血管内皮细胞的分化诱导用粘连蛋白 iMatrix-411 iMatrix-411

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

血管内皮细胞的分化诱导用粘连蛋白 iMatrix-411                              iMatrix-411血管内皮细胞的分化诱导用

粘连蛋白 iMatrix-411



   利用 CHO-S 细胞生产的高纯度人层粘连蛋白 411-E8 片段产品。

● 将人层粘连蛋白 411-E8 片段基因导入 CHO-S 细胞生产的高纯度提取物。

● 把使用 iMatrix-511 培养的 iPS 细胞在 iMatrix-411 中培养,可以促进其向血管内皮细胞的分化诱导。

● 可进行无饲养层培养。


◆应用实例


  利用层粘连蛋白 411-E8 片段成功将 hiPS 细胞高效诱导为血管内皮细胞。

  京都大学 iPS 细胞研究所(CiRA)斋藤润准教授组和大阪大学蛋白质研究所关口清俊教授组共同开发了以层粘连蛋白 411-E8 片段为基础,高效率地从 iPS 细胞分化诱导功能正常的血管内皮细胞的方法。该成果刊载于英国科学杂志 Scientific Reports。

  Ohta R. et al. “Laminin-guided highly efficient endothelial commitment from human pluripotent stem cells” Scientific Reports 6, Article number: 35680 (2016)

 血管内皮细胞的分化诱导用粘连蛋白 iMatrix-411                              iMatrix-411

层粘连蛋白 411-E8 片段向血管内皮细胞的分化诱导



◆使用方法


1. 用 PBS(-)将 iMatrix-411 稀释至培养需要的使用浓度。推荐涂层浓度为 0.4 μg/cm2.

  ※由于细胞种类和细胞株的不同、使用的培养基种类不同,添加的最适剂量会有差异,初次使用时,

  按照 0.4 μg/cm2添加到培养容器中,逐渐调整至最佳使用浓度。

  ※※稀释时动作要迅速。使用试管等进行稀释时,推荐使用低蛋白吸附的实验容器。

  使用案例)以 6 孔板(9.6 cm2/well)为例,每孔加入 7.68 μL iMatrix-411 和 1.99 mL PBS(-)(1.92 μg/mL,2 mL/well)。

  包被完成后,尽快使用。

2. 使用 iMatrix-411 包被时,可按以下三种条件进行涂层处理:

  ①37℃ 1小时处理、②室温 3 小时处理、③ 4℃ 过夜处理。

3. 涂层处理完成后,去掉 iMatrix-411 溶液,在孔板未干燥状态下,迅速接种细胞。

  ※避免涂层处理后的培养器材干燥,以免影响培养效果。


◆产品列表


产品编号

生产商编号

产品名称

提纯原料

包装

384-13061

892 041

iMatrix-411

层黏连蛋白411

CHO-S细胞培养

上清

175 μg×2

380-13063

892 042

175 μg×6

※本产品仅供实验研究用。



 ◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

385-07361

iMatrix-511 溶液(0.5 mg/mL PBS)

层粘连蛋白 511,溶液(0.5 mg/mL)

175 µg × 2(350 µL× 2)

381-07363

175 µg × 6(350 µL× 6)

 

iMatrix-411


Q1. 产品是以什么样的状态销售的?

A1. 产品是以液态销售的。一支试管里密封装有 0.5 mg/mL 浓度的 175 μg 的细胞培养基质(层粘连蛋白 411-E8 片段)。

 


Q2. 产品的存储条件和有效期是什么?

A2. 产品的储存条件为,冷藏保存在 2-15°C。(推荐 4°C)

A2. 产品的有效期,请参考下表。

产品

保质期

iMatrix-411

生产后两年内

※    具体的有效期详见产品外包装。

 


Q3. 可以冷冻保存吗?

A3. 不可以冷冻保存。

 


Q4. 产品的纯度是多少?

A4. 纯度为 95% 以上。

 


Q5. hES/hiPS 细胞分化培养时使用什么培养基最好?

A5. 太田等的论文(Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016)中,分化诱导 iPS 细胞至血管内皮细胞时,使用了以下的培养基。

・Stempro34 SFM (Life Technologies)

高山等的论文(Biochemical and Biophysical Research Communications, 474(1), 91-96, 2016)中,分化诱导 iPS 细胞至胆管细胞时,使用了以下的培养基。

・ReproStem (REPROCELL)

 


Q6. 培养 iPS 细胞时,最佳的涂层浓度是多少?

A6. 最佳的涂层浓度根据细胞株的不同也会有所不同。

A6. 最初请从浓度 0.4 μg/cm2开始尝试,请根据您使用的细胞株在浓度 0.1~1.5 μg/ cm之间考虑。

 


Q7. 请教我使用 iMatrix-411 分化 iPS 细胞的步骤。

A7. 太田等的论文(Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016)中,有分化诱导 iPS 细胞至血管内皮细胞的案例,请酌情参考。

高山等的论文(Biochemical and Biophysical Research Communications, 474(1), 91-96, 2016)中,有分化诱导 iPS 细胞至胆管细胞的案例,请酌情参考。

 


Q8. 可以使用小鼠的 iPS 细胞吗?

