑制剂 VIII,SB203580,A419259,XAV939 的培养基培养小鼠8细胞期中分离的卵裂球,可以诱导、培养其成为胎盘的细胞。

〔Yang, J., et al. : Nature, 550, 393 (2017).〕

欲了解更多相关产品请点击文字:

CultureSure® IWR-1-endo

SB431542, MF

3,3',5-三碘-L-甲状腺素钠

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

ES/iPS细胞未分化维持研究用小分子化合物

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

ES/iPS细胞未分化维持研究用小分子化合物ES/iPS细胞未分化维持研究用小分子化合物



  FUJIFILM Wako 提供大量ES/iPS未分化维持、分化诱导相关的小分子化合物,推出 CultureSure® A419259、三盐酸化物和 CKl -7二盐酸化物,MF 、CultureSure® KY03-Ⅰ等新品。


◆维持ES/iPS细胞未分化能,提高重组效率


产品编号

品名 

规格

容量

作 用

039-24111

CultureSure® A-83-01【TGF-βRⅠKinase Inhibitor Ⅳ】
细胞培养级别 A-83-01

细胞培养用

2 mg

035-24113

10 mg

 ALK4,ALK5,ALK7 的选择性抑制剂。可以均一地长期培养未分化的大鼠和狗iPS细胞。另外,还有报告称配合 A-83-01,Y-27632,

 CHIR99021 一起使用,通过体外培养大鼠、小鼠源成熟肝细胞可能重编程为肝祖细胞。已完成内毒素检测、支原体检测,已确认细胞毒性

 实验。

〔Li, W., et al. : Cell Stem Cell, 4, 16 (2009).〕〔Katsuda ,T., et al. : Cell Stem Cell, 20, 41 (2017).〕

010-26741

A-83-01,MF【TGF-βRI Kinase InhibitorIV】

细胞培养用

5 mg

018-26742

25 mg

 在药物注册登记处登记(MF)的产品(主文件)。已完成内毒素检测、支原体检测,无菌检测。

014-26761

Adrenocorticotropic Hormone(1-24)(Human)【ACTH】

促肾上腺皮质激素(1-24)(人)

细胞生物学用

1 mg

 添加至无血清培养基,可以抑制小鼠ES细胞的分化,使ES细胞增殖。

〔Ogawa, K., et al. : Genes Cells, 9, 471 (2004).

012-23021

ALK5 Inhibitor【TGF-βRⅠ Kinase InhibitorⅡ】
ALK5抑制剂【TGF-β RI激酶抑制剂Ⅱ】

细胞生物学用

1 mg 

018-23023

10 mg

 TGF-βRI 激酶/ ALK5 抑制剂。小鼠iPS细胞生成过程中可替代山中4因子的 Sox2 或 c-Myc。

〔Maherali N., et al.: Curr. Biol., 19, 1718 (2009).〕

023-16401

BIX01294

细胞生物学用

2 mg

 组蛋白转甲基酶抑制剂。Oct3/4 和 Klf4 导入神经干细胞时,可提高 iPS 细胞生成效率。另外,Oct3/4 和 Klf4 导入成纤维细胞时,本品与

(±)BayK864 4一同使用,可提高 iPS 细胞生成效率。

〔Shi,  Y., et al.: Cell Stem Cell, 2, 525 (2008).〕〔Shi, Y., et al.: Cell Stem Cell, 3, 568 (2008).〕

021-17041

(-)-Blebbistatin, 98.0+ % (HPLC)
Ⅱ型肌球蛋白抑制剂

细胞生物学用

1 mg

027-17043

5 mg

 肌球蛋白Ⅱ特异性抑制剂。人ES/iPS细胞从菌落分离成单一细胞的过程中抑制气泡的产生,防止细胞凋亡。

〔Ohgushi, M., et al.: Cell Stem Cell, 7, 225 (2010).〕

029-16241

6-Bromoindirubin-3'-oxime【BIO/GSK-3 InhibitorⅨ】
6-Bromoindirubin-3'-oxime 【BIO/GSK-3抑制剂Ⅸ】

细胞生物学用

1 mg

 GSK-3 抑制剂。在不含饲养细胞的培养基中可维持人/小鼠ES细胞的未分化能。

034-25521

CGP77675

细胞培养用

5 mg

 强力的 Src 激酶抑制剂。用作 PD0325901 的替代品配合 CHIR99021 一起添加,可培养质量更高的 ES·iPS 细胞。本产品已做内毒素检测。

〔Yagi, M., et al. : Nat. Med., 548, 224 (2017).〕

029-05393

Butyric Acid丁酸

和光特级

25 mL

023-05396

500 mL

 改善iPS细胞生成效率。

〔Liang, G., et al.: J. Biol. Chem., 285, 25516 (2010).〕

038-23101

CultureSure® CHIR99021

细胞培养用

1 mg

034-23103

5 mg

 GSK-3β 高特异性抑制剂。对 CDKs 不显示交叉性。用含有 CHIR99021,   PD0325901 的培养基培养ES细胞,可以高效率地抑制其分化。另

 外,使用 SB431542,CHIR99021 和 Dorsomorphin 这三种小分子化合物诱导的细胞,可以提高向目标细胞分化的分化效率以及速度。已

 完成内素检测,支原体检测。已确认细胞毒性实验。

〔Ying, QL., et al. : Nature, 453, 519 (2008).〕〔Hou, P., et al. : Science, 341(6146), 651 (2013).〕

