突变 S Taq 酶 Taq Mut S

发表于2024年7月17日由上海金畔生物科技有限公司

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突变 S Taq 酶

Taq Mut S

◆原理

无

◆优点・特色

● Taq Mut S 是 DNA 修复系统的酶，可以识别错配碱基并且与之结合。

● Taq Mut S 来源于水生栖热菌，在０℃~70℃ 具有热稳定性，即便在高温也能保持活性并且和 DNA 结合。

● Taq Mut S 可以高效的结合１~４碱基的缺失（或者插入），以及 GT、CT 和 AG 的错配碱基对，因此可用于检测上述的突变。

利用这种特异性结合的活性，可用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析突变，也可以在固相上进行分析。

● 与常规基于 PCR 进行检测基因突变的方法，生物芯片检测，测序方法等相比，该方法简单，快速。

产品中包括 1 mL 10× Taq MutS 缓冲液。

来源	Thermus aquaticus
分子量（M.W）	89.3 kDa
浓度	1 μg/μL
保存条件	20 mM Tris-HCl(pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50%(v/v) 甘油
酶反应条件	100 mM KCl, 50 mM Tris-HCl(pH 8.5), 20 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 2% 甘油, 65℃

◆案例・应用

合成的 36 bp DNA 进行电泳。Lane 2~5 与 Lane 6~13 都与 Taq Mut S 发生特异性结合，但是结合的情况有差别。Lane 2~5 是 1~4 碱基缺失，Lane 6~13 是碱基错配。

突变 S Taq 酶 Taq Mut S

6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳， SYBR^® Gold 染色。

突变 S Taq 酶 Taq Mut S

结合测试：20 μL 反应液，65℃ 反应 30 分钟，0.5 μg 的本产品能够结合不少于 50%（36 bp 的合成 DNA 100 ng，该合成 DNA 有１个碱基缺失）

结合特异性检测：

● ３μg本产品和 0.5 μg 质粒 pBRa322 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测 oc-DNA 。

● ３μg本产品和 0.5 μg 质粒 λDNA 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测降解的 λDNA 。

● ３μg本产品和 2 μg 底物 RNA 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测降解的 RNA 。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级
316-04011	Taq Mut S 突变S Taq酶	50 μg	–

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

发表于2024年6月21日由上海金畔生物科技有限公司

产品特性
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参考文献

SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒

本产品是一步法RT-qPCR检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）Omicron毒株（B.1.1.529）中N区存在的特征性突变del31-33的试剂盒。del31-33 是指N区第31~33位中E、R 和 S三个氨基酸缺失的突变。Omicron毒株是在南非首次发现的变异株，在刺突蛋白中含有30多个突变。它比传统的变异株具有更高的传染性，因而被世界卫生组织（WHO）列为“关切变异株”（Variant of Concern；VOC）。

本产品针对的是突变位点少的N区突变，并非突变位点多的S区。因此引物探针不会与其他突变位点产生反应、干扰测试，即可特异性、高灵敏度检测Omicron。

经证实，本产品不与Alpha变异株、Beta变异株、Gamma变异株产生反应，只与Omicron毒株产生特异性反应。

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒【281-37703】

◆试剂盒组成

20 Reactions
RT 酶混合物（20×）	20 μL×1
一步反应混合物（2×）	200 μL×1
野生型引物＆探针混合物（Wild Type Primer & Probe Mixture）	10 μL×1
N del31-33突变型引物＆探针混合物（N del31-33 Mutant Type Primer & Probe Mixture）	10 μL×1

◆特点

●　容易判断

●　使用突变型和传统型的引物/探针套装时，可通过比较Ct值进行判断

●　一步法RT-qPCR法快速检测突变

●　约70 min 即可完成

●　使用独立研发的引物探针进行高灵敏突变检测

●　当与其他突变体检测试剂盒组合使用时，所有变异株均可于同一反应条件下在1块96孔板上进行检测

●　N501Y、E484K、L452R、E484Q、del247-253、N del31-33试剂盒的所有PCR反应条件相同，因此可在

●　1块96孔板上进行检测

◆检测原理

采用TaqMan^®探针的1-step RT-qPCR。

▼使用前
在病毒RNA量多的情况下，使用传统（非突变）型检测用的Wild Type Primer / Probe，也能在变异株中观察到扩增信号。请务必使用传统

（非突变）型检测用的Wild Type Primer/Probe 和突变型检测用的Mutant Type Primer/Probe两种进行检测。比较两种Ct值，若突变型检

测用Mutant Type Primer/Probe的Ct值较小，则判断该病毒为变异株。

◆实验案例

变异株检测的应用数据

用以下5种新型冠状病毒株的纯化RNA对本试剂盒进行测试：

●　Omicron毒株（B.1.1.529）：TY38-873P1，由日本国立传染病研究所提供

●　alpha毒株（B.1.1.7）：QHN001，N501Y突变，由日本国立传染病研究所提供

●　Beta毒株（B.1.351）：TY8-612，N501Y突变，E484K突变，由日本国立传染病研究所提供

●　gamma毒株（P.1）：TY7-501，N501Y突变，E484K突变，由日本国立传染病研究所提供

●　传统毒株（VR-1986HK）：从ATCC购买的热灭活新型冠状病毒株

样本拷贝数：5000拷贝/孔

循环数：45

① Omicron株（B.1.1.529）：TY38-873P1

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

Omicron毒株在N区含有del31-33突变，因此N del31-33 Mutant type Primer / Prob的扩增曲线（红色）比Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）更早起峰。

