Tet-On 3G系统-慢病毒酶试剂盒Takara

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Tet-On 3G系统-慢病毒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631187 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System Each ¥23,004 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631351 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (Bicistronic Version) Each ¥24,345 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631363 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha Version) Each ¥22,207 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631354 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha, Bicistronic) Each ¥23,453 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631353 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha, ZsGreen1) Each ¥23,453 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631352 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha, mCherry) Each ¥23,453 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631350 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (with ZsGreen1) Each ¥24,345 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
Clontech 631349 Lenti-X Tet-On 3G Inducible Expression System (with mCherry) Each ¥24,345 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒 Tet-On 3G系统-慢病毒
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病毒系统酶试剂盒Takara

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病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631074 Lenti-X ProteoTuner Shield System C Each ¥9,255 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632173 Lenti-X ProteoTuner Shield System N Each ¥9,255 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632175 Lenti-X ProteoTuner Shield System N (w/ ZsGreen1) Each ¥9,255 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632171 Retro-X ProteoTuner Shield System N Each ¥9,360 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632167 Retro-X ProteoTuner Shield System N (w/ ZsGreen1) Each ¥9,360 病毒系统 病毒系统 病毒系统
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■ 制品说明
ProteoTuner慢病毒和逆转录病毒系统可以通过快速改变蛋白质本身的丰度来直接研究特定目的蛋白质的功能。该系统利用配体依赖性去稳定结构域 (destabilization domain, DD)和Shield1配体,以一种可预测和剂量依赖的方式可逆地调节DD标签蛋白质的稳定性。在目的蛋白质上连接DD标签,通过在培养基中添加Shield1配体来迅速使DD融合蛋白质稳定下来。除了病毒载体外,ProteoTuner表达系统还有质粒载体可供选择。
病毒系统
图1 目标蛋白质的配体依赖性可逆稳定过程。去稳定结构域(DD;灰色)与目的蛋白质融合,具有膜通透性的小分子配体Shield1(黑色)与DD结合,保护DD融合蛋白质免受蛋白酶体降解。然而,如果移除Shield1,则会导致整个融合蛋白质的快速降解。ProteoTuner Shield Systems会默认降解DD标签蛋白质,除非有Shield1来稳定它。
 
■ 制品特点
1. 快速动力学:可以通过蛋白质水平在几分钟内的变化进行精细的功能分析
2. 精密调节:通过控制Shield1的剂量精密控制蛋白质水平
3. 可逆控制:从“protein on”到“protein off”,使基因功能研究更有说服力
4. 制品组分:每个试剂盒都包含一个质粒载体和一份Shield1
5. 搭配使用Retro-X Universal Packaging System,可用于逆转录病毒制备
6. 搭配使用Lenti-X Packaging Single Shots,可用于慢病毒制备
 
■ 制品应用
1. 通路中的蛋白质功能研究
2. 蛋白质复合物亚基的功能分析
3. 关键蛋白质的功能分析
 
■ 保存
-20℃
 
 
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HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒 乙型肝炎病毒特异性检测

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

乙型肝炎病毒特异性检测HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒


◆HBsAgGi HBs抗原的糖链异构体

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

本产品是针对M-HBs的O型糖链修饰的PreS2的单克隆抗体,可特异性识别含有DNA的传染性病毒颗粒。

 


关于乙肝肝炎病毒及HBsAgGi


乙型肝炎病毒(HBV)作为一个全球性的健康问题,是传染性最强的病毒之一。

HBV包膜蛋白由三种表面抗原S-、M-和L-HBs组成,它们由含有PreS1、PreS2和S-结构域的HBsAg基因产生1。 HBsAg被 N-聚糖和 O-聚糖高度糖基化2,3。全聚糖结构分析显示,PreS2结构域中,只有在M-HBs上含有基因型C (gC) 中所包含的高度保守的O-糖基化位点,而L-HBs上却没有4,5

HBsAgGi,是能与HBsAg的糖链异构体相结合的重组单抗,其使用含有O型糖链的PreS2糖肽制备所得。与传统的识别所有病毒颗粒的HBsAg检测相比,HBsAgGi抗体可以特异性识别传染性HBV颗粒(DNA病毒粒子)。

 

产品信息


HBsAgGi Recombinant mouse IgG1, 50μg

  产品编号

  635-54381

  对应基因分型

  Genotype C

  同种型(isotype)

