E. coli HB101 Electro-Cells酶试剂盒Takara

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E. coli HB101 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9021 E. coli HB101 Electro-Cells 50 μl × 10 ¥391 E. coli HB101 Electro-Cells E. coli HB101 Electro-Cells E. coli HB101 Electro-Cells
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■ 制品内容
E.coli HB101 Electro-Cells 50 μl × 10
pBR322 plasmid (10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli HB101是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E. coli HB101电转细胞可用于制备DNA文库或重组质粒的亚克隆。此电转细胞不能进行蓝白斑筛选。
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HB101:supE44, △(mcrC-mrr), recA13, ara-14, proA2, lacY1, galK2, rpsL20, xyl-5, mtl-1, leuB6, thi-1
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化降低将会降低。请使用附带的pBR322照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入10 pg 的pBR322,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >5 x 108 cfu/μg pBR322
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
4. 导入分子量较大的DNA (>7 kb) 时,转化效率降低。
5. 使用TE buffer制备DNA样品。DNA样品溶液中高盐浓度可能会降低转化效率。
6. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
    ·L-plates Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5,添加agar到1.5%,高压灭菌。
7. Electro-Cells一旦解冻,不能再次冻结保存。如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中快速冻结,于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2021-02-08 11:27:50

E.coli JM109 Electro-Cells酶试剂盒Takara

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E.coli JM109 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9022 E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10 ¥1,013 E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells
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E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells E.coli JM109 Electro-Cells
 
E.coli JM109 Electro-Cells
E.coli JM109 Electro-Cells  
E.coli JM109 Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
由于E. coli JM109 Electro-Cells含有F' 质粒,可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞,也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时,重组体可以利用电转化细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性,通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli JM109: recA1 , endA1 , gyrA96 , thi -1 , hsdR17 (rk-mk+), e14-(mcrA- ) supE44 , relA1 , Δ (lac-proAB )/F'[traD36 , proAB+, lacIq, lacZ ΔM15]
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入10 pg 的pUC19,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 cfu/μg pUC19
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (>7 kb) 时,转化效率降低。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。
6. 稀释时,使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为0.6%,高压灭菌。
8. 制备感受态细胞。当DNA插入M13噬菌体载体克隆位点时,重组体可通过在YT-soft agar添加X-Gal 和IPTG进行筛选,因为非重组体存在于蓝斑中。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为1.5%,高压灭菌。
10. 当加入X-Gal或IPTG时,按照以下方法操作:
   ·加入100 mM IPTG,100 μl-300μl IPTG/100 ml agar medium 和 25 μl IPTG /3 ml soft agar。
   ·加入20 mg/ml X-Gal(溶解于二甲基甲酰胺)到agar medium中,比例为200 μl-300 μl /100 ml。若使用 soft agar,比例为50 μl/3 ml。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2021-03-12 11:49:46

E.coli DH5α Electro-Cells酶试剂盒Takara

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E.coli DH5α Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9027 E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10 ¥433 E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells
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E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells E.coli DH5α Electro-Cells
 
E.coli DH5α Electro-Cells
E.coli DH5α Electro-Cells  
E.coli DH5α Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli DH5α Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性) ,应用蓝白斑方法可以很容易鉴别重组体菌株。由于菌株无lacl q,故不需要IPTG。因此,当制作基因文库或进行亚克隆时,可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli DH5α:F-, φ80dlacZ Δ M15, Δ ( lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA , supE44 , λ-, thi -1 , gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
1. 转化效率
转入10 pg 的pUC19,涂于含有A+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 transformants /μg pUC19
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时,含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-琼脂平板上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (>7 kb) 时,转化效率降低。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
·L-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   10 g
 Yeast extract   5 g
 NaCl   5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φb-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   20 g
 Yeast extract   5 g
 MgSO4·7H2O   5 g
用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 稀释时,使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. 当使用X-Gal时:
   ·将20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200~300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中。
8. DH5α可作为M13mp载体的复制。但由于不携带F因子,因而不能形成菌斑。
9. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 

页面更新:2020-04-30 14:30:57

E.coli HST08 Premium Electro-Cells酶试剂盒Takara

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E.coli HST08 Premium Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9028 E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10 ¥636 E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells
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E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
E.coli HST08 Premium Electro-Cells
E.coli HST08 Premium Electro-Cells  
E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli HST08 Premium Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。 E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA缺失的菌株,这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及BAC文库的构建。即便转化较大的质粒,也可维持较高的转化效率和菌落生长率*。10 kb以上长片段DNA克隆和构建基因文库时,可与Takara DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用,效果很好。
*:与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒,可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性,在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选,以筛选阳性克隆。
X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST08 Premium: F-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转入10 pg 的pUC19,涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时,含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,高纯度样品DNA添加量不要超过10 ng,否则会降低转化效率。
3. 当使用50 μl Electro-cells时,DNA溶液添加量不要超过5 μl,否则会降低转化效率。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基,但转化效率会降低。
  ·L-broth:10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl/1 L water,用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
  ·φ b-broth:5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O/1 L water,用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 当使用X-Gal时,按照以下操作进行:
  ·将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2020-12-31 12:14:07

Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells酶试剂盒Takara

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息。

Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9115 Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 40 μl × 5 ¥572 Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells
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■ 制品内容
Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 40 μl×5
pRI 900 DNA*1(1 ng/μl) 10 μl×1
SOC Medium*2 1 ml×10
   
*1: pRI 900 DNA : 去除了pRI 910 DNA (Code No.: 3261) 上多克隆位点的DNA。
*2: SOC Medium 
2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
根癌农杆菌 (Rhizobium radiobactor) 可转化自身Ti质粒的T-DNA (transfer DNA) 进入宿主植物细胞,并将此DNA插入植物染色体DNA。T-DNA上的插入基因表达后,转入到被称为Crown gall的肿瘤细胞。利用这种基因转化机制,发明了用于植物转化的binary vector method。这种体系中,Ti质粒中T-DNA上的致病基因被选择性标记基因和外源目的基因所取代,通过农杆菌介导的基因转移将目的基因引入到植物染色体DNA中。
Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404以及binary vector method首先在荷兰的Leiden University被Dr. P. J. J. Hooykaas发现。Agrobacterium tumefaciens含有pAL4404质粒,其只含有T-DNA vir区域 (vir基因诱导和T-DNA转移),是一种广泛用于植物细胞转化实验的菌株。
本制品是电转化的感受态细胞。使用A. tumefaciens和binary vector method,可以进行各种植物细胞的感染 (转染) 实验。
 
■ 保存
-80℃。
注意:-80℃保存。如果保存温度不恒定,转化效率将会降低。可使用附带的pRI 900 DNA 确定细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
根据使用方法,转入1 ng pRI 900 DNA,涂于含有卡那霉素和链霉素的平板上进行筛选。
转化效率 : >5×106 colonies/μg pRI 900 DNA
 
 

页面更新:2020-06-19 15:46:04