应用于微生物培养、发酵、生物制药生产

蛋白胨·蛋白水解物

Solabia Biotechnology是法国Solabia集团下负责研发并生产蛋白胨/蛋白水解物的蛋白胨部门，提供大包装的高质量产品。可作为食品和发酵产品的生产过程中提高微生物检测和疫苗等生物制药生产的细胞培养效率所必需的营养素来使用。富士胶片和光可提供40多种经Kosher或Halal认证的，植物、酵母、牛奶酪蛋白、动物来源的蛋白胨产品。

◆特点

●  动物源产品和无动物源产品分开生产

●  大量产品已取得Kosher/Halal 认证

●  彻底的可溯源性

◆氨基酸分布（mg/g）

◆增殖示例

培养液：10⁶ cfu/mL

生长培养基：3%蛋白胨+0.25%葡萄糖

应用于微生物培养、发酵、生物制药生产

蛋白胨 · 蛋白水解物

Solabia Biotechnology是法国Solabia集团下负责研发并生产蛋白胨/蛋白水解物的蛋白胨部门，提供大包装的高质量产品。可作为食品和发酵产品的生产过程中提高微生物检测和疫苗等生物制药生产的细胞培养效率所必需的营养素来使用。生产工厂在法国和巴西均设有多个基地，大幅度降低了缺货的风险，在COVID-19的影响下也能实现持续供应。富士胶片和光可提供40多种经Kosher或Halal认证的，植物、酵母、牛奶酪蛋白、动物来源的蛋白胨产品。

◆特点

●　动物源产品和无动物源产品分开生产

●　大量产品已取得Kosher/Halal 认证

●　彻底的可溯源性

●　常规包装为25 kg的大包装

●　设有多个生产基地，降低缺货风险

◆牛奶酪蛋白来源产品

▶ 分子量分布

▶ 增殖示例

Tryptone USP NZ对各种微生物表现出优异的生长促进作用，可用作通用底物。

培养液：10⁸ cfu/mL

生长培养基：3%蛋白胨+0.25%葡萄糖

◆酵母来源产品

▶ 分子量分布

▶ 增殖示例

酵母提取物（Yeast extract）对含酵母、霉菌等多种微生物表现出良好的生长促进作用。

广泛应用于诊断、发酵、细胞培养等。

培养液：10⁶ cfu/mL

生长培养基：3% 蛋白胨+0.25%葡萄糖

关于Solabia的业务形式

※ 富士胶片和光仅销售Diagnostics、Biotechnology的产品。

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

应用于微生物培养、发酵、生物制药生产

蛋白胨·蛋白水解物

Solabia Biotechnology是法国Solabia集团下负责研发并生产蛋白胨/蛋白水解物的蛋白胨部门，提供大包装的高质量产品。可作为食品和发酵产品的生产过程中提高微生物检测和疫苗等生物制药生产的细胞培养效率所必需的营养素来使用。富士胶片和光可提供40多种经Kosher或Halal认证的，植物、酵母、牛奶酪蛋白、动物来源的蛋白胨产品。

◆特点

●　动物源产品和无动物源产品分开生产

●　大量产品已取得Kosher/Halal 认证

●　彻底的可溯源性

◆产品列表（豌豆、羽扇豆来源）

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

泪液粘蛋白检测试剂盒

Tear Mucin Assay kit

　　本试剂盒的原理是在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在糖链还原末端标记荧光，根据荧光强度检测泪液中的粘蛋白含量。

