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高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒
BDNF是一种神经营养因子，参与神经发生、神经保护和突触形成，在大脑中发挥着重要作用。据报道，BDNF具有前体proBDNF，并且与BDNF的作用不同。 proBDNF经加工，可成为mBDNF（mature BDNF）。
本产品是一款可特异性检测mBDNF浓度的ELISA试剂盒。
通过使用发光检测系统，灵敏度是旧款产品的20倍左右（产品编号: 296-83201 Mature BDNF ELISA 试剂盒）。 该产品可以检测小鼠血液中难以检测的微量mBDNF。
◆特点
● 高灵敏度
● 特异性检测mBDNF
◆试剂盒组成
|
96次用 |
|
|
抗体固定化酶标板 |
1 plate |
|
Mature BDNF标准品 （冻干品） |
1支 |
|
缓冲液 |
60 mL |
|
生物素结合抗体溶液 |
100 μL |
|
过氧化物酶结合链霉亲和素溶液 |
100 μL |
|
发光试剂 1 |
6 mL |
|
发光试剂 2 |
6 mL |
|
清洗液(10x) |
100 mL |
|
封板膜 |
4 张 |
◆试剂盒性能
|
● 标准曲线范围：0.205～50 pg/mL ● 检测对象：mBDNF※1 ● 检测对象样品：小鼠 血清/血浆/大脑破碎液 ● 大鼠 血清/血浆 ● 人 血清/血浆/唾液 ● 所需样品量：13 μL（4倍稀释时） ● 检测时间：4 h ● 检测法：发光法※2 ※1：与人proBDNF的交叉反应性约0.5%。 ※2：发光检测需要读板器。 |
标准曲线示例
|
◆与Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako（产品编号：296-83201）比较
|
产品名称 |
高灵敏度Mature BDNF ELISA 试剂盒 |
Mature BDNF ELISA试剂盒 |
|
产品编号 |
298-83901 |
296-83201 |
|
标准曲线范围 |
0.205～50 pg/mL |
4.1～1,000 pg/mL |
|
检测对像 |
mBDNF |
mBDNF |
|
与人proBDNF的反应性 |
<0.5% |
约10% |
|
检测目标样品 |
小鼠：血清/血浆/大脑破碎液 大鼠：血清/血浆 人：血清/血浆/唾液 |
人：血清/血浆 |
|
需要样品量 |
13 μL（4倍稀释时） |
血清：10 μL （10倍稀释时） |
|
检测时间 |
约4 h |
约4 h |
|
检测方法 |
发光分析法 |
比色法 |
◆检测原理
本产品使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与mBDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用残端抗体，降低与proBDNF的交叉反应性（<0.5%），并且使用发光底物提供高灵敏度。
|
本产品 |
A公司同等产品 |
B公司同等产品 |
C公司同等产品 |
|
|
人proBDNF交叉率 |
<0.5% |
约10％ |
约15％ |
约50％ |
|
灵敏度 （标准曲线下限值） |
0.2 pg/mL |
62.5 pg/mL |
15.6 pg/mL |
15.0 pg/mL |
◆检测数据
加标回收测试
人样品
|
样品 |
加标量(pg/mL) |
检测值(pg/mL) |
回收量(pg/mL) |
回收率(%) |
|
唾液1 |
0 |
0.738 |
― |
― |
|
20 |
18.4 |
17.7 |
88.5 |
|
|
100 |
90.3 |
89.6 |
89.6 |
|
|
唾液2 |
0 |
0.327* |
― |
― |
|
20 |
18.2 |
17.9 |
89.5 |
|
|
100 |
91.6 |
91.3 |
91.3 |
|
|
唾液3 |
0 |
1.67 |
― |
― |
|
20 |
22.1 |
20.4 |
102 |
|
|
100 |
98.8 |
97.1 |
97.1 |
|
|
唾液4 |
0 |
0.512 |
― |
― |
|
20 |
18.1 |
17.6 |
88 |