〔Fujimori, K., et al. : Stem Cell Reports., 9, 1 (2017)〕〔Katsuda ,T., et al. : Cell Stem Cell, 20, 41 (2017).〕

〔Yagi, M., et al. : Nat. Med., 548, 224 (2017).〕〔Yang, J., et al. : Nature, 550, 393 (2017).〕

032-25441

CHIR99021,   MF

细胞培养用

5 mg

038-25443

25 mg

 在药物注册登记处登记(MF)的产品(主文件)。已完成内毒素检测、支原体检测、无菌检测。

038-24681

CultureSure® 10 mmol/L CHIR99021 DMSO Solution, Animal-derived-free

细胞培养用

300 μL

 CHIR99021 与 DMSO 配制浓度为 10 mmol/L 的产品。制作原料、制作工艺中完全不使用动物源物质,已经过滤除菌。

036-24001

Cyclic Pifithrin-α Hydrobromide

细胞生物学用

5 mg

 对 p53 介导的细胞凋亡和具有 p53 依存性基因的转录有可逆性作用的抑制剂。P52 活性低下,可使人或小鼠体细胞的重组效率提升。

049-33701

3-Deazaneplanocin A Hydrochloride 【DZNep】

细胞生物学用

1 mg

 组蛋白甲基转移酶 EZH2 抑制剂。与丙戊酸、CHIR99021,616452(ALK-5 Inhibitor) ,Tranylcypromine,   Forskolin,DZNep,TTNPB

 一起使用,可使 iPS 细胞生成效率提高。

〔Hou, P., et al., Science, 341(6146),   651 (2013).〕

041-30101

DNA Methyltransferase Inhibitor【RG108】
DNA甲基转移酶抑制剂【RG108】

遗传因子研究用

10 mg

047-30103

25 mg

 DNA 甲基转移酶抑制剂。细胞毒性低,可抑制细胞增殖。

〔Tsumura, A., et al.: Genes Cells, 11, 805 (2006).〕

056-08221

EHNA Hydrochloride

细胞生物学用

10 mg

 磷酸二酯酶抑制剂、腺甙脱氨酶抑制剂。可作为bFGF代替品,无饲养层培养基中可高效、可逆地抑制人ES细胞的分化,维持多能性。

〔Burton, P., et al.: Biochem. J., 575, 432 (2010).〕

079-03811

GF 109203X, 90.0+ % (HPLC)

双吲哚马来酰亚胺 I(GF 109203X)

生化学用

1 mg

 蛋白激酶 C(PKC)抑制剂。与 U0126 一起使用,可稳定维持人 ES/iPS 细胞的未分化状态。

〔Kinehara, M., et al.: PLOS ONE, 8, e54122 (2013).〕

070-05921

GSK269962A

细胞生物学用

2 mg

 ROCK 抑制剂,它可抑制细胞凋亡,提高分散的人 ES 细胞的存活率和克隆效率。

088-09281

H-1152 Dihydrochloride
H-1152二氢氯化物

细胞生物学用

1 mg

 ROCK 抑制剂,它可抑制细胞凋亡,提高分散人 ES 细胞的存活率和克隆效率。比 Y-27632 有更强的抑制活性。

086-10071

HA-100 Hydrochloride

细胞生物学用

10 mg

 PKC 抑制剂。iPS细胞建立过程中,结合 PD0325901, CHIR99021,   A-83-01, LIF 使用,可在无饲养层条件下改善细胞重组效率。

〔Yu, J., et al.,: PLOS ONE, 6, 3, e17557   (2011).〕

091-07131

IM-12

细胞生物学用

5 mg

 GSK-3β 选择性抑制剂。On-feeder 培养时,结合 PD0325901, 与 IM-12,   SB590855, Y-27632, WH-4-023, hLIF, Activin A 使用,可诱

 导出与小鼠 ES 细胞基底状态相似的初始人ES细胞。

〔Theunissen T.W., et al.: Cell Stem Cell, 15(4), 471 (2014).〕

095-05951

IQ-1

细胞生物学用

5 mg

 与 Wnt-3a 结合,可在无血清下维持小鼠 ES 细胞的增殖和多潜能性。

〔Miyabayashi, T., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 104, 5668 (2007).〕

108-00191

JNK Inhibitor VIII

细胞培养用

5 mg

 作用于 ATP 竞争的膜渗透性丙烯酰胺化合物。用含有 LIF, CHIR99021, PD0325901,   JNK 抑制剂 VIII,用含有 SB203580, A419259,   