  小鼠IgG1

  轻链

  Kappa(κ)   型

  包装

  50   μg

  用途
   

  1.WB
  2.HBV颗粒的免疫沉淀/分离
  3.ELISA
  4.HBV感染抑制测定
  5.免疫组化

  保存方法

  短期请保存于4℃,长期请保存于-20℃,避免冻融。

HBsAgGi可特异性识别HBV颗粒中的M-HBsAg

HBV由衣壳蛋白质(HBsAg),HBV核心,HBV DNA组成。HBsAg的基因由PreS1(蓝),PreS2(红),S(黑)三个领域组成。S-HBsAgs约一半都被N型糖链所修饰,其余不含糖链。而M-HBsAg的PreS2结构域被O型糖链高度修饰,但L-HBsAg在同一位点却几乎不会被修饰。S-HBsAg存在数量最多,非传染性颗粒大部分由S-HBsAg所构成。而传染性HBV颗粒内核含有HBV DNA,被由所有类型的HBsAg所形成的衣壳所包裹。HBsAgGi可特异性的识别在乙肝分型c型M-HbsAg中所特有的O型糖链修饰PreS2领域。


HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测



HBsAgGi与基于S抗体的HBV颗粒识别

HBV患者的血清中含有的HBV DNA的传染性颗粒比非传染性颗粒要多得多。抗S抗体会对包括非传染性颗粒在内的所有HBV颗粒进行识别,而相比之下,HBsAgGi由于是识别含有M-HBsAg的传染性HBV颗粒,因此HBsAgGi检测不同于S抗体检测,可更准确地识别HBV患者。

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

在HBV感染患者的血清中,大部分(超过99.9%)的HBV颗粒是亚病毒颗粒(SVP),主要是S-HBs。相比之下,感染性颗粒(DNA 病毒粒子)在整个 HBV颗粒中含量比例不到0.1%。HBsAgGi可以从众多HBV颗粒中,高效区分含DNA颗粒的糖肽结构(粉色标记)。

HBsAgGi 和其他检测HBV的标志物对比


下表对HBV标志物进行了对比。qHBsAg和HBV-DNA是传统标志物,而HBcrAg和 HBV-RNA是新型标志物。列于表中的是目标HBV颗粒或分子。〇代表标志物可检测的颗粒或分子,×代表无法识别此标志物,或不推荐使用。

HBsAgGi 可检测含有 M-HBsAg 的颗粒,例如 DNA 或 RNA 病毒粒子。

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

应用实例


使用 HBsAgGi(左)和 PreS2(右)抗体进行Western Blot


HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

  ・左: HBsAgGi-gC (RCA-001),右: anti-PreS2 antibody

  ・Lane1: S-HBs (CHO) 50 ng

  ・Lane2: M-HBs (HEK293) 50 ng

  ・Lane3: L-HBs (yeast) 50 ng

  ・Lane4: serum (HBV patient) 1 μg

  ・二抗: HRP-labeled anti-mouse IgG

HBsAgGi-gC(左)可以检测出M-HBs但不能检测L-HBs。而市售的PreS2抗体(右)对L-HBs的识别能力很强,对M-HBs的识别能力很弱。在HBV患者的人血清中,HBsAgGi-gC特异性识别M-HBs,而PreS2抗体识别M-HBs和L-HBs。

使用HBsAgGi-gC 包被的ELISA板 (RCEK-001) 和重组M-HBsAg 作为标准品进行ELISA法检测

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

  ・标准品: M-HBs (3.7 900 ng/mL)

  ・检测样品: HBV患者血清 (2 µL)

  ・血清 #1: HBsAg 6610 IU/mL, HBV DNA 3.1

  ・血清 #2: HBsAg 8612 IU/mL, HBV DNA 0

  ・血清 #3: HBsAg 36600 IU/mL, HBV DNA 8.3

  ・检测:生物素化 HBsAgGi-gC 抗体和 HRP 标记的链霉亲和素

ELISA板用HBsAgGi-gC包被,用HEK293细胞中表达的M-HBs制备标准曲线。HBV患者的血清(#1-3)经稀释(100 µL中含有2 µL血清)并在同一ELISA板上进行测量。HBsAgGi-gC也可以检测NUC处理后的血清样本(HBV DNA=0)。

使用 HBsAgGi-gC 进行免疫沉淀

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

  ・原始样品: HBV 患者血清 (4.1 logIU/20 μL)

  ・免疫沉淀条件:生物素化 HBsAgGi-gC (RCA-001) 2 μg,

 链霉亲和素偶联磁珠10 μL/1 mL TBS-T, 4°C, 16 hours

  ・HBV DNA 的定量:通过实时 PCR 检测20 μL 沉淀部分 

  ・(免疫沉淀) 和上清部分 (Sup) 中的 HBV DNA。

将HBV颗粒稀释至1 mL (4.1 logIU/20 μL) 并通过HBsAgGi-gC沉淀。在这种情况下,HBsAgGi-gC可以收集含有HBV DNA的HBV颗粒。

HBsAg糖链异构体检测用HBsAgGi ELISA试剂盒

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

本ELISA试剂盒含有可检测M-HBs的O型糖链糖基化修饰PreS2的单抗,可检测含有DNA的病毒颗粒。

试剂盒规格


  产品编号

  638-54371

  对应基因分型

  Genotype C

  包装

  96 Test

组成

  HBsAgGi 包被96孔板:96 孔 (8孔板×12)

  M-HBsAg标准品 (1 mL)