|
|
100 |
86.9 |
86.4 |
86.4 |
|
|
唾液5 |
0 |
0.296* |
― |
― |
|
20 |
18.7 |
18.4 |
92 |
|
|
100 |
95.7 |
95.4 |
95.4 |
|
|
唾液6 |
0 |
0.393* |
― |
― |
|
20 |
17.5 |
17.1 |
85.5 |
|
|
100 |
85.5 |
85.1 |
85.1 |
|
|
唾液7 |
0 |
0.814 |
― |
― |
|
20 |
18.4 |
17.6 |
88 |
|
|
100 |
86.4 |
85.6 |
85.6 |
|
|
唾液8 |
0 |
4.09 |
― |
― |
|
20 |
23.9 |
19.8 |
99 |
|
|
100 |
91.1 |
87 |
87 |
|
|
唾液9 |
0 |
0.601 |
― |
― |
|
20 |
18.6 |
18 |
90 |
|
|
100 |
101 |
100 |
100 |
|
|
唾液10 |
0 |
0.852 |
― |
― |
|
20 |
18.3 |
17.4 |
87 |
|
|
100 |
86.3 |
85.4 |
85.4 |
|
|
唾液11 |
0 |
1.12 |
― |
― |
|
20 |
18.5 |
17.4 |
87 |
|
|
100 |
100 |
98.9 |
98.9 |
* 标准曲线范围外的检测值(<0.205 pg/mL)仅作参考
小鼠样品
|
样品 |
加标量(pg/mL) |
检测值(pg/mL) |
回收量(pg/mL) |
回收率(%) |
|
血浆1 |
0 |
0.622 |
－ |
－ |
|
1 |
1.57 |
0.948 |
94.8 |
|
|
10 |
10.5 |
9.88 |
98.8 |
|
|
30 |
31 |
30.4 |
101 |
|
|
血浆2 |
0 |
1.22 |
－ |
－ |
|
0.5 |
1.77 |
0.55 |
110 |
|
|
1 |
2.13 |
0.91 |
91 |
|
|
10 |
11.5 |
10.3 |
103 |
|
|
20 |
20.7 |
19.5 |
97.5 |
|
|
血清1 |
0 |
<0.205 |
－ |
－ |
|
1 |
0.959 |
0.959 |
95.9 |
|
|
10 |
10 |
10 |
100 |
|
|
30 |
30.2 |
30.2 |
101 |
|
|
血清2 |
0 |
0.82 |
－ |
－ |
|
0.5 |
1.32 |
0.5 |
100 |
|
|
1 |
1.76 |
0.94 |
94 |
|
|
10 |
10.5 |
9.68 |
96.8 |
|
|
20 |
19.5 |
18.7 |
93.5 |
大鼠样品
|
样品 |
加标量(pg/mL) |
检测值(pg/mL) |
回收量(pg/mL) |
回收率(%) |
|
混合血浆 |
0 |
<0.205 |
－ |
－ |
|
1 |
1.06 |
1.06 |
106 |
|
|
5 |
4.8 |
4.8 |
96 |
|
|
10 |
10.5 |
10.5 |
105 |
|
|
20 |
20.9 |
20.9 |
105 |
|
|
混合血清 |
0 |
1.08 |
－ |
－ |
|
1 |
2.13 |
1.05 |
105 |
|
|
5 |
5.87 |
4.79 |
95.8 |
|
|
10 |
10.6 |
9.52 |
95.2 |
|
|
20 |
20.6 |
19.5 |
97.5 |
稀释线性测试
人样品
|
唾液 |
|
|
|
|
小鼠样品
|
血清 |
血浆 |
大脑破碎液 |
|
|
|
|
与其他相似蛋白的反应性
确认proBDNF和神经营养家族（NGF、NT-3和NT-4）之间的交叉性。
|
蛋白 |
交叉率 （%） |
|
人 proBDNF |
< 0.5 |
|
人 NGFβ |
< 0.5 |
|
人 NT-3 |
< 0.5 |
|
人 NT-4 |
< 0.5 |
|
小鼠 proBDNF |
6.62 |
|
小鼠 NGFβ |
< 0.5 |
|
小鼠 NT-3 |
< 0.5 |
|
小鼠 NT-4 |
< 0.5 |
【结果】
小鼠proBDNF交叉率为6.62%，其他相似的蛋白的交叉率未满0.5%。