 XAV939 的培养基培养小鼠源8细胞期中分离的卵裂球,制作和维持培养成为可分化成胎盘的细胞。已完成内毒素测试。

〔Yang, J., et al. : Nature, 550, 393 (2017).〕

110-00831

Kenpaullone

细胞生物学用

1 mg

116-00833

5 mg

 GSK-3,   CDKs 抑制剂。在 iPS 细胞生成过程中可替代山中4因子-Klf4 使用。另外,导入山中4因子时添加本品,可提高细胞重组效率。

〔Lyssiotis, CA., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 106, 8912 (2009).〕

115-01001

Ki16425

细胞生物学用

5 mg

 LPA 受体拮抗剂。

162-25291

PD0325901

细胞生物学用

5 mg

168-25293

25 mg

 MAPK 抑制剂。和 CHIR99021 结合使用,可有效维持细胞的自我增殖能力。和 SB431542、Thiazovivin 使用,可将细胞重组效率提高 200

 倍上,加速细胞重组。

〔Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519 (2008).〕 

166-25951

10 mmol/L PD0325901 DMSO Solution

细胞培养用

300 μL

 PD0325901与DMSO配制的浓度为10 mmol/L的产品。已经过滤除菌。

160-26831

PD173074

细胞生物学用

5 mg

 FGFR抑制剂。促进小鼠ES细胞的自我增殖。〔Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519 (2008).〕

165-26761

PD184352

细胞生物学用

5 mg

 MAPK 抑制剂。与 CHIR99021, SU5402 使用,维持 ES 细胞未分化能的同时进行高效培养。

〔Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519 (2008).〕

163-25961

10 mmol/L PD184352 DMSO Solution

细胞培养用

300 μL

 PD184352 与 DMSO 配制成浓度为 10 mmol/L。已经过滤除菌。

169-19211

PD-98059

生化学用

5 mg

 MAPK 抑制剂。促进 ES 细胞的自我增殖。〔Burdon, T., et al.: Dev. Biol., 210, 30 (1999).〕

 〔Hamazaki, T., et al.: Mol. Cell Biol., 26, 7539   (2006).〕

164-25011

PS48

细胞生物学用

5 mg

 PDK1 抑制剂。在使用 Oct4,Klf4 使新生儿上皮角质形成 iPS 细胞时使用本品,重组效率提高 15 倍,与丁酸钠一起使用的话,则可提升25

 倍。

〔Zhu, S., et al.: Cell Stem Cell, 7, 651 (2010).〕

199-16551

SB 203580

细胞生物学用

1 mg

195-16553

5 mg

 MAPK 抑制剂。用于 ES 细胞分离和维持。

〔Qi, X., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 101, 6027 (2004).〕

198-16761

SB203580 Hydrochloride

SB203580 氢氯化物

细胞生物学用

1 mg

 MAPK 抑制剂。用于 ES 细胞分离和维持。

〔Qi, X., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 101, 6027(2004).〕

194-18681

SB590885

细胞培养用

5 mg

 B-Raf 特异性抑制剂。用含有 PD0325901,IM-12,SB590855,Y-27632,WH-4-023,hLIF,Activin A 的培养基培养人 iPS 细胞的

 话,可以诱导、培养其成为与小鼠 ES 细胞基底状态类似的 Naive 型人 ES 细胞。已完成内毒素检测。

〔Theunissen T.W., et al. : Cell Stem Cell., 15(4), 471 (2014).〕

191-15411

SC-1【Pluripotin】
小鼠胚胎细胞【Pluripotin】

细胞生物学用

1 mg

 RasGAP,ERK1 抑制剂。在无 LIF、无饲养层细胞、无血清培养基中可维持小鼠 ES 细胞的未分化能。

〔Chen, S., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 103, 17266(2006).〕

193-01522

Sodium Butyrate
丁酸钠

25 g

197-01525

500 g

 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。促进 ES 细胞的自我增殖。

〔Ware, CB., et al.: Cell Stem Cell, 4, 359 (2009).〕

197-16731

SU5402

细胞生物学用

1 mg

193-16733

5 mg

191-16734

25 mg

 FGFR1 抑制剂。与 CHIR99021,PD184352 使用,可在维持 ES 细胞未分化能的同时进行高效培养。

〔Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519   (2008).〕

202-18011

Thiazovivin

细胞生物学用

1 mg

208-18013

5 mg

 和 PD0325901, SB431542 使用的话,可将细胞重组效率提高 200 倍以上,加速细胞重组。

〔Lin T., et al.: Nat. Methods, 6, 805 (2009).〕

204-19551

10 mmol/L Thiazovivin DMSO Solution

细胞培养用

300 μL

 Thiazovivin 与 DMSO 配制的浓度为 10 mmol/L的产品。已经过滤除菌。

211-01051

U0126

生化学用

5 mg

 MEK1/2 抑制剂。与 GF 109203X 使用,可稳定维持人 ES/iPS 细胞的未分化状态。

〔Ying, QL., et al.: Nature, 453, 519 (2008).〕

227-01071

Valproic Acid
丙戊酸

生化学用

5 g

225-01072

25 g

 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。可通过只导入 Oct4, Sox2 基因使成纤维细胞诱导 iPS 细胞。