② alpha株（B.1.1.7）：QHN001

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

alpha毒株在N区中不含del31-33突变，因此Wild type Primer / Probe（蓝色）的扩增曲线比 N del31-33 Mutant type Primer / Probe（红色）的扩增曲线更早起峰。虽然alpha毒株与Omicron毒株均含有N501Y突变，但经确认本产品不与alpha毒株产生反应。

③ Beta株（B.1.351）：TY8-612

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

Beta毒株在N区中不含有del31-33突变，因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线（红色）更早起峰。虽然Beta毒株与Omicron毒株均含有N501Y突变，但经确认本产品不与Beta毒株产生反应。

④ gamma毒株（P.1）：TY7-501

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

gamma毒株在N区中不含del31-33，因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线更早起峰。虽然gamma毒株与Omicron毒株均有N501Y突变，但经确认本产品不与gamma毒株产生反应。

⑤ 传统毒株（VR-1986HK）：从ATCC购买的热灭活新型冠状病毒株

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

传统毒株在N区中不含del31-33突变，因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线（红色）更早起峰。

对照RNA的检测数据

使用本试剂盒测定合成Omicron菌株的对照ssRNA。

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

在不含N del31-33突变的对照ssRNA（Wild Type Control RNA）中，Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线（红色）更早起峰。

在含N del31-33突变的对照ssRNA（N del31-33 Mutant Type Control RNA）中，N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线（红色）比Wild type Primer / Probe的扩增曲线（蓝色）更早起峰。

PCR反应条件

将板置于qPCR仪板，按以下流程设定。

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

◆变异株一览表

变异株	N501Y突变	E484K突变	L452R突变	E484Q突变	del247-253突变	N del31-33突变
传统毒株	－	－	－	－	－	－
Alpha毒株（B.1.1.7）	＋	－	－	－	－	－
Beta毒株（B.1.351）	＋	＋	－	－	－	－
Gamma毒株（P.1）	＋	＋	－	－	－	－
Epsilon毒株（B.1.427/B.1.429）	－	－	＋	－	－	－
Kappa毒株（B.1.617.1）	－	－	＋	＋	－	－
Delta毒株（B.1.617.2）	－	－	＋	－	－	－
Lambda毒株（C.37）	－	－	－	－	＋	－
Omicron毒株（B.1.1.529）	＋	－^※	－	－^※	－	＋

※含E484A突变

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

FAQ

Q1：是否可以判断新型冠状病毒阳性/阴性？

A1：本试剂盒用于检测阳性样品中是否存在基因突变，不能判断为阳性/阴性。请使用SARS-CoV-2 RT-qPCR Detection Kit Ver. 2（产品编号：285-33801）进行阳性/阴性的判断。本试剂盒也可以与 RNA简易提取试剂SARS-CoV-2 Lysis Buffer Ver. 2（产品编号：281-34501）配合使用。

Q2：是否可以使用direct PCR 等RNA样本简易提取法进行检测？

A2：请使用RNA提取/纯化试剂盒纯化的RNA。

●　离心柱类型：ISOSPIN病毒RNA（产品编号：310-08931，Nippon Gene）

●　自动核酸提取仪：QuickGene-Auto 12S / 24S（仓敷纺织，另需QuickGene AutoS RNA Virus Kit，产品编号：633-50801）

Q3：试剂盒包装【20 Reactions】是指？

A3：【20 Reactions】指可以分开进行20孔的实时PCR。每个样品需要2个孔（如下），即10个样品。

①含有传统菌株Primer / probe的孔

②含有变异毒株Primer / probe的孔

Q4：试剂盒中是否包含病毒的阳性对照RNA？

A4：本试剂盒不含阳性对照。

Q5：当野生型和突变型的扩增曲线均起峰时，应如何进行判断？

A5：如果病毒量高，无论是变异株样品，还是野生株，都有可能在其引物/探针中观察到扩增信号。然而，在此情况下，变异株的扩增信号上升得更快（Ct值小）。请务必通过变异株和传统菌株用的两种引物和探针进行检测，以确定 Ct 值的差异。详情请参阅说明书中的“判断方法”。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级
281-37703	SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒	20 Reactions	–