检测示例：自闭症模型小鼠的血清，血浆检测
使用本试剂盒检测自闭症模型小鼠 (BTBR T+Itpr3tf/J)以及野生型小鼠血清与血浆的mBDNF。
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样品种类 |
样品 |
样品No. |
检测值 (pg/mL) |
|
血清 |
BTBR小鼠 （自闭症模型小鼠） |
BTBR-1 |
12.4 |
|
BTBR-2 |
18.1 |
||
|
BTBR-3 |
16.1 |
||
|
C57BL/6J （野生型小鼠） |
B6J-1 |
6.96 |
|
|
B6J-2 |
9.8 |
||
|
B6J-3 |
9.01 |
||
|
血浆（肝素） |
BTBR小鼠 （自闭症模型小鼠） |
BTBR-4 |
11.1 |
|
BTBR-5 |
9.73 |
||
|
C57BL/6J （野生型小鼠） |
B6J-4 |
6.93 |
|
|
B6J-5 |
11.6 |
【结果】
所有样品都能检测出mBDNF
检测示例：野生型和BDNF敲除小鼠在大脑破碎液中的检测
为确认对mBDNF的特异性，使用本试剂盒检测BDNF敲除小鼠与野生型小鼠大脑破碎液中的mBDNF。
＜参考文献 (BDNF敲除小鼠) ＞
Conover, J. C., et al.: Nature, 375(6528), 235(1995).
【结果】
BDNF敲除小鼠的检测值较低，可确认对BDNF的特异性。
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
FAQ
◆关于样品
|
Q1. |
如何保存样品？ |
|
A1. |
样品需长期储存时，建议在-80 °C以下冻存。 唾液样品室温可保存6 h，冷藏24 h，-20 °C以下保存1个月，检测值基本无变化。（室温，0 h检测值的相对变化率在±10%以内） 尽量避免反复冻融。已确认冻融4次以上检测值会有15%以上的变动。 |
|
Q2. |
采集唾液样品应该使用什么方法? |
|
A2. |
采集检测用的唾液推荐使用流涏法。流涏法是通过将唾液滴入小瓶或试管来收集样品的方法。 已确认使用棉花和灭活的聚合物材料制的棉签采集的样品，检测结果与流涏法相当。但需注意，不同的棉签材质，可能会吸附待测物质。 |
|
Q3. |
如果用唾液样品不能顺利检测的时候该怎么做？ |
|
A3. |
粘性强的唾液可能会无法获得期待的检测值。出现这种情况时，可去除粘液蛋白等不溶物，将收集的唾液先冷冻、解冻，然后使用离心分离（例：1500xg, 15 min）后的上清作为样品进行检测。 |
|
Q4. |
小鼠大脑破碎液检测时建议使用何种提取Buffer？ |
|
A4. |
请使用添加了蛋白酶抑制剂RIPA Buffer。为避免Buffer中的表面活性剂成分对实验产生影响，请将试剂盒 随附的Bufffer稀释2倍以上。 |
◆关于本试剂盒
|
Q1. |
使用本产品进行检测时需要什么器具和设备? |
|
A1. |
● 纯净水（蒸馏水） ● 标准溶液/样品稀释管 ● 清洗液稀释用玻璃器具（量筒，烧杯） ● 枪头交换型移液枪(可正确移液10 μL，以及正确移液20~1000μL的一次性枪头) ● 连续分液移液枪，能连续性分液50 μL的移液枪 ● 有吸水性的纸巾等（擦拭清洗后孔板上残留的液体） ● 涡旋振荡器（Vortex Type） ● 微孔板振荡器(约600～800 rpm) ● 96孔板清洗器（建议使用）或洗瓶 ● 96孔板式读数器（发光测量用） ● 数据处理软件 |
|
Q2. |
本试剂盒抗体单独销售吗？ |
|
A2. |
不单独销售 |
|
Q3. |
试剂盒可以分次使用吗？ |
|
A3. |
可以。孔板设计为每条孔板8个孔，且标准品量充足。但是分次检测时，因每次检测都需绘制标准曲线，所以可检测的样品数量会减少。 使用1次时→40个样品（80孔）※ 标准品使用16孔 使用2次时→32个样品（64孔）※ 标准品使用32孔 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 298-83901 | Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive BDNF成熟体ELISA试剂盒Wako，高灵敏度 |
96 tests |