〔Huangfu, D., et al.: Nature Biotechnol., 26, 1269 (2008).〕

234-02741

WH-4-023

细胞生物学用

5 mg

 Lck 和 Src 激酶抑制剂。On-feeder 培养时,结合 PD0325901, IM-12,   SB590855,Y-27632, WH-4-023, hLIF, Activin A 使用,可诱

导出与小鼠 ES 细胞基地状态相似的初始人 ES 细胞。

〔Theunissen T.W., et al.: Cell Stem Cell, 15(4), 471 (2014).〕

257-00511

Y-27632

细胞生物学用

1 mg

253-00513

5 mg

251-00514

25 mg

257-00516

1 g

 ROCK 抑制剂,它可提高人 ES/iPS 细胞冻存后的存活率和克隆效率。

〔Ito, H., et al.: Liver Int., 32, 592 (2012).〕

〔Kawamata, M., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 107, 14223   (2010).〕

〔Claassen, DA., et al.: Mol. Reprod. Dev., 76, 722 (2009).〕

〔Martin-Ibanez, R., et al.: Hum. Reprod., 23, 2744 (2008).〕

〔Watanabe, K., et al.: Nat. Biotechnol., 25, 681 (2007).〕

〔Sakamoto, K., et al.: J. Pharmacol. Sci., 92, 56 (2003).〕

〔Nishimaru, K., et al.: J. Pharmacol. Sci., 92, 424 (2003).〕

〔Uehata, M., et al.: Nature, 389, 990 (1997).〕

030-24021

CultureSure® Y-27632 

细胞培养用

1 mg

036-24023

5 mg

034-24024

25 mg

030-24026

100 mg

 本品经内毒素、支原体、细胞毒性检测确认。

259-00613

Y-27632, MF

细胞培养用

5 mg

257-00614

25 mg

 本品记载于原药等登陆原簿(Master File)。已经内毒素、支原体、活细菌数检测。

253-00591

5 mmol/L Y-27632 Solution

5 mmol/L Y-27632 溶液

细胞培养用

300 μL

  Y-27632 和水配制浓度为 5 mmol/L 的产品。已经过滤除菌。

039-24591

CultureSure® 10 mmol/L Y-27632 Solution,

Animal-derived-free

细胞培养用

300 μL

035-24593

1 mL

 Y-27632 和水配制浓度为 10 mmol/L 的产品。制作原料、制作工艺中完全不使用动物源物质。已经过滤除菌。

欲了解更多相关产品请点击文字:Culture® A-83-01 

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

用于人iPS细胞冻存StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC 冻存液,AF

 


StemSure® hPSC 冻存液,AF 是无动物源成分的人 iPS 细胞用冻存液。本品含 DMSO。

 


◆特点


● 能以高细胞存活率冻存人 iPS 细胞

● 不含动物源成分

● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存

● 可用于无饲养层培养的细胞

● 无需进行繁杂的试剂配制

● 无需程序降温


 StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

 

 

◆人 iPS 细胞冻存步骤


 1. 在除去人 iPS 细胞培养皿中的培养液,用 D-PBS(-)清洗后,用 Accutase 等分散细胞。

 2. 添加含有 10 µmol/L Y-27632 的人 iPS 细胞用培养基(hPSC 培养基(+ROCKi)),用移液器吹散成单细胞。

 3. 将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中,离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 4. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi),用移液器悬浮。

 5. 计算细胞数,将样本管离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 6. 利用本产品使细胞悬浮成 2×10cells/mL,并以 500 µL/管进行分装。

 7. 在 -80°C 下冷冻后,在 -150°C 或者 -80°C 的条件下保存(长期保存建议保存在 -150°C)。

 1. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi)到冻存瓶中,复苏冷冻细胞。
 (使用温水浴复苏冷冻细胞的情况下,只需要半溶解)

 2. 离心(室温下,1,000 rpm,3分钟)后,除去上清液,添加 hPSC 培养基(+ROCKi),使细胞悬浮。

 3. 计算细胞数,以 2×10cells/6 cm 的密度在培养皿中铺板。



◆人iPS细胞201B7株的冻存


确认细胞存活率和细胞增殖率


将培养中的人 iPS 细胞 201B7 株分散成单细胞后,重悬于 StemSure® hPSC 冻存液,AF 中,在 -80°C下冻存2~4天。

确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏5次后,确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记(Oct3/4、Nanog、BC2LCN)的表达。


StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

确认细胞集落的形态


StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

确认细胞存活率和细胞增殖率


StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

结果表明,用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冻存的人 iPS 细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。