  HRP标记HBsAgGi (10 mL)

  稀释液 (24 mL)

  TMB底物 (11 mL)

  20X 洗涤液 (50 mL)

  终止液   (12 mL)

ELISA使用方法

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

步骤1:HBV DNA颗粒首先被HBsAgGi抗体捕获。

步骤2:洗涤后,ELISA微孔上捕获的HBV颗粒将与HRP标记的HBsAgGi抗体进一步反应。

步骤3:进一步洗涤后,将HRP底物(TMB底物)加入孔中。孵育后,停止反应并测量450nm处的吸光度数值。

标准曲线


将试剂盒中所包含的标准品 M-HbsAg(800ng/mL)梯度稀释,调整为标准M-HBsAg(6.25~400ng/mL)溶液,制作标准曲线。

HBsAgGi抗体 & HBsAgGi ELISA试剂盒                              乙型肝炎病毒特异性检测

使用HBsAgGi ELISA试剂盒进行血清中HBsAgGi检测

 

检测样本:HBV患者3名的血清(1 µL),每个样本分别进行6次实验

标准M-HBsAgs (6.25 – 400 ng/mL)

样品

qHBsAg (IU/mL)

HBsAgGi (µg/mL)

CV (%)

血清 #1

2100

4.5

2.52

血清 #2

8200

8.92

2.65

血清 #3

2200

11.04

1.82

参考文献


1. Schadler and Hildt (2009) Viruses 1:185-209.

2. Schmitt et al. (2004) J Gen Virol 85:2045-2053.

3. Dobrica et al. (2020) Cells 9:1404.

4. Wagatsuma et al. (2018) Anal Chem 90:10196-10203.

5. Angata et al. (2021) Biochim Biophys Acta Gen Subj.  1866:130020  全文


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
635-54381 HBsAgGi Recombinant mouse IgG1 50 μg
638-54371 HBsAgGi ELISA Kit 96 次用

COVID-19研究产品 共同应对全球健康危机

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

共同应对全球健康危机COVID-19研究产品                              共同应对全球健康危机

COVID-19研究产品

◆什么是冠状病毒?


  冠状病毒是可以在哺乳动物以及禽类体内生存与增殖的病毒家族。在人类体内,它们可以导致呼吸系统轻度至重度疾病。然而,用于预防或治疗冠状病毒感染的疫苗或特效药尚未上市。

  冠状病毒是一种基因组为单股正链的RNA病毒。在显微镜下观察传染源时,病毒颗粒的外部让人联想到出现在太阳周围的日冕或冠,而这些则来源于覆盖在病毒颗粒衣壳上的棍状蛋白。

  1960年代后期,该病毒在被感染鸡的细支气管以及人类体内首次发现,其表现症状则类似于普通感冒。冠状病毒家族的其他成员包括:出现于2003年的SARS-CoV、2004年的HCoV NL63、2005年的HKU1、2012年的MERS-CoV以及最近在2019年出现的SARS-CoV-2。



◆共同应对全球健康危机

COVID-19研究产品                              共同应对全球健康危机


  Enzo Biochem Inc在科学界具有独特的地位,主要是因我们通过医疗保健行业的临床实验室提供科学研究和检测服务的产品。自2020年3月9日起,Enzo临床实验室一直在接收用于COVID-19检测的样本。在3月23日,Enzo临床实验室通过在免下车快闪检测站为病患提供检测服务,向前迈进了一大步。这种快闪式样本收集帐篷主要是为经过医生预检的个人提供预约检测服务。我们十分高兴能与我们的地方以及州政府合作,共同为当地社区服务。


◆COVID-19研究工具


Enzo及其线上商店Axxora提供多种COVID-19解决方案


  随着每天感染率和死亡率的增加,这种新型感染是关系到所有人的全球健康风险。这种可在人与人之间传播的病毒由世界卫生组织正式命名为COVID-19,并且自2020年1月首次爆发以来一直在全球传播。它是冠状病毒家族中影响人类的第七种病毒,且异于MERS-CoV和SARS-CoV病毒。为了帮助疫苗研发以及中和其抗体,我们提供了高品质的呼吸道抗体、抗原和检测试剂盒组合,助您加速研究,为解决这一全球性问题出一份力。

  