◆背景

　　粘蛋白是泪液和眼表上皮顶端细胞膜的主要组分，由O-糖链结合核心蛋白而成。其中，核心蛋白是由10-80氨基酸残基，通过高度O-糖基化的丝氨酸和苏氨酸残基串联重复结构域而组成。，而具有亲水性质的O-聚糖占粘蛋白重量的一半以上（图1）。重糖基化的粘蛋白具有高负电荷和亲水性，该特性具有阻止病原体粘附或穿透进入上皮的功能（图2）。干眼病患者眼表面粘蛋白及其分泌均发生改变（图2）。在眼表上皮，存在三种类型的粘蛋白，由结膜杯状细胞表达的大凝胶形成的粘蛋白MUC5AC，一些来自泪腺腺泡的细胞表达小溶性粘蛋白MUC7，角膜和结膜上皮细胞表达膜相关粘蛋白MUC1,4和16（图2）。

　图1 粘蛋白的构造 

图2　围绕在角膜表面的粘蛋白表达以及泪液粘蛋白的屏障功能

图3 泪液粘蛋白的防护机能

　　泪液中粘蛋白的减少被认为是干眼症的病因。泪液中的粘蛋白可大致分为两大类，分别是分泌型粘蛋白以及膜型粘蛋白（图2）。分泌型粘蛋白包括MUC5AC（由结膜杯状细胞分泌）、MUC7（由泪腺分泌）；膜型粘蛋白包括MUC1、MUC4、MUC16（存在于角膜上皮的细胞膜上）等。

◆特点

● 　本试剂盒的原理是在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在糖链还原末端标记荧光，根据荧光强度检测

　　泪液中的粘蛋白含量。

● 　使用检测泪液量的泪液分泌试纸可检测泪液中粘蛋白的含量。
● 　可用于针对干眼症等眼部问题的药物及保健食品的研发以及眼科相关研究。

◆试剂盒组成

该试剂盒包含检测数目泪液黏蛋白所有组件

◆应用

　　用于测定泪液中粘蛋白含量。

◆测定原理

　　粘蛋白属于高分子（1000 kda-10000 kda）重糖基化蛋白家族，主要由富含苏氨酸与丝氨酸的核心蛋白组成。糖链N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）的还原末端与翻译后的O-糖基化氨基酸连接（图1）。在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在高温下糖链还原末端与2-氰基乙酰胺（2-CAN）反应产生强烈荧光缩合物，根据荧光强度检测泪液中的粘蛋白含量。

◆检测步骤

●　本产品专为荧光（96孔板）测量而设计。

●　使用荧光读板机可以测量100个样品。

●　使用分光光度计测量时，请使用微细胞。

样品制备

●　使用Schirmer氏泪液分泌条收集泪液5分钟。

●　储存泪液分泌条收集的泪液时，请放入微量试管中，并在4℃保存，同时避免冻结。

泪液粘蛋白的测定

1、将泪液分泌条转移至微量试管中，加入 200 μL 缓冲液洗脱，并在室温下提取粘蛋白１小时。

2、在步骤１的１小时内，准备空柱，并将空柱放入离心管中。搅拌凝胶浆液至均匀后，将 800 μL 凝胶浆液加入到空柱中，并在室温下以 800×g 

　  离心 10 分钟，（推荐使用具有摆动转子系统的离心机。）去除管中底部液体。

3、将步骤１用泪液分泌条提取的 50 μL 粘蛋白加入到步骤２凝胶的上部。

4、在室温下以 800×g 离心加有样品的柱子 10 分钟，并收集过滤的样品组分（约50 μL）。

5、将每次通过的组分（4）或标准溶液（①~⑧）的 20 μL 转移到另一个微量试管（500 μL）中。在试管中加入 24 μL 混合试剂（使用前，

　  将试剂Ａ和试剂Ｂ以 1：5 的体积混合）。混合后，将试管加热至100℃ 30分钟。

6、将试管冷却至室温后，加入 200 μL 终止溶液，并用涡旋混合器混匀。

7、将100 μL溶液放入96孔黑色孔板中，设置波长（荧光：336 nm，发射：383 nm）后用荧光读板机测量。

8、按照如下稀释浓度创建标准曲线。

　　构建校准曲线，并从标准曲线中读取样品浓度。

标准曲线：

参考数据：

建议测量 Ex 时使用 336 nm 波长，测量 Em 时使用 383 nm，但使用具有干涉滤光片系统的荧光板作为前导时，可能无法测量荧光波长，这种情况下，需将荧光波长调到较长数值。