另外还确认了各种未分化标记的表达。

 


◆人iPS细胞冻存步骤


使用用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冷冻复苏5次后的 iPS 细胞 201B7 株,形成胚叶体,βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP 的表达确认其分化成了三胚叶。

(胚叶体形成,三胚叶分化诱导时的培养基组成)

Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution


StemSure®  hPSC冻存液, AF                              用于人iPS细胞冻存

测试项目:外观,应用试验(iPS 细胞 201B7株),无菌试验,内毒素,支原体测试

可用于ES干细胞的冻存液,请点击:StemSure细胞冻存液

通用动物细胞冻存液,请点击:CultureSure无血清细胞冻存液

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
197-17831 StemSure® hPSC Freezing Medium, AF
StemSure® hPSC冻存液,AF
100 mL 细胞培养用

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品 StemSure® Serum Replacement

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

StemSure® Serum Replacement

  本产品是ES细胞和iPS细胞培养中使用的血清代替品。血清含有分化诱导因子,会导致干细胞分化。使用本产品代替血清,可在ES和iPS细胞培养的同时,保持他们的未分化状态,达到稳定培养。
  本产品不含剧毒物质,将其作为普通物质处理。
  使用本产品配制培养基培养的小鼠ES细胞,可用于制备嵌合体小鼠,并确认其种系传递。

 

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

◆特点•优势

● 可用于嵌合体小鼠制备,并确认其种系传递。

● 作为血清替代品,用于小鼠ES细胞・人IPS细胞培养。

● 不含剧毒物质。

 


◆案例•应用


1、嵌合体小鼠的制备与种系传递Update!!


  将组装 HaloTag® cDNA 的目标载体导入小鼠ES细胞,用含有 StemSure® Serum Replacement(SSR)的培养基培养。确认载体导入小鼠ES细胞后,将其注入至 ICR 小鼠的胚盘胞,并移植至 ICR 小鼠的子宫。得到的嵌合体小鼠与 C57BL/6J 小鼠交配,获得F1小鼠。

 


(1)  嵌合体小鼠


  收集嵌合体小鼠的血液,用 TRITC(四甲基若丹明异硫氰酸盐)对 HaloTag® 蛋白质染色。发现小鼠ES细胞源的 HaloTag® 的血液被染色,可确认为嵌合化。

    

      ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum ReplacementES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement



(2) F1小鼠

  F1小鼠的血液发现 HaloTag® 存在,可确认用 SSR 培养基培养的ES细胞嵌合小鼠能够正常存活。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement


2、人iPS细胞201B7的培养


(1) 克隆形态与ALP染色 


  已确认可用 StemSure® Serum Replacement(SSR)培养人iPS细胞 201B7 株。ALP 染色呈阳性。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

  <培养基组成>
  D-MEM/Ham's F-12 + 20% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5 ng/mL bFGF

 


(2) 未分化标记的发现


  使用 StemSure® Serum Replacement(SSR)培养的人iPS细胞201B7株,确认各种未分化标记(Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81)呈阳性。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

 


3、小鼠ES细胞D3的培养


(1) 细胞形态与ALP染色


  使用 StemSure® Serum Replacement(SSR)培养小鼠ES细胞D3,能观察到小鼠ES细胞群特有的光泽,ALP染色呈阳性。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement 



(2) 细胞增殖曲线


  用不同培养基培养小鼠ES细胞D3进行14继代培养,比较细胞增殖。

  如下图所示StemSure® 系列与A公司有同等的性能。


ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

  < StemSure® 系列培养基组成>
  StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

  (使用胶原包被的12孔板)

 


(3) 细胞群倍加数*

  使用不同培养基对小鼠ES细胞D3进行继代培养,检查培养天数与细胞群倍加数的关系。

  下图显示 StemSure® 系列与公司产品的细胞群倍加数相同。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

  *细胞群倍加数 cell population doubling level,缩写PDL,指从培养开始至现在细胞群的倍增次数。

  

<培养基组成>

  StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/ml StemSure® LIF

  (使用胶原包被的12孔板)

 


(4) 未分化标记的检测


  使用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行5代继代培养,各种未分化标记(Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1)呈阳性。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

  <培养基组成>
  StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

 


4、畸形瘤的形成


  用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行继代培养。对免疫不全小鼠的皮下注射培养后细胞。在形成皮下畸形瘤,其内部检测出神经组织(外胚叶源)、软骨组织(中胚叶源)、管腔结构纤毛上皮(内胚叶源)。

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

  <培养基组成 >
  StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品                              StemSure® Serum Replacement

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品

★StemSure® 系列★


  StemSure® 系列可培养ES细胞和iPS細胞。使用小鼠ES细胞D3检测每批产品的品质。


  ● StemSure® D-MEM・巯基乙醇,硫代甘油

  ● StemSure® 明胶溶液

  ● StemSure® LIF, 小鼠, 重组. 溶液,

  ● StemSure® 冻存溶液

品编号

产品名称

等 级

规 格

价格

保存温度法规情报

197-16275

StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol 
   Red and Sodium Pyruvate