突变克隆试剂盒酶试剂盒Takara

发表于2024年6月8日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

突变克隆试剂盒
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	638909	In-Fusion HD Cloning Plus	10 Rxns	￥3,788
Clontech	638910	In-Fusion HD Cloning Plus	50 Rxns	￥15,839
Clontech	638911	In-Fusion HD Cloning Plus	100 Rxns	￥27,272
Clontech	638912	In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus	8 Rxns	￥3,795
Clontech	638913	In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus	24 Rxns	￥9,573
Clontech	638915	In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus	96 Rxns	￥19,758
Clontech	638916	In-Fusion HD Cloning Plus CE	10 Rxns	￥4,232
Clontech	638917	In-Fusion HD Cloning Plus CE	50 Rxns	￥16,630
Clontech	638918	In-Fusion HD Cloning Plus CE	100 Rxns	￥26,058
Clontech	638920	In-Fusion HD Cloning Plus	96 Rxns	￥26,029
Clontech	638956	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	96 Rxns	￥12,295
Clontech	638955	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	32 Rxns	￥5,352
Clontech	638954	In-Fusion^® Snap Assembly EcoDry^™ Master Mix	8 Rxns	￥1,745
Clontech	638947	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	10 Rxns	￥1,155 ￥866
Clontech	638948	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	50 Rxns	￥5,204 ￥3,903
Clontech	638949	In-Fusion^® Snap Assembly Master Mix	250 Rxns	￥20,747 ￥15,560

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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使用In-Fusion Cloning Kits可以进行PCR方法的DNA定点突变。一个精简的反应流程，就可以完成增加、删除或替换DNA区段，插入点突变，插入限制性位点等实验。
In-Fusion方法通过设计引物将突变（碱基变化、删除、增加）引入。以环形质粒作为模板，通过反向PCR即可生成带有突变区域的线性载体。这个线性载体可以通过In-Fusion再进行环化。试剂盒已经附带了高效感受态细胞。

产品特点

· 高效突变：体外定点突变，效率≥90%。
· 多用途：一个体系，可以进行替换、增加或删除最多12个碱基。
· 更少步骤：一个PCR反应即可；无需纯化或PCR产物的体外消化；无需连接。
· 方便性：试剂盒已附带高效感受态细胞。

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页面更新：2021-11-09 12:06:42

随机突变试剂盒酶试剂盒Takara

发表于2024年5月31日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

随机突变试剂盒
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630703	Diversify PCR Random Mutagenesis Kit	30 Rxns	￥9,178

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Code No.	产品名称
630703	Diversify^™ PCR Random Mutagenesis Kit

Diversify PCR Random Mutagenesis Kit采用无毒方法可突变长度至多4.0 kb的序列。该试剂盒应用广泛，可用于所有的突变而不产生突变热点。

产品特点

· 可控的随机突变。可用于分析蛋白质功能
· 准确的控制突变率
· 无突变热点
· 获取所有的碱基替换

产品详情请点击：

页面更新：2019-11-05 11:35:31

基因编辑后突变检测酶试剂盒Takara

发表于2023年11月29日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

基因编辑后突变检测
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631443	Guide-it Mutation Detection Kit	100 Rxns	￥5,771 ￥4,617
Clontech	631448	Guide-it Mutation Detection Kit	25 Rxns	￥2,609 ￥2,087

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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			基因敲除
		↗		→	→
→	→
→	→		基因敲入
		↘

Guide-it^™突变检测试剂盒可以用于确认由CRISPR/Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所导入的基因突变。本试剂盒采用简单的PCR方法即可简便快速地检测出基因突变。性能卓越的 Terra^™ PCR Direct Polymerase Mix可直接以细胞为起始进行扩增，无需提取基因组DNA。扩增产物经过变性及退火处理后形成不完全匹配DNA，Guide-it解离酶会剪切错配DNA部分，之后通过琼脂糖凝胶电泳确认剪切产物。

■ 特点

· 识别哺乳动物细胞中插入或者缺失突变的简便方法
· 可直接以细胞为起始进行PCR扩增，与同类产品相比较更为快速有效
· 完整试剂盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有缓冲液
· 规格: 可提供100次和25次反应规格，25次反应规格可用于小规模基因编辑实验
· 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突变序列确认

■ 操作流程

■ 实验例

图1. 比较Guide-it和Surveyor方法。转染表达Cas9核酸酶的质粒和特异作用于AAVS1位点的sgRNA至293T细胞，转染48 hr 后收集细胞，将其与未经转染的细胞按照不同比例^*进行混合，分别进行突变导入检测。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix扩增含有AAVS1位点的目的片段并纯化其产物，之后分别采用Guide-it解离酶和Cel1酶（Surveyor assay）进行剪切。采用Guide-it解离酶剪切后条带清新易于识别，而Surveyor assay剪切后则显示明显的弥散，这样使得不容易测定突变效率并且低水平突变导入很难检测得到。^*泳道1-6 : 100％, 80％, 60％, 40％, 20％, 0％（转染细胞的比例）

■ 产品组份

	100 次（产品编号 631443）	25 次（产品编号 631448）
Extraction Buffer 1	5 ml × 4	5 ml
Extraction Buffer 2	2 ml	500 μl
Guide-it Resolvase	100 μl	25 μl
Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)	100 μl	25 μl
2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg²⁺, dNTP)	1 ml × 3	750 μl
PCR-Grade Water	1 ml × 5	1 ml

■ 保存

－20℃

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■ 关联资料

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突变 S Taq 酶 Taq Mut S

SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit

突变克隆试剂盒酶试剂盒Takara

随机突变试剂盒酶试剂盒Takara

基因编辑后突变检测酶试剂盒Takara

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