BcaBEST™ Labeling Kit酶试剂盒Takara

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BcaBEST Labeling Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6046 BcaBEST Labeling Kit 40 Rxns ¥701 BcaBEST™ Labeling Kit BcaBEST™ Labeling Kit BcaBEST™ Labeling Kit
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■ 制品内容 (40 次量) BcaBEST™ Labeling Kit
Random Primer (9 mer) 80 μl
10 × Buffer 100 μl
dNTP Mixture 100 μl
(dGTP,dATP,dTTP) (各0.2 mM)  
BcaBEST DNA Polymerase (2 U/μl) 40 μl
Control DNA (λ-Hind Ⅲ Fragment) (25 ng/μl) 10 μl
   
 
■ 制品说明
BcaBEST Labeling Kit是一种在DNA上标记[α-32P]、[3H] dCTP后,可在短时间内合成DNA 探针的试剂盒。本试剂盒的设计以A.P.Feinberg和B.Vogelstion 法为基础并对其进行了改良,操作十分简便,合成后的探针比活性高。目前我们经常使用的Klenow fragment 存在反应时间长、对GC 含量高的DNA 模板或具有高级结构的DNA 摄入效率低等缺点。Bacillus caldotenax 来源的BcaBEST DNA Polymerase是一种耐热性的、高延伸性的DNA 聚合酶。BcaBEST DNA Polymerase 和随机引物 (9 mer) 在50℃~ 55℃条件下反应10 分钟,即可对具有高级结构的DNA 模板进行标记。
BcaBEST DNA Polymerase 具有优良的延伸性,与Klenow fragment相比,可以合成更长的探针,同时因BcaBEST DNA Polymerase不具备exonuclease活性,反应时间长也不会导致摄入效率下降。
 
表1. 与Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2比较
     BcaBEST Labeling Kit  Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2
反应时间 10分钟 10分钟
探针的比放射活性 109 dpm/μg 109 dpm/μg
模板DNA 不受高级结构、GC含量的影响  高级结构或GC含量高时可导致摄入效率下降
注:两种试剂盒使用300 bp以下的DNA模板时,可导致摄入效率下降。
 
利用随机引物进行DNA标记的原理
BcaBEST™ Labeling Kit
 
 

页面更新:2021-04-19 10:48:57

BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1酶试剂盒Takara

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BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR023A BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns ¥1,200 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
Takara RR023B (A × 2) BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns × 2 ¥2,300 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
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BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1) BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
BcaBEST Polymerase (22 U/μl) 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
Random 9 mers (50 μM) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
RNase Free dH2O 1 ml
Bca-Optimized Taq (5 U/μl) 25 μl
2 × Bca lst Buffer 1.25 ml × 2 支
5 × Bca 2nd Buffer 800 μl
dNTP Mixture (各10 mM) 50 μl
MgSO4 (25 mM) 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 25 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 25 μl
Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 25 μl
   
*1 反转录反应10 μl,PCR反应体系50 μl,可使用100次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂,即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA,然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃,所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 9 mers   5′-NNNNNNNNN-3′
Oligo dT Primer   包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,没有M13 Primer M4区域。
Control F-1 Primer   5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer   5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ 试剂盒的原理
 
BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
BcaBEST RNA PCR的原理图
 
■ 试剂盒特点
RNA模板
  适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效)
扩增片段大小
   5 kb以下
反转录酶
   BcaBEST Polymerase (最适温度65℃)
DNA聚合酶
   Bca-Optimized Taq
RNase Inhibitor
   必须使用 (试剂盒中含有)
合成cDNA第一条链的引物
  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择
操 作
   在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)
 
 

页面更新:2019-12-23 14:28:52