细胞培养用

500 mL

询价

198-15781

StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution 
(×100)

细胞培养用

100 mL

询价

195-15791

StemSure® 50mmol/L Monothioglycerol Solution 
(×100)
与2ME同等使用的还原剂。不属于毒物。

细胞培养用

100 mL

询价

190-15805

StemSure® 0.1w/v%   Gelatin Solution

细胞培养用

500 mL

询价

199-16051
195-16053

StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution

细胞培养用

10units

10units×10

询价

195-16031

StemSure® Freezing   Medium

细胞培养用

100 mL

询价

已有案例引用的培养基配方


iPSC培养基组成如下:含15%StemSure  Serum Replacement(197-16775; Wako Pure Chemical Industries) DMEM /  F12,1%抗生素 – 抗真菌混合溶液,1%非必需氨基酸(139-15651; Wako Pure Chemical Industries ),2mM谷氨酸(16948-004; Nacalai Tesque)和0.1mMβ-巯基乙醇(21438-82; Nacalai Tesque)。文献全文请点击参考文献页面。

1.

Obora, K., Onodera, Y., Takehara, T., Frampton, J., Hasei, J., Ozaki, T., … & Fukuda, K. (2017). Inflammation-induced miRNA-155 inhibits self-renewal of neural stem cells via suppression of CCAAT/enhancer binding protein β (C/EBPβ) expression. Scientific reports, 7, 43604.【mouse neural stem cell (NSC)】

2.

Aihara, A., Koike, T., Abe, N., Nakamura, S., Sawaguchi, A., Nakamura, T., … & Eto, K. (2017). Novel TPO receptor agonist TA-316 contributes to platelet biogenesis from human iPS cells. Blood advances, 1(7), 468-476.

3.

Katayama, M., Kiyono, T., Kuroda, K., Ueda, K., Onuma, M., Shirakawa, H., & Fukuda, T. (2019). Rat-derived feeder cells immortalized by expression of mutant CDK4, cyclin D, and telomerase can support stem cell growth. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Cell Research, 1866(5), 945-956.

4.

Katayama, M., Hirayama, T., Horie, K., Kiyono, T., Donai, K., Takeda, S., … & Fukuda, T. (2016). Induced pluripotent stem cells with six reprogramming factors from prairie vole, which is an animal model for social behaviors. Cell transplantation, 25(5), 783-796.【prairie vole-derived iPSCs(pv-iPSCs)】

5.

Kawata, M., Taniguchi, Y., Mori, D., Yano, F., Ohba, S., Chung, U. I., … & Saito, T. (2017). Different regulation of limb development by p63 transcript variants. PloS one, 12(3), e0174122.【基因编辑小鼠iPS细胞】

6.

Bui, P. L., Nishimura, K., Mondejar, G. S., Kumar, A., Aizawa, S., Murano, K., … & Ito, Y. (2019). Template Activating Factor-I α Regulates Retroviral Silencing during Reprogramming. Cell reports, 29(7), 1909-1922. 【Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) 】

7.

Sumi, S., Kawagoe, M., Abe, R., Yanai, G., Yang, K. C., & Shirouzu, Y. (2017). A multiple-funnels cell culture insert for the scale-up production of uniform cell spheroids. Regenerative therapy, 7, 52-60.

8.

古田明日香, & 中村肇伸. (2019). ES 細胞は代謝シフトを介して全能性細胞へと変化する. In 日本繁殖生物学会 講演要旨集 第 112 回日本繁殖生物学会大会 (pp. AW1-5). 日本繁殖生物学会.

9.

Onozato, D., Yamashita, M., Nakanishi, A., Akagawa, T., Kida, Y., Ogawa, I., … & Matsunaga, T. (2018). Generation of intestinal organoids suitable for pharmacokinetic studies from human induced pluripotent stem cells. Drug Metabolism and Disposition, 46(11), 1572-1580.

10.

Hayashi, Y., Matsumoto, J., Kumagai, S., Morishita, K., Xiang, L., Kobori, Y., … & Sumaru, K. (2018). Automated adherent cell elimination by a high-speed laser mediated by a light-responsive polymer. Communications biology, 1(1), 218.【hiPSC differentiation】

11.

Osafune, K., Toyoda, T., Takekawa, S., Nakamura, G., & Ito, R. (2019). U.S. Patent Application No. 16/490,394.

12.

Kato, T., Kanemura, Y., Shofuda, T., & Fukusumi, H. (2016). U.S. Patent Application No. 14/900,975.

13.

Eitoku, M., Kato, H., Suganuma, N., & Kiyosawa, H. (2018). Markers associated with neuron-specific Ube3a imprinting during neuronal differentiation of mouse embryonic stem cells. Cytotechnology, 70(1), 45-53.

14.