相关产品信息请点击：粘蛋白检测试剂盒

参考文献

粘蛋白检测试剂盒

Mucin Assay Kit

——健康和美容研究试剂

◆背景

粘蛋白属于高度糖基化蛋白质家族，是粘膜的主要成分，例如唾液，泪液，胃液，肠液。粘蛋白的 基本构型是枝状糖链连接到多肽的大分子。糖链的非均质特性使其具有多样性，分子具有各种功能，如特异性分子识别。 　　一些糖链识别病毒和细菌的特定蛋白质。粘蛋白锚定在肠中粘膜屏障功能中，阻止病原体和毒素通过肠壁进入血管中。该试剂盒可用于检测粪便中的粘蛋白含量。 　　粘蛋白属于高分子（1000 kda-10000 kda）高度糖基化蛋白的家族。蛋白质核内的粘蛋白结构域富含苏氨酸、丝氨酸和羟脯氨酸，糖链的还原末端（GalNAc）通过翻译后Ｏ-糖基化与这些氨基酸频繁连接。该试剂盒具有确定粪便粘蛋白含量组分的功能。 　　粪便粘蛋白测定可用作肠屏障功能的指标。该试剂盒利用荧光检测来测定粘蛋白的含量。 　　我们提供的该试剂盒可以供研究功能性食物和感染的客户使用。

步骤１：从粪便中提取和部分纯化粘蛋白。

步骤２：粘蛋白Ｏ-糖苷连接的寡糖链的测定通过稀碱进行β-消除，形成糖链的还原端。还原碳水化合物在高温下进行荧光标记以产生荧光缩合

            物。

粘蛋白的结构

 ◆试剂盒组分

◆优点・特色

●  粘蛋白和 IgA 能阻止细菌和毒素的入侵

●  作为肠屏障的一部分，粘蛋白和 IgA 能防止病原菌和毒素通过肠壁转移到血管内。

测定理论
　　通过对粪便中的 β-葡萄糖苷酶热变性防止粪便粘蛋白降解
　　↓
　　粗提取粘蛋白
　　↓
　　用酶溶液分解淀粉
　　↓
　　用乙醇沉淀纯化粘蛋白
　　↓
　　将试剂Ａ加入纯化的粘蛋白中，并在碱性条件下进行热处理。 （试剂Ａ将与粘蛋白的糖还原末端反应，并在碱处理后发出荧光）
　　↓
　　加入缓冲液Ｃ并测定荧光强度（激发336nm，荧光383nm）

　　（具体操作请看相关资料）

◆案例・应用

喂食高脂肪食物的大鼠肠屏障部分注射多酚的效果

应用

　　用于测定粪便中的粘蛋白含量。

相关资料

Mucin_Assay_Kit.