  我们希望能尽自己的一份力量,通过为您的研究提供高达30%的折扣来帮助您应对这场全球医疗危机。


COVID-19检测


COVID-19 RT-qPCR分析方案


病毒RNA提取


产品编号

产品名称

规格

JBS-PP-223S

Viral RNA+DNA Preparation Kit, S pack

50 preparations

JBS-PP-223L

Viral RNA+DNA Preparation Kit, L pack

5×50 preparations



一步法RT-qPCR分析


  AMPIGENE® qPCR 1-Step Green Kit使用新研发的逆转录酶(RTase)技术以及能在单管中进行高效cDNA合成和qPCR的缓冲液。

  方便的单管反应

  热稳定且活性极高的RTase

  对于基于染料的qPCR应用:绿色染料不会干扰PCR

  优化的缓冲液系统可实现高效扩增

  增强剂和稳定剂可提高反应灵敏度和特异性


产品编号

产品名称

规格

ENZ-NUC108-1000

AMPIGENE® qPCR 1-Step Green Kit Lo-ROX
AmpiGene qPCR 1-步 绿色 试剂盒 Lo-ROX

1000 Reactions

ENZ-NUC108-0200

200 Reactions

ENZ-NUC109-1000

AMPIGENE® qPCR 1-Step Green Kit Hi-ROX
AmpiGene qPCR 1-步 绿色 试剂盒 Hi-ROX

1000 Reactions

ENZ-NUC109-0200

200 Reactions

ENZ-NUC110-1000

AMPIGENE® qPCR 1-Step Probe Kit Lo-ROX
AmpiGene qPCR 1-步 探针 试剂盒 Lo-ROX

1000 Reactions

ENZ-NUC110-0200

200 Reactions

ENZ-NUC111-1000

AMPIGENE® qPCR 1-Step Probe Kit Hi-ROX
AmpiGene qPCR 1-步 探针 试剂盒 Hi-ROX

1000 Reactions

ENZ-NUC111-0200

200 Reactions

ENZ-NUC112-1000

AMPIGENE® qPCR 1-Step Probe Kit No-ROX
AmpiGene qPCR 1-步 探针 试剂盒 No-ROX

1000 Reactions

ENZ-NUC112-0200

200 Reactions


COVID-19以及冠状病毒相关蛋白


  正确的抗原是任何免疫原性或血清学检测方法的关键。我们提供多种SARS-CoV-2抗原以及SARS-、MERS-CoV和其他冠状病毒抗原,以确定交叉反应性或开发泛冠状病毒检测方法。免疫原性条带试验(IST)或酶联免疫吸附测定(ELISA)中常用的SARS-CoV-2抗原是核衣壳蛋白(NP)和病毒包膜棘突蛋白的S1部分。


产品编号

产品名称

规格

ENZ-PRT282-0100

Coronavirus (COVID-19 NP) antigen (aa 2-419), (recombinant) (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT283-0100

Coronavirus (COVID-19 S1) antigen (aa 1-674), (recombinant)

100 µg

用于ELISA分析研发


  ELISA是一种常用的免疫测定方法,用于鉴定对某些感染条件所产生的抗体。在这里,我们重点介绍适合于研发的能够检测抗COVID-19抗体产生的ELISA检测方法的COVID-19和其他冠状病毒相关蛋白。


产品编号

产品名称

规格

ENZ-PRT282-0100

Coronavirus (COVID-19 NP) antigen (aa 2-419), (recombinant) (His-tag)

100 μg

ENZ-PRT283-0100

Coronavirus (COVID-19 S1) antigen (aa 1-674), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT284-0100

Coronavirus (COVID-19 S2) antigen (aa 685-1211), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT285-0100

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT286-0050

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT287-0100

Coronavirus (SARS-CoV matrix) antigen (aa 182-216), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT288-0050

Coronavirus (SARS-CoV membrane) antigen, (recombinant) (His-tag)

50 µg

ENZ-PRT289-0100

Coronavirus (CoV-NP 229E) antigen, (recombinant) (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT290-0100

Coronavirus (CoV-NP-NL63) antigen, (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT291-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, C-Terminus) antigen (aa 340-390), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT292-0020

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (His-tag), (recombinant)

20 μg

ENZ-PRT293-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49),   (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT294-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49, 192-220), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT295-0050

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (aa 340-390), (recombinant) (His-tag)

50 µg

ENZ-PRT296-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 18-725), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT297-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 56-295) (recombinant), (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT298-0100

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 12-53, 90-115, 171-203), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT299-0050

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 1-53, 90-115, 171-205), (recombinant) (His-tag)

50 µg

ENZ-PRT300-0050

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant) (His-tag)

50 µg

ENZ-PRT301-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT302-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2 C-Terminus) (aa 1051-1076) antigen, (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT303-0050

Coronavirus (SARS-CoV S) antigen (aa 20-210), (recombinant) (His-tag)

50 µg

ENZ-PRT304-1000

Canine coronavirus antigen, (native)

1 mg



ELISA研发相关产品


产品编号

产品名称

规格

ADI-80-0075

pNpp substrate, (20 ml)
pNpp底物(20 ml)

20 mL

ADI-80-0076

pNpp substrate, (100 ml)
pNpp 底物, (100 ml)

100 mL

ADI-80-0247

Stop solution, (5 ml)

5 mL

ADI-80-0248

Stop solution, (27 ml)

27 mL

ADI-80-0350

TMB substrate, (10 ml)
TMB 底物, (10 ml)

10 mL

ADI-80-0377

Stop solution 2, (10 ml)

10 mL

ADI-80-1804

Stop solution 2, (50 ml)