Onozato, D., Yamashita, M., Fukuyama, R., Akagawa, T., Kida, Y., Koeda, A., … & Matsunaga, T. (2018). Efficient generation of Cynomolgus monkey induced pluripotent stem cell-derived intestinal organoids with pharmacokinetic functions. Stem cells and development, 27(15), 1033-1045.

15.

Katayama, M., Hirayama, T., Kiyono, T., Onuma, M., Tani, T., Takeda, S., … & Fukuda, T. (2017). Immortalized prairie vole-derived fibroblasts (VMF-K4DTs) can be transformed into pluripotent stem cells and provide a useful tool with which to determine optimal reprogramming conditions. Journal of Reproduction and Development, 2016-164.

16.

Matsuyama, A., & Okura, H. (2017). U.S. Patent No. 9,644,181. Washington, DC: U.S. Patent and Trademark Office.

17.

Tomizawa, M. (2016). Culture Medium And Method For Inducing Differentiation of Pluripotent Stem Cells To Hepatoblasts. U.S. Patent Application No. 14/749,715.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
191-18375 Stemsure® Serum Replacement
 Stemsure®血清替代品
500 mL 细胞培养用

人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF 用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜

  • 产品特性
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  • 参考文献

用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF                              用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜

人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF

本品是利用对未分化人ES/iPS细胞具有高亲和力的凝集素和rBC2LCN(AiLecS1),对人ES/iPS细胞进行染色的试剂盒。

在结合过氧化物酶的rBC2LCN(rBC2LCN-POD)和高灵敏度DAB显色底物的共同作用下,无需荧光显微镜即可识别可见光下未分化的人ES/iPS细胞。

碱性磷酸酶(ALP)染色多数情况下可以用于可见光下未分化细胞的检测,但在骨、软骨、肝脏等具有ALP活性细胞的分化诱导实验中,ALP染色不能用来检测未分化的细胞。由于本试剂盒中使用的rBC2LCN对人ES/iPS细胞具有高亲和力,不会对具有ALP活性的细胞进行染色,可在多种细胞的分化诱导实验中检测未分化细胞。

人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF                              用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜

◆检测原理


人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF                              用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜


将结合过氧化物酶的rBC2LCN(rBC2LCN-POD)与存在于人ES/iPS细胞膜的足糖萼蛋白上的O型糖链进行结合,通过DAB底物与过氧化物酶的反应,能在可见光下观察到未分化细胞。



染色案例①


人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF是将饲养层条件下培养的人iPS细胞(201B7株)固定之后,先对ALP(NBT/BCIP)(蓝紫色)进行染色,再使用本试剂盒(棕色)共染色。由于进入分化状态的细胞(红色框内的细胞)不与rBC2LCN结合,所以不会被本试剂盒染色。


人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF                              用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜



◆染色案例②

人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF                              用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜

共培养具有ALP活性的间充质干细胞(MSC)与人iPS细胞,再分别使用ALP、本试剂盒进行染色。

在ALP染色中,人iPS细胞(中央部分)与MSC(周围部分)均被染色;而在使用本试剂盒的染色中,只有人iPS细胞被染色。

◆产品列表

产品编号

产品名称

等级

包装

294-83501

Human ES/iPS Cell Staining Kit-BF
人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF

细胞染色用

10 次

相关产品

荧光标记rBC2LCN

产品编号

产品名称

等级

包装

180-02991

rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)
人iPS未分化标记染料rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)

细胞染色用

100 μL

186-02993

100 μL×5

185-03161

rBC2LCN-635 (AiLecS1-635)
人iPS未分化标记染料rBC2LCN-635 (AiLecS1-635)

细胞染色用

100 μL

经过滤器过滤、灭菌,直接添加至人ES/iPS细胞的培养基中,可观察到荧光标记的人ES/iPS细胞。

也可用于流式细胞仪。

未标记rBC2LCN

产品编号

产品名称

等级

包装

029-18061

BC2LCN(AiLecS2) Lectin, recombinant, Solution
BC2LCN (AiLecS1)凝集素,重组体,溶液

糖链研究用

1 mg

025-18063

1 mg×5

※ 上述试剂仅供实验研究用,不可用作医药品、食品、临床诊断等。

参考文献

1. Watanabe, T. et al.: Cytotherapy, 23, 176(2021).
2. Onuma, Y. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 431, 524(2013).
3. Tateno, H. et al.: Stem Cells Transl. Med., 2, 265(2013).
4. Tateno, H. et al.: J. Biol. Chem., 286, 20345(2011).


