In-Fusion Snap Assembly Master Mix酶试剂盒Takara

发表于2024年6月14日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

In-Fusion Snap Assembly Master Mix
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	638947	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	10 Rxns	￥1,155 ￥866
Clontech	638948	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	50 Rxns	￥5,204 ￥3,903
Clontech	638949	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	250 Rxns	￥20,747 ￥15,560

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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效率更高、重复性更好的无缝克隆试剂登场了！
In-Fusion Snap Assembly Master Mix是在In-Fusion HD Cloning Kit基础上升级的新产品，与其他公司同类产品相比克隆效率更高。
In-Fusion HD Cloning Kit与其他公司同类产品对比数据参见：In-Fusion与其他公司的无缝克隆产品对比有何不同？

■ 制品说明

In-Fusion Snap Assembly是Takara推出的新一代无缝克隆试剂，延续了上一代HD系列产品的优点，仅通过15分钟反应，即可将1个或多个PCR片段按照设计要求插入到任意载体的任意位置，对于待克隆的PCR片段，不需要进行限制酶酶切、磷酸化及末端平滑化等处理。Snap Assembly系列的实验效率和一致性均超过HD系列产品，更擅长多片段克隆以及高通量实验。

■ 制品内容

· 5X In-Fusion Snap Assembly Master Mix
· linearized pUC19 Control Vector
· 2 kb Control Insert

※ PCR产物纯化需要另外准备纯化试剂，例如可使用TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0（Code No. 9762）纯化柱。
※ 试剂盒中不附带感受态细胞，转化实验请使用高效率的感受态细胞，例如 E. coli HST08 Premium Competent Cells（Code No. 9128）或 Stellar感受态细胞。
※ 扩增目的片段及对载体进行反向PCR时建议使用高保真酶 PrimeSTAR Max DNA Polymerase（Code No.：R045A/B）。

■ 制品特点

· 可在任意载体的任意位置进行定向克隆
· 操作简单方便，无需进行反复的酶切连接
· 对于50 bp～15 kb的插入片段，克隆效率可超过95%
· 与现有的In-Fusion HD Cloning Kit相比，多片段克隆效率大幅提升
· 在高正确率的基础上，转化后得到的菌落数比其他公司的同类产品更多

■ In-Fusion原理

In-Fusion技术利用In-Fusion酶，通过识别DNA片段（例如PCR片段和线性化载体）末端15 bp的同源序列来实现高效、准确地融合。这15 bp的同源序列可在设计目的片段扩增引物时，使用我们的在线引物设计工具进行设计。In-Fusion酶从线性DNA链的3'末端切割核苷酸，这样，两个DNA片段之间便形成互补碱基对，可通过退火使片段连接起来。通过这一原理可将单个或多个片段克隆到载体中，而无需亚克隆。除此之外，In-Fusion技术还可以应用于突变导入、基因合成、特定基因结构域改变等。

图1. In-Fusion克隆标准工作流程示意图（适用所有In-Fusion克隆试剂盒）。

■ In-Fusion引物设计

In-Fusion克隆用引物的设计与目的片段PCR扩增用引物的设计基本相同。不同之处是需要在特异性引物的5'末端添加15个与载体末端序列相同的碱基（参考下图）。Takara为您提供了方便的在线引物设计工具，欢迎使用。

■ 对比实验例

实验例1

图2. In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD性能比较。分别使用In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD将五个不同的插入片段（大小从405 bp到1,005 bp不等）同时克隆到一个经反向PCR线性化的2.7 kb的载体中，每组克隆反应重复三次。两个反应系统除了酶预混液不同之外，扩增引物和其他试剂全部相同。转化涂菌后显示Snap Assembly组长出的菌落数是HD组的4倍，挑取10个转化菌落，进一步使用Sanger测序法进行验证，结果显示二者正确率均超过90%。

实验例2

数据来源于Takara Bio USA, Inc.

图3. In-Fusion Snap Assembly与其他公司同类产品A的比较（使用反向PCR的方法线性化载体）。 将3.8 kb的片段（图A）或34.2 kb的腺病毒片段（图B）克隆到通过反向PCR线性化的2.7 kb的载体中，每组克隆反应重复三次。引物按照所使用试剂厂家的要求进行设计。转化涂菌后显示In-Fusion Snap Assembly组长出的菌落数是A产品组的2倍，各挑取20个转化菌落，再使用Sanger测序法和菌落PCR的方法分别进行验证，结果显示In-Fusion Snap Assembly的正确率超过95%。

实验例3

数据来源于Takara Bio USA, Inc.

图4．In-Fusion Snap Assembly与其他公司同类产品A的比较（使用限制酶酶切的方法线性化载体）。将3.8 kb的片段克隆到通过限制酶酶切线性化的标准载体中，载体因使用不同的限制酶而产生三种不同末端，5'突出端（图A），平端（图B）和3'突出端（图C），每组克隆反应重复三次，引物按照所使用试剂厂家的要求进行设计。转化涂菌后显示In-Fusion Snap Assembly组长出的菌落数是A产品组的5-16倍，根据载体末端类型的不同而不同。各挑取20个转化菌落，进一步使用Sanger测序法进行验证，结果显示In-Fusion Snap Assembly的正确率超过95%。

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多片段克隆的快速实验流程

In-Fusion引物设计工具

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2分钟了解In-Fusion的操作流程

多才多艺的In-Fusion无缝克隆

2分钟看懂In-Fusion作用机制的与众不同

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页面更新：2022-07-04 10:37:34

In-Fusion Snap Assembly EcoDry酶试剂盒Takara

发表于2024年6月13日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

In-Fusion Snap Assembly EcoDry
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	638954	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	8 Rxns	￥1,745
Clontech	638955	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	32 Rxns	￥5,352
Clontech	638956	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	96 Rxns	￥12,295

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In-Fusion Snap Assembly EcoDry——用于无缝克隆的冻干型产品

In-Fusion Snap Assembly EcoDry 产品是预分装在铝封盖的试管或孔板中的即用型冻干品，可在室温下储存。在室温下稳定这一特点使其非常适合使用液体处理机器人进行高通量克隆。无论对于手动操作还是自动化平台来说，使用预分装的试剂就意味着最少的处理步骤——这能够避免污染、移液错误或试剂损失。而In-Fusion Snap Assembly EcoDry的产品功能则与液体型产品一样，通过一步操作即可将任意PCR 片段克隆到任意的线性化载体中，无需对 PCR 片段进行限制酶酶切连接及末端平滑化等处理。

产品特点

· 易用性强且一致性高——冻干、预分装的形式避免了操作错误和污染，促进高通量工作流程顺利开展
· 高效——对于50 bp～15 kb的插入片段，克隆效率可超过95%
· 无需亚克隆——将任意插入片段克隆到任何载体的任意位点，只需一次反应
· 无缝构建——最终构建体没有多余的碱基对（使用限制酶酶切或TA克隆经常出现这个问题）
· 应用的多功能性和灵活性——可进行单片段或多片段克隆，或者通过一步反应进行定点诱变

应用

· 高通量克隆
· 定向 cDNA 克隆
· 多片段克隆
· 定点诱变
· 基因合成
· 添加接头和蛋白质标签

产品详情请点击：

页面更新：2021-08-06 13:30:51