50 mL

ADI-80-1805

TMB substrate, (50 ml)
TMB底物

50 mL

ADI-80-1928

BSA solution (10%), (50 ml)
牛血清白蛋白溶液 (10%), (50 ml)

50 mL

ICT-62

Neptune™ Block ELISA Blocking Buffer

100 mL

ICT-63

500 mL

ICT-64

1 L

ICT-632

General Blocker Blocking Buffer

100 mL

ICT-633

500 mL

ICT-641

SynBlock™ ELISA Blocking Buffer

100 mL

ICT-642

500 mL

ICT-643

1 L

ICT-644

Antibody Coating Buffer, 5X

100 mL

ICT-645

500 mL

ICT-646

1 L

ICT-957

Blocking Buffer Optimization Pack: 100mL of BB1, BB2, BB3

1 Pack

ICT-6247

Antigen Coating Buffer, 5X

100 mL

ICT-6248

500 mL

ICT-646

1 L

ICT-6262

Phosph-Free Blocking Buffer, Synthetic

100 mL

ICT-6263

500 mL

ICT-6264

1 L

ICT-6295

Monster Block™ ELISA Blocking Buffer, Non-Mammalian

100 mL

ICT-6297

1 L

ICT-6299

Alternative Block™ ELISA Blocking Buffer, Synthetic

100 mL

ICT-6301

1 L



COVID-19表征


  COVID-19病毒的表征对于研发有效疗法而言至关重要。我们提供了一系列产品,包括抗体、抗原和许多其他产品,这些产品被怀疑在冠状病毒家族病毒颗粒的发病机理中起着关键作用,或者可能是其引起疾病的治疗兴趣靶标。


冠状病毒抗体


冠状病毒(COVID-19、MERS & SARS-CoV NP)单克隆抗体


  由于其相对丰度,冠状病毒核衣壳蛋白(NP)是病毒表征的有效靶标。它通过拮抗干扰素γ逃避宿主免疫的作用使其成为冠状病毒生物学中的关键角色。我们的pan-CoV抗体可检测三种致病性的人类冠状病毒的核衣壳,因此是您进行对比研究的理想工具。


产品编号

产品名称

规格

ENZ-ABS804-0050

Coronavirus (SARS-CoV E2) monoclonal antibody

50 μg

ENZ-ABS805-0050

Coronavirus (SARS-CoV Membrane) monoclonal antibody

50 μg

ENZ-ABS806-1000

Coronavirus (COVID-19, MERS & SARS-CoV NP) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS807-1000

Coronavirus (COVID-19 & SARS-CoV NP) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS808-1000

Coronavirus (MERS-CoV S1) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS809-1000

Canine coronavirus monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS810-1000

Canine coronavirus polyclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS811-1000

Feline coronavirus monoclonal antibody

1 mg

ECB-HM1054-1

Coronavirus (SARS-CoV NP) Antibody

1 mg

PSC-3525-C020

Polyclonal Antibody to SARS Spike (CT)

20 μg

PSC-3525-C100

100 μg

PSC-3531-C020

Polyclonal Antibody to SARS E (NT)

20 μg

PSC-3531-C100

100 μg

PSC-35-579-C100

SARS Coronavirus monoclonal antibody [3851]

100 μg

PSC-35-580-C100

SARS Coronavirus monoclonal antibody [3861]

100 μg



COVID-19和冠状病毒相关蛋白


冠状病毒研究中的常用抗原


产品编号

产品名称

规格

ENZ-PRT304-1000

Canine coronavirus antigen, (native)

1 mg

ENZ-PRT282-0100

Coronavirus (COVID-19 NP) antigen (aa 2-419), (recombinant) (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT283-0100

Coronavirus (COVID-19 S1) antigen (aa 1-674), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT284-0100

Coronavirus (COVID-19 S2) antigen (aa 685-1211), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT289-0100

Coronavirus (CoV-NP 229E) antigen, (recombinant) (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT290-0100

Coronavirus (CoV-NP-NL63) antigen, (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT296-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 18-725), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT297-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 56-295) (recombinant), (His-tag)

100 µg

ENZ-PRT285-0100

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT286-0050

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT287-0100

Coronavirus (SARS-CoV matrix) antigen (aa 182-216), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT288-0050

Coronavirus (SARS-CoV membrane) antigen, (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT295-0050

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (aa 340-390), (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT292-0020

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (His-tag), (recombinant)

20 μg

ENZ-PRT291-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, C-Terminus) antigen (aa 340-390), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT293-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49),   (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT294-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49, 192-220), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT303-0050

Coronavirus (SARS-CoV S) antigen (aa 20-210), (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT298-0100

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 12-53, 90-115, 171-203), (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT299-0050

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 1-53, 90-115, 171-205), (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT302-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2 C-Terminus) (aa 1051-1076) antigen, (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT301-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant)

100 µg

ENZ-PRT300-0050

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant) (His-tag)