◆操作步骤

●　本产品是专为荧光酶标仪测量设计（96孔板）。
●　当使用荧光读板机时，可测量100个样品。
●　当使用分光光度计测量时，请使用微细胞。

缓冲液Ａ的制备
用100 mL蒸馏水溶解1块片剂。
粪便粉末的制备：粪便冻干并在研钵中研磨，储存在-20℃备用。

II.粪便粘蛋白的测定
　　1、称量100 mg粪便粉末放入微量试管（2 mL）中，加入1 mL缓冲液A，然后用涡流混合器混合30秒钟。

　　2、在95℃下加热试管10分钟使细菌的糖苷酶变性。

　　3、在37℃下加热90分钟，从粪便中提取粘蛋白。

　　4、在4℃下离心20,000×g 15分钟。
　　5、将200 μL上清液转移到另一个微量试管中，加入200 μL缓冲液B，用涡流混合器混合溶液。

　　6、加入10 μL酶溶液混合，在50℃下加热试管20分钟分解淀粉。
　　7、将离心管冷却至室温，加入125 μL的99.5％乙醇，混合后，在-20℃下静置过夜。

　　8、次日，在4℃下20,000×g离心10分钟，去上清。向沉淀加入1mL缓冲液A，重溶沉淀。（样品溶液）

　　9、将20 μL样品溶液和标准溶液转移到另一个微量试管（500 μL）中，加入24 μL试剂混合物（使用前以1:5混合试剂A和试剂B），混合后， 100℃下加热微量试管30分钟。

　　10、冷却至室温，加入200 μL缓冲液C，用涡流混合器混合。

　　11、将100 μL溶液转移到96孔黑色孔板中，并在波长（例如：336 nm em：383 nm）实用荧光读板机测量荧光强度。
　　12、通过如下所示的连续稀释创建标准曲线。 通过这些点绘制平滑曲线以构建标准曲线。 通过标准曲线读取样品的浓度。
　　13、计算1 g粪便中的粘蛋白含量。步骤（12）测得的值的50倍是1g粪中的粘蛋白含量。

工作校准品：N-乙酰葡萄糖胺250 μg/ mL
●　通过连续稀释创建标准曲线，如下图所示。
●　剩余的未稀释校准品应储存在2-10°C。
●　稀释校准品稳定，可在2-10°C保存1个月。

参考文献

蛋白胨

多聚蛋白胨

HIPOLYPEPTON

◆概要

　　本品是牛奶酪蛋白经过酶降解后纯化、烘干而成的粉末，易溶于水，不溶于乙醇或乙醚。

◆标准值

◆应用

1） 本产品是收录于日本药典和生物制品标准，是无菌实验培养基的氮源的理想选择。另外可用于卫生检验方法中饮用水和食品卫生检查指标中

       的微生物检测用培养基

2） 因其含有大量色氨酸，用于吲哚生成实验能得到良好的实验结果。

3） 还可用于对酪蛋白酶降解产生蛋白胨来说必不可少的Dubos &Middlebrook的结核菌培养基，以及其他微生物的大量培养基。

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多聚蛋白胨 S

HIPOLYPEPTON S

◆概要

　　本产品是脱脂大豆经过酶降解后纯化、烘干而成的植物性蛋白胨粉末，易溶于水，不溶于乙醇或乙醚。

◆标准值

◆应用

1） 补充多聚蛋白胨（适用于日本药典酪蛋白制造的蛋白胨）性能时使用；

2） 广泛应用于微生物的培养，也适用于药用真菌、植物病原真菌、沙门氏菌、奈瑟氏菌、梭状芽孢杆菌等生长困难的细菌培养。

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多聚蛋白胨 N

HIPOLYPEPTON N

◆概要

　　本产品是大豆提纯产品经过微生物来源的酶降解后纯化、烘干而成的植物性蛋白胨粉末，其性能与多聚蛋白胨相同。

◆标准值

◆应用

非动物性蛋白胨，用途和多聚蛋白胨相同。

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多聚蛋白胨 NS

HIPOLYPEPTON NS

◆概要

　　本产品是使用微生物酶降解大豆提纯产品后纯化、烘干而成的植物性蛋白胨粉末。性能和多聚蛋白胨S相同。

◆标准值

◆应用

非动物性蛋白胨的用途和多聚蛋白胨S相同。

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高酪蛋白酸“DAIGO”

HICASAMONO ACIDS DAIGO

◆概要

　　本产品是牛奶酪蛋白的酸降解物。其中，蛋白质几乎均被分解成氨基酸，而且几乎不含蛋白质以外的营养源和生长因子。它可用作细菌生理学、遗传学等基础领域里使用的培养基的纯氮源，或作为定量维生素（特别是Ｂ12）培养基里的氮源。还可以像MH琼脂培养基等不适合酶消化蛋白胨使用的培养基作为营养源来使用。

◆标准值

蛋白胨和酵母粉

多聚蛋白胨

HIPOLYPEPTON

参考文献

1） 坂崎利一等：新细菌培养基学讲座 · 上（第2版）， 培养基素材 P115，1986. 近代出版

2） 生物制品标准：一般试验法、2004

3） 日本食品卫生协会：食品卫生检查方针、微生物篇、2004.