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

内胚层监测试剂盒 ES/iPS Differentiation Monitoring Kit–Human Endoderm

  • 产品特性
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内胚层监测试剂盒内胚层监测试剂盒                              ES/iPS Differentiation Monitoring Kit–Human Endoderm

ES/iPS Differentiation Monitoring Kit–Human Endoderm

  本品使用 ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)法检测培养上清中的 Marker 蛋白质,因此可以在不损坏细胞的情况下,继续培养细胞并监测其分化状态。另外,本品可用于多检体测定,因此认为可用于分化诱导剂等药物筛选。

 


◆特点:


 ● 特异性检测ES/iPS细胞分化内胚层

 ● 在不损坏细胞的情况下,继续培养细胞并监测其分化状态

 ● 可短时间检测多检体



◆试剂盒组成:


● Coated 96-well Strip Plate ……… 1个

● Standard…………………………………..1支

● Reagent A………………..……………….1支

● Reagent B……………………..…………..1支

● Washing Buffer……..…………….…..1支

● Storage……………..……….…0.5mL×1支

● Substrate Solution……..…10m1支

● Plate Seal……………………………..…..3片

  胚胎干细胞或多能性干细胞经由三胚层(内胚层、中胚层、外胚层)可分化所有细胞,因此在实现再生医疗方面备受瞩目。三胚层中内胚层细胞是分化成人类重要机能器官如胰脏、肝脏的细胞,为了确保处于正确的分歧点,有效率的细胞分化诱导和分化度的确认是必不可少的。我们通过测定 mRNA 或细胞内蛋白质的表达量确认细胞分化程度。为了能判断上述物质的表达量,需破坏一部分的培养细胞。

  本品通过检测培养上清中的 Marker 蛋白质,可检测ES/iPS细胞到内胚层细胞的分化程度。这些 Marker 蛋白与内胚层 Marker Sox17、Foxa2 双阳性细胞率相关。

内胚层监测试剂盒                              ES/iPS Differentiation Monitoring Kit–Human Endoderm

图1. 人iPS细胞分化为内胚层的培养上清中 Marker 蛋白每天的量及内胚层比例(Sox17,Foxa2 双阳性细胞)的关系。

A)培养上清中 Marker 蛋白每天的分化量

B) 内胚层细胞每天分化的比例

【参考文献】

[1]: H. Iwashita, N. Shiraki, D. Sakano, T. Ikegami, M. Shiga, K. Kume, S. Kume, PloS ONE., 2013, 8(5): e64291.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
342-91701 ES/iPS Differentiation Monitoring Kit-Human Endoderm 96 test

rBC2LCN 人ES/iPS细胞 未分化标记

  • 产品特性
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  • 参考文献

rBC2LCNrBC2LCN                              人ES/iPS细胞 未分化标记

人ES/iPS细胞 未分化标记

  rBC2LCN 对未分化ES/IPS细胞表面存在的糖链有极高的亲和性,因此,rBC2LCN 可作为ES/iPS的细胞标志。

  使用荧光标记的 rBC2LCN,只要直接添加到培养液中,即可进行人ES/iPS活细胞染色。将与绿杆脓菌毒素(PE23)结合的 rBC2LCN-PE23 同样添加到培养液中,能杀死人ES/iPS细胞。



◆案例


■人iPS细胞的活细胞染色(Live Cell Imaging)

  

分别用 rBC2LCN 和 Tra-1-81 给人iPS细胞 201B 株染色,2小时后确认染色图像:rBC2LCN 染色细胞比 Tra-1-81 染色细胞更能清晰地观察到荧光的部分。


rBC2LCN

Tra-1-81

(稀释倍数1:100)

rBC2LCN                              人ES/iPS细胞 未分化标记

rBC2LCN                              人ES/iPS细胞 未分化标记

■去除间充质干细胞分化中的人iPS细胞

  

疾病患者源人iPS细胞分化间充质干细胞:将 rBC2LCN-PE23 加入上述混合培养液,终浓度为 10 μg/mL。添加24小时后人 iPS 细胞群开始崩解,48小时后人iPS细胞渐渐去除。

  另外,rBC2LCN-PE23 添加48小时后,间充质干细胞不受影响,细胞仍保持活性。


rBC2LCN                              人ES/iPS细胞 未分化标记


数据提供:东京慈惠会医科大学 再生医学研究部  岡野James洋尚先生

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
180-02991 rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)Excitation 495nm, Emission 520nm
荧光标记的rBC2LCN
100 μL 细胞染色用
186-02993 rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)Excitation 495nm, Emission 520nm
荧光标记的rBC2LCN
100 μL×5 细胞染色用
186-03211 rBC2LCN-547【AiLecS1-547】 Excitation 551nm, Emission 565nm 100 μL 细胞染色用
182-03213 rBC2LCN-547【AiLecS1-547】 Excitation 551nm, Emission 565nm 100 μL×5 细胞染色用
185-03161 rBC2LCN-635【AiLecS1-635】 Excitation 634nm, Emission 654nm 100 μL 细胞染色用
181-03163 rBC2LCN-635【AiLecS1-635】 Excitation 634nm, Emission 654nm 100 μL×5 细胞染色用
180-03231 rBC2LCN-PE23 100 μL 细胞培养用
186-03233 rBC2LCN-PE23 100 μL×5 细胞培养用