50 μg



冠状病毒生物学相关产品


SARS-CoV病毒的进入激活剂


产品编号

产品名称

规格

AFR-YF-PA15064

anti-TMPRSS2

50 μg

AFR-YF-MA15912

Anti-TMPRSS2 (2F4)

100 μg

FGX-TMPRSS2-201AP

TMPRSS2 Antibody

100 µg

PSC-62-863-R400

TMPRSS2 Antibody

400 μL

FGX-TMPRSS2-BIOTIN

TMPRSS2 Antibody BIOTIN

100 µg

FGX-TMPRSS2-FITC

TMPRSS2 Antibody FITC

100 µg

PSC-46-908-C100

TMPRSS2 polyclonal antibody

100 µg



血管紧张素生物学产品


产品编号

产品名称

规格

BML-SA462-0100

ACE1 (human) (CT) polyclonal antibody
ACE1 (人) (C末端), 多抗

100 μg

BML-SA461-0100

ACE1 (human) (NT) polyclonal antibody
ACE1 (人) (N末端), 多抗

100 μg

BML-SA608-0050

AT1 receptor (extracellular) polyclonal antibody
AT1 受体 (胞外), 多抗

50 μL



可切割SARS-CoV细胞表面受体ACE2


产品编号

产品名称

规格

ADI-905-249-100

ADAM17 (CT) polyclonal antibody
ADAM17 (C末端), 多抗

100 μg



监测网格蛋白介导的病毒进入


产品编号

产品名称

规格

AFR-YF-MA12485

Anti-Clathrin heavy chain (2E5)

100 μg

AFR-YF-PA10999

anti-Clathrin light chain

50 μL

AFR-YF-PA11000

50 μg

AFR-YF-PA11001

100 μL

AFR-YF-PA11002

100 μg

AFR-YF-MA12484

Anti-Clathrin light chain (4D5)

100 μg

AFR-YF-MA12483

Anti-Clathrin light chain (4E9)

100 μg

CVL-PAB76216

AP2A1 / AP2-α (aa706-727) antibody

50 μg

PSC-43-204-C100

AP2A1 polyclonal antibody

100 μg

PSC-30-885-R100

AP2B1 polyclonal antibody

100 μL

AFR-LF-MA10063

Clathrin light chain, mAb (4B12-1E3)

100 μg

EXB-11-256-C025

Monoclonal Antibody to Heavy Neurofilament Protein (NF-1)   (Purified)

25 μg

EXB-11-256-C100

100 μg

CVL-PAB72344

PICALM (N-Terminus) antibody

50 μg

PSC-5553-C020

PICALM polyclonal antibody

20 μg

PSC-5553-C100

100 μg



监测T细胞衰竭


产品编号

产品名称

规格

ALX-805-053-C100

CD4 (human) monoclonal antibody (MEM-115)
CD4 (人), 单抗 (MEM-115)

100 μg

ENZ-ABS442-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (13B8.2) (Mouse IgG1κ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(13B8.2)(小鼠IgG1κ)

200 µg

ENZ-ABS441-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (13B8.2) (Rabbit IgGκ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(13B8.2)(兔IgGκ)

200 µg

ENZ-ABS440-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (CE9.1) (Human IgG4λ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(CE9.1)(人IgG4λ)

200 µg

ENZ-ABS439-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (CE9.1) (Rabbit IgGλ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(CE9.1)(兔IgGλ)

200 µg

ENZ-ABS444-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (MT310) (Mouse IgG1κ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(MT310)(小鼠IgG1κ)

200 µg

ENZ-ABS443-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (MT310) (Rabbit IgGκ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(MT310)(兔IgGκ)

200 µg

ENZ-ABS430-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (YNB46.1.8) (Rabbit   IgGκ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(YNB46.1.8)(兔IgGκ)

200 µg

ENZ-ABS446-0200

CD4 Recombinant monoclonal antibody (YNB46.1.8) (Rat IgG1κ)
白细胞分化抗原4重组单克隆抗体(YNB46.1.8)(大鼠IgG1κ)

200 µg

ENZ-ABS632-0200

CD8 β Recombinant monoclonal antibody (YTS 156.7.7) (Rabbit   IgGκ)
白细胞分化抗原8β重组单克隆抗体(YTS156.7.7)(兔IgGκ)

200 µg

ENZ-ABS456-0200

CD8α Recombinant monoclonal antibody (YTS 105.18) (Rabbit   IgGκ)
白细胞分化抗原8α重组单克隆抗体(YTS105.18)(兔IgGκ)

200 µg

ENZ-ABS457-0200

CD8α Recombinant monoclonal antibody (YTS 105.18) (Rat   IgG2aκ)
白细胞分化抗原8α重组单克隆抗体(YTS105.18)(大鼠IgG2aκ)

