磷蛋白富集试剂盒酶试剂盒Takara

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磷蛋白富集试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635624 Phosphoprotein Enrichment Kit 6 Preps ¥4,262 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635666 Phosphoprotein Enrichment Starter Kit 1 Purification ¥956 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635626 Phosphoprotein Kit-Buffer A 500 ml ¥2,173 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
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Code No. 产品名称
635624   Phosphoprotein Enrichment Kit
635666   Phosphoprotein Enrichment Starter Kit
635626   Phosphoprotein Kit – Buffer A
 
■ 产品描述
本制品基于亲和原理,为从哺乳动物细胞和组织中提取磷酸化蛋白质提供了有效方法。富集试剂盒中包含了一整套的buffer和6个高结合力的柱子,用于富集胞质中和膜结合的磷酸化蛋白质,无需考虑例如丝氨酸、酪氨酸或苏氨酸等的氨基酸修饰。
 
这种富集方法的优势:
· 实验操作快速,从细胞到样品纯化的平均时间少于2 h。
· 操作简单直接,包括4步,将提取/上样buffer加到细胞或组织沉淀中来提取细胞总蛋白质,
   然后将提取产物加到亲和纯化柱上,洗涤,最后使用不含清洁剂的Elution Buffer将结合的磷酸化
   蛋白质洗脱下来。
 
磷蛋白富集试剂盒
 
· 一种Buffer多个用途,Extraction/Loading Buffer可以用于蛋白质提取和纯化步骤,
   而不需要更换缓冲液,这样便节省了时间也防止样品丢失。
· 实验过程是非变性的,所以整个过程中磷酸化蛋白质是保持折叠构象的,包括提取和洗脱的步骤。
 
每个纯化柱的最大结合能力约为4 mg磷酸化蛋白质。
 
高选择性富集磷酸化蛋白质
本富集试剂盒可以用于任何类型的哺乳动物细胞。已做过测试的细胞系包括NIH 3T3,HEK 293,HeLa,Cos-7和Jurkat细胞。富集效率很高,已经过Western Blotting分析证实。通过使用磷酸盐比色检测法,可以发现大部分的磷酸化蛋白质都在洗脱液中,在洗涤步骤的组分中只检测到痕量,可以忽略。
使用本试剂盒得到的磷酸化蛋白质是浓缩液,可以使用多种不同的方法进行分析,包括质谱、二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)等。
 
■ 特点
· 非变性条件下操作,可保持蛋白质的构象和溶解性
· 适用于质谱和2D-PAGE等多种下游应用
· 提高磷酸化检测实验的灵敏度
 
■ 应用
· 质谱样品制备
· 磷酸化分析
· 2D-PAGE样品制备
 
■ 实验例
磷蛋白富集试剂盒
使用本制品可以高效富集磷酸化蛋白质。提取HEK 293细胞的总蛋白质,取大约3 mg加入到本制品提供的磷酸化蛋白质亲和纯化柱上。Lane1是提取产物,Lane2是流穿液,Lane3是洗涤组分,Lane4是洗脱组分,然后分别使用特异性结合磷酸化AKT、PTEN和GSK3β蛋白质的抗体经Western Blotting检测,结果分别如图A、B、C所示,可以看出在洗脱液部分清晰地检测到了磷酸化蛋白质。请注意,样品在凝胶上样之前没有被稀释或浓缩。
 
 
产品详情请点击:磷蛋白富集试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-12 10:55:07

磷蛋白磁珠试剂盒酶试剂盒Takara

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磷蛋白磁珠试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635641 TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit Each ¥5,651 磷蛋白磁珠试剂盒 磷蛋白磁珠试剂盒 磷蛋白磁珠试剂盒
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Code No. 产品名称
635641   TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit
 
■ 产品描述
本产品结合了TALON-磷酸化蛋白质富集试剂盒的磷酸特异性和磁珠分离法的便利性,与磁力架搭配使用,可为从哺乳动物细胞和组织中提取mg量的磷酸化蛋白质提供了简单快速的基于金属亲和的方法。
 
分离胞质蛋白质和膜结合蛋白质
试剂盒中包含磷酸化蛋白质富集磁珠和一整套的buffer,能够对含有磷酸化氨基酸侧链(包括丝氨酸,酪氨酸或苏氨酸)的所有类型磷酸化蛋白质(包括细胞质蛋白质和膜结合蛋白质)进行组特异性富集。
 
提取/上样buffer中含有非离子型去污剂用于提取胞内蛋白质,洗涤buffer和洗脱buffer不含去污剂。如果需要,可以使用pH9.0的buffer洗脱磷酸化蛋白质,这对有些类型的下游应用更加合适。。
 
小体积洗脱液的微量蛋白质纯化
试剂盒中的磁珠是以5%悬液的形式提供的,已经证实每ml悬液可结合400 μg的α-酪蛋白。磁珠的用量需要根据起始样品的浓度进行调节,富集的磷酸化蛋白质可以通过小体积的洗脱液(50-200 μg)洗脱,以便获得较高浓度的产物。
 
对磷酸化蛋白质的高选择性
在细胞的所有蛋白质中,只有少部分蛋白质会被磷酸化,因此在进行研究之前对磷酸化蛋白质进行富集是非常有必要的。TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可用于任何种类的哺乳动物或组织样品,实际得到的磷酸化蛋白质的产量根据细胞系的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 用于微量磷酸化蛋白质纯化的金属亲和方法,操作简单
· 可以从任意种类的细胞或组织样品中简便快速的进行富集操作
· 非变性的实验条件维持了蛋白质的构象和溶解性
· 洗脱得到的产物是小体积应用的理想选择
 
■ 应用
提取和富集所有种类的磷酸化蛋白质
 
■ 实验例
磷蛋白磁珠试剂盒
使用TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可以高效富集磷酸化蛋白质。使用含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂(10 mM氟化钠)的提取/上样buffer从HEK 293细胞中提取蛋白质,然后与200 μl的磁珠混悬液室温混合30 min,洗涤、洗脱。将各组分电泳并使用对应的磷酸化蛋白质特异性抗体(图A是AKT (Ser 473),图B是P-AKT (Thr 308) ,图C是P-PTEN (Ser 380) ,图D是P-GSK3 beta (Ser 9))做Western Blotting检测,Lane1是提取产物,Lane2是流穿液,Lane3是洗脱液。图D的51 kDa条带是由于抗体与P-GSK3a交叉反应的结果。
 
 
产品详情请点击:磷蛋白磁珠试剂盒
 
 

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