4） 水野伝一等：药局10（8），921,1959   

      蛋白胨、肉类提取物、琼脂

5） 水野伝一等：日本细菌学杂质15（1），114,1960

      培养基素材成分的各问题

6） R.J.Dubos et al：Am.Rev.Tuber.，56,334,1947

      Media for tubercle bacilli.

7） 外村健三等：日本发酵协会会刊21（4），129,1963

      米曲菌内的α-Amylase.（II）磷肽对α-Amylase脱离的促进作用

8） 山本昭夫等：日本细菌学杂质24（8），359,1969

      关于破伤风类毒素副作用的相关研究（I）

      培养基材料生成毒素的促进效果和过敏原性

多聚蛋白胨 S

HIPOLYPEPTON S

参考文献

1） 坂崎利一他：新细菌培养基学讲座 · 上（第2版），  培养基素材 P115，1986. 近代出版

高酪蛋白酸“DAIGO”

HICASAMONO ACIDS DAIGO

参考文献

1） 坂崎利一等：新细菌培养基学讲座 · 上（第2版），  培养基素材 P115，1986. 近代出版

无需预孵育！导入细胞质的蛋白转染试剂                

ProteoCarry ＜Protein Transfection Reagent＞

本产品是将蛋白以及葡聚糖等生物大分子导入细胞内，尤其是导入细胞质的试剂。传统的蛋白转染试剂存在蛋白滞留在内体或溶酶体中的问题，但是由于本产品可以高效地将蛋白运送至细胞质，可以广泛地适用于在评价导入蛋白的细胞内功能和抗体导入引起的功能抑制诱导等的实验。另外与传统产品不同的是，本品无需与蛋白进行预孵育，所以不会形成复合体，低限度地限制其对蛋白功能的影响。

※本产品仅供研究，研究以外请勿使用。

◆蛋白转染试剂及其问题

蛋白转染试剂（Proteofection试剂）是将重组蛋白和抗体直接导入细胞的工具。与将质粒导入以诱导表达目的蛋白的方法相比，可以更迅速地导入目的蛋白，因而受到了广泛地关注。

虽然已经开发了许多基于肽、阳离子的脂质或聚合物的蛋白转染试剂，但它们都是与蛋白形成复合物后，通过胞吞作用摄入细胞内，破坏内体膜将其运送至细胞质。然而，现有的大部分试剂内体膜的破坏活性低，并且从内体逃脱不足，导入的蛋白大部分都转移至溶酶体降解系统。本产品是一种新型肽蛋白转染试剂，克服了传统的蛋白转染试剂的缺点，通过强有力的内体膜选择性破坏活性，高效地向细胞质运送蛋白，使转导的蛋白在细胞内发挥活性。另外，与传统的蛋白转染试剂不同，本品无需与蛋白的复合物，不仅仅是蛋白，还可以向细胞质导入生物大分子（葡聚糖等）。

图1.　细胞导入原理的比较

图 2 是导入荧光标记 IgG 的案例。不添加转染试剂时，以内体/溶酶体的染色为主，从细胞质中无法获得荧光信号，与之相对的，可以观察到在本产品案例中，内体、细胞质被大面积染色。（详情请参照应用实例）