200 µg

ENZ-ABS631-0200

CD8 β Recombinant monoclonal antibody (YTS 156.7.7) (Rat   IgG2bκ)
白细胞分化抗原8β重组单克隆抗体(YTS156.7.7)(大鼠IgG2bκ)

200 µg

ENZ-ABS737-0100

PD-1 monoclonal antibody (4F12)
PD-1单克隆抗体(4F12)

100 µL

ENZ-ABS348-0100

PD-1 Recombinant monoclonal antibody (PDCD1/1410R)
PD-1重组单克隆抗体(PDCD1 / 1410R)

100 μg

ENZ-ABS796-0200

PD-1 Recombinant monoclonal antibody (RMP1-14) 

PD-1 重组单克隆抗体 (RMP1-14)

200 µg

ENZ-ABS337-0100

PD-1 Recombinant monoclonal antibody (RMPD1-1)
PD-1重组单克隆抗体(RMPD1-1)

100 μg

ENZ-ABS702-0100

TIM-3 monoclonal antibody (1B10)
TIM-3单克隆抗体(1B10)

100 μg

ENZ-ABS342-0100

TNF-α Recombinant monoclonal antibody (RMTNFA-1)
TNF-α重组单克隆抗体(RMTNFA-1)

100 μg



监测病毒粒子的内吞/裂解


产品编号

产品名称

规格

ENZ-KIT175-0200

CYTO-ID® Autophagy detection kit 2.0
Cyto-ID细胞自噬检测试剂盒 2.0

200 tests

ENZ-KIT175-0050

50 tests

MM-P08962-MSM8-ABX

CD63 monoclonal antibody (LAMP3/2788) without BSA&Azide

100 μg

MM-P08962-MSM8-P1

CD63 monoclonal antibody (LAMP3/2788) with BSA&Azide

100 μg

ADI-VAM-EN003-F

LAMP2 monoclonal antibody (GL2A7)
LAMP2, 单抗 (GL2A7)

200 µL

ADI-VAM-EN003-D

50 µL

ADI-905-723-100

LAMP2 polyclonal antibody
LAMP2多抗

100 μg

ALX-210-206-R100

Lysosome-associated membrane protein-2 polyclonal antibody
溶酶体相关膜蛋白-2, 多抗

100 µL



病毒细胞毒性检测


LYSO-ID® Red cytotoxicity kit (GFP-CERTIFIED®)


  内体-溶酶体途径是病毒进入宿主细胞的关键因素。另外,病毒体的溶酶体清除被怀疑是针对冠状病毒的主要细胞内防御机制之一。我们的LYSO-ID® Red cytotoxicity kit (GFP-CERTIFIED®)是在荧光实时显微镜中研究溶酶体过程和病毒生物学的理想工具。


产品编号

产品名称

规格

ALX-850-039-KI02

Cell Counting Kit-8
细胞计数试剂盒-8

5×500 tests

ALX-850-039-KI01

500 tests

ALX-850-039-0100

100 tests

ALX-850-245-KI02

Cell Counting Kit-F
细胞计数试剂盒-F

5×500 tests

ALX-850-245-KI01

500 tests

ENZ-51015-KP002

LYSO-ID® Red cytotoxicity kit (GFP-CERTIFIED®)
溶酶体细胞毒理检测试剂盒(红色荧光)(绿色细胞系)(微孔板)

1 Kit

ENZ-KIT157-2500

LDH Cytotoxicity WST Assay
乳酸脱氢酶细胞毒性WST测定

5×500 tests

ENZ-KIT157-0500

500 tests



培养基-用于气道细胞培养的无血清培养基


产品编号

产品名称

规格

AES-0451

BEGM Medium

500 mL

AES-0402

BRFF-EPM2™
BRFF-EPM2™无血清培养基

500 mL

AES-0450

VALI Medium

500 mL


COVID-19治疗学的发展


  寻找COVID-19病毒的治疗方法是全球科学界的重任。无论您打算如何应对这一挑战,我们都会提供产品来支持您在疫苗研发、免疫疗法和药物发现方面的研究。


COVID-19和冠状病毒相关蛋白


冠状病毒 (COVID-19 S1) 抗原 (aa 1-674), (重组)


  SARS-CoV-2的棘突蛋白(S)是病毒颗粒外部最突出的结构,也是疫苗接种研究和阻断病毒进入的非常有希望的靶标。棘突蛋白负责与ACE2宿主受体结合,使病毒进入细胞。棘突蛋白与ACE2的相互作用被认为是通过受体结合域(aa〜450-510)中的关键残基发生的。


产品编号

产品名称

规格

ENZ-PRT283-0100

Coronavirus (COVID-19 S1) antigen (aa 1-674), (recombinant)
冠状病毒 (COVID-19 S1) 抗原 (aa 1-674), (重组)

100 μg



疫苗研发


  无论您是在宿主免疫和疫苗效力研究中寻找候选抗原、病毒阻断肽的开发、研究蛋白与蛋白的相互作用,还是需要阳性对照,可靠而强大的抗原都是您研究的关键。Enzo提供多种冠状病毒抗原任君选择。