A8. 由于没有小鼠 iPS 细胞的培养数据,所以无法回答。


 

Q9. 这个产品与基质胶有什么不同?

A9. 基质胶含有小鼠 EHS 肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。

A9. iMatrix-411 是将在 CHO-S 细胞中表达的层粘连蛋白 411-E8 片段高度纯化后的重组蛋白。

A9. 已知 iPS 细胞是通过细胞膜受体(特别是 α6β1整联蛋白)粘附于层粘连蛋白-411。

A9. 请参考太田等的论文(Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016)。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

细胞培养容器涂层剂层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源


  层粘连蛋白是大部分组织的基底膜主要成分,对基底膜的组成及功能起关键作用。层粘连蛋白的生物活性包括促进细胞的粘着、移动、增殖、轴突的生长和分化等等。用作细胞培养表面涂层,主要促进上皮细胞、神经细胞、肝细胞和肌肉细胞的细胞粘着。

 

产品概要


● 浓度:0.5mg/mL(首批产品实效)

● 组成:50mmol/l Tris-HCl(pH7.4), 150mmol/l NaCl

● 经过 0.2 um 滤器过滤灭菌

● -80℃ 保存(-20℃ 可稳定保存1年)



使用例


层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

 

  用 D-PBS(-) 将层粘连蛋白调制成各浓度,按 0.3mL/well 涂在 24 孔板的每个孔中,37℃ 条件下,培养过夜。洗出上清液,牛血清封闭后,种植 TIG-3 细胞(5×104个/mL),37℃ 培养 90 分钟。然后洗脱未粘着细胞,用胰蛋白酶 EDTA 溶液,剥离粘着细胞,测定细胞数量。

 

◆重要使用的细胞种类


● 上皮细胞

● 神经细胞

● 肝细胞

● 肌细胞


使用方法(例)


1.在4℃温度下或冰上缓慢溶解。

2.将 D-PBS(-) 或培养基稀释为目标浓度(5~30 ug/mL)。

3.将适量稀释好的层粘连蛋白溶液加入已涂层的容器中。

4.37℃ 条件下培养1小时,或4℃条件下培养过夜。

5.去除涂层溶液。

6.用 D-PBS(-) 清洗2~3次。

7.种植细胞。

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
120-05751 Laminin Solution, from Mouse EHS Tumor 1mg 细胞培养用

玻璃粘连蛋白(20-398aa),人,重组体,溶液

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

玻璃粘连蛋白(20-398aa),人,重组体,溶液玻璃粘连蛋白(20-398aa),人,重组体,溶液

细胞粘附蛋白

 

  玻璃粘连蛋白由478个氨基酸配列组成,是存在于血清和细胞外基质的糖蛋白。它与纤连蛋白、层连蛋白统称为细胞粘附蛋白。玻璃粘连蛋白除具有细胞粘附作用和伸展作用,还与补体系统、凝血系统相关的多功能蛋白质。

  本品是重组蛋白,除了信号域,由 20-398 氨基酸片段构成。可作为研究组织修复·再生等技能及细胞培养的基础。

 

◆参考数据:



 

玻璃粘连蛋白(20-398aa),人,重组体,溶液

  在涂层6孔板用本品培养对hiPS细胞做6个继代培养,通过未分化 Marker,确认hiPS细胞未分化性的维持。
  细胞:hiPS201B7株
  培养基:StemSure® hPSC MediumΔ(产品编号197-17571)+ 32 ng/mL bFGF(产品编号060-05383) 
 

 

 

◆产品概要


  含量: 90%以上(SDS-PAGE)
  表达: E. coli
  状态: 溶液
  浓度: 0.5 mg/mL
  组份: 20 mM Tris-HCl,pH 8.0(含 NaCl,KCl,EDTA,精氨酸,DTT和甘油)

 

相关产品

  不含动物来源的无血清培养基,可进行无饲养层细胞培养人多功能干细胞,StemSure® hPSC培养基Δ。



产品编号

品名

规格

容量

197-17571

StemSure® hPSC培养基 Δ

细胞培养用

100 mL

193-17573

100 mL×4

 



产品编号

品名

规格

容量

029-18061

BC2LCN Lectin, recombinant, Solution【AilecS1】

糖链研究用

1 mg

025-18063

1 mg×5

064-05381

bFGF, Human, recombinant, Animal-derived-free

细胞生物学用

50 μg

068-05384

100 μg

060-05383

1 mg

180-02991

rBC2LCN-FITC 【AilecS1-FITC】 
  未分化细胞检测用

细胞染色用

100 μL

186-02993

100 μL×5

257-00511

Y-27632

细胞生物学用

1 mg

253-00513

5 mg

251-00514

25 mg

253-00591

5 nmol/l Y-27632 Solution

细胞培养用

300 μL

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
220-02041 Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant, Solution 500μg 生化学用