图 2.　向 HeLa 细胞导入荧光标记 IgG 的比较

◆特点

●　基于肽特性的蛋白转染试剂，显示出高度水溶性。

●　优异的内体膜破坏活性，与传统方法相比显示出高细胞质传达性。

●　无需与导入物质进行预孵育，可以简便且迅速地转染。

●　由于不会与蛋白形成复合物，所以需要添加浓度较高的蛋白，但是可以低限度地抑制对蛋白功能的影响。

●　只需要1小时的处理就可以充分地转染至细胞质。

●　有无血清（<10% FBS）不会影响导入效率，可以根据想要使用的细胞设计实验。

●　已有向细胞质导入各种蛋白及生物大分子的应用实例。

●　例：IgG 抗体、功能性蛋白（Cre recombinase, Saponin）、多糖（葡聚糖）

●　推荐使用浓度几乎没有细胞毒性。

◆使用方法概述

1.　向新鲜的培养基（无血清培养基，10% 以下含 FBS 培养基或 PBS）添加本产品以及想要导入的蛋白。（配制转染混合液）。

1.　※无需预孵育

2.　用 PBS 清洗 2 次细胞（80% 以下的融合状态）后，向细胞添加转染混合液。

3.　在转染混合液中培养细胞（~1 h）

4.　用 PBS 清洗 2 次细胞后，添加新鲜的培养基。

5.　实现各项应用。

◆试剂盒组成

●　ProteoCarry（4 mg）

●　FITC-dextran（2 mg，阳性对照用）

实验次数的预测

◆有导入数据的细胞

HeLa, SW280, COS7, NIH3T3, HUVEC

参考导入量

※导入效率根据细胞类型，细胞数量和蛋白类型各种因素改变。以上数据仅供参考，建议每次实验都要优化数据。

◆应用实例

1.　向细胞内导入FITC-dextran

向 HeLa 细胞导入 FITC-Dextran（培养基的终浓度为 200 μg/mL），仅向细胞添加 FITC-Dextran 时，（Reagent(-)）观察到点状的荧光信号，细胞质中几乎没有观察到信号；相反，使用本产品时扩散到了整个细胞质。

实验概要：

向 HeLa 细胞（80% confluent）添加 200 μg/mL FITC-dextran, 1×ProteoCarry in α-MEM，并培养 1 个小时。用 PBS 清洗细胞后，进行核染色（Hoechst）。

2.　向细胞内导入荧光标记 IgG

向 HeLa 细胞导入荧光标记 IgG 抗体（培养基终浓度为 250 μg/mL），仅有抗体添加至细胞时，可以观察到胞吞作用自发性摄入点状的荧光信号，表明抗体停留在内体和溶酶体中。另一方面，使用本产品时，不仅能观察到点状的内体结构，还可以观察到它主要在细胞质中广泛扩散。

※用荧光信号观察细胞扩散时，与内体相比，由于细胞质的体积较大，信号会被稀释。细胞质信号的检测需要添加高浓度的荧光标记蛋白，在本数据中添加了250 μg/mL的荧光标记 IgG。

实验概要：

向 HeLa 细胞（80% confluent）添加 250 μg/mL 荧光标记 IgG，1×ProteoCarry in α-MEM 并培养 1小时。用 PBS 清洗细胞后，进行核染色（Hoechst）。

3.　向细胞内导入 Cre recombinase

将设计为 Cre recombinase 不存在时表达 DsRed，只有在 Cre recombinase 存在时发生重组表达 GFP 的质粒向 HeLa 细胞导入基因。相对于导入第二天就表达 DsRed 的 HeLa 细胞，使用本产品导入 Cre recombinase（培养基终浓度为 10 μM），依赖导入细胞内的 Cre recombinase 表达 GFP，本产品在维持 Cre recombinase 的功能下将其导入了细胞。

实验概要：

向 HeLa 细胞转染质粒的第二天，向 HeLa 细胞添加 10 μM Cre recombinase，1×ProteoCarry in α-MEM，并培养 1 小时。用PBS清洗细胞后，用新的培养基再培养 24 小时。

◆保存

●　运输：室温

●　保存：-20℃