产品编号

产品名称

规格

ENZ-PRT304-1000

Canine coronavirus antigen, (native)

1 mg

ENZ-PRT283-0100

Coronavirus (COVID-19 S1) antigen (aa 1-674), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT284-0100

Coronavirus (COVID-19 S2) antigen (aa 685-1211), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT289-0100

Coronavirus (CoV-NP 229E) antigen, (recombinant) (His-tag)

100 μg

ENZ-PRT290-0100

Coronavirus (CoV-NP-NL63) antigen, (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT296-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 18-725), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT297-0100

Coronavirus (MERS-CoV S1) antigen (aa 56-295) (recombinant),   (His-tag)

100 μg

ENZ-PRT285-0100

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT286-0050

Coronavirus (SARS-CoV ENV) antigen (aa 1-76), (recombinant)   (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT287-0100

Coronavirus (SARS-CoV matrix) antigen (aa 182-216), (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT288-0050

Coronavirus (SARS-CoV membrane) antigen, (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT295-0050

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (aa 340-390), (recombinant)   (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT292-0020

Coronavirus (SARS-CoV NP) antigen (His-tag), (recombinant)

20 μg

ENZ-PRT291-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, C-Terminus) antigen (aa 340-390),   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT293-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49),   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT294-0100

Coronavirus (SARS-CoV NP, N-terminus) antigen (aa 1-49, 192-220),   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT303-0050

Coronavirus (SARS-CoV S) antigen (aa 20-210), (recombinant)   (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT298-0100

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 12-53, 90-115, 171-203),   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT299-0050

Coronavirus (SARS-CoV S1) antigen (aa 1-53, 90-115, 171-205),   (recombinant) (His-tag)

50 μg

ENZ-PRT302-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2 C-Terminus) (aa 1051-1076) antigen,   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT301-0100

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant)

100 μg

ENZ-PRT300-0050

Coronavirus (SARS-CoV S2) antigen (aa 408-470, 540-573),   (recombinant) (His-tag)

50 μg



冠状病毒抗体


免疫疗法研究


产品编号

产品名称

规格

ENZ-ABS804-0050

Coronavirus (SARS-CoV E2) monoclonal antibody

50 μg

ENZ-ABS805-0050

Coronavirus (SARS-CoV Membrane) monoclonal antibody

50 μg

ENZ-ABS806-1000

Coronavirus (COVID-19, MERS & SARS-CoV NP) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS807-1000

Coronavirus (COVID-19 & SARS-CoV NP) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS808-1000

Coronavirus (MERS-CoV S1) monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS809-1000

Canine coronavirus monoclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS810-1000

Canine coronavirus polyclonal antibody

1 mg

ENZ-ABS811-1000

Feline coronavirus monoclonal antibody

1 mg

ECB-HM1054-1

Coronavirus (SARS-CoV NP) Antibody

1 mg

PSC-3525-C020

Polyclonal Antibody to SARS Spike (CT)

20 μg

PSC-3525-C100

100 μg

PSC-3531-C020

Polyclonal Antibody to SARS E (NT)

20 μg

PSC-3531-C100

100 μg

PSC-35-579-C100

SARS Coronavirus monoclonal antibody [3851]

100 μg

PSC-35-580-C100

SARS Coronavirus monoclonal antibody [3861]

100 μg



药物研发


SCREEN-WELL® FDA 认证化合物库V2


  通过独特的、适用于各种靶标且已知安全性和生物利用度的化合物集合来加速药物优化。

●  与我们以前的FDA认证的化合物库相比,增加了100多种其他化合物。

  具有100%已知的生物活性和较高程度的药物相似性

  另外包括最近获得FDA认证的化合物

  我们在附赠文件中为每种化合物提供了详细信息

  药物的重新定位或改变用途可能是任何药物发现计划的重要组成部分,从而研发出一些重磅药物(例如Viagra和Rogaine)。高通量的筛查、新的生物标志物和非侵入性成像技术为寻求认证化合物的新适应症创造了新机会。获得FDA认证且在临床中使用,SCREEN-WELL® FDA 认证化合物库的所有化合物均为已知,皆具有良好特征的生物活性、安全性和生物利用度,可显著加速药物开发和优化的特性。该库还避免了在类似库中发现的无关化合物,例如除草剂、杀虫剂、防晒剂和细胞毒性剂。这套产品提供了丰富的生物活性来源,而且具有较高程度的药物相似性。该套装中的精选化合物将在所有药物优化程序中为您提供重要的开端。包含的许多化合物也可以作为独立化合物提供,以进行进一步测试。


产品编号

产品名称

规格

BML-2843-0100

SCREEN-WELL® FDA approved drug library V2
Screen-Well FDA 批准药物 化合物库 V2

1 Library


ADAM17 荧光法 药物筛选试剂盒


  解整合素金属蛋白酶17(ADAM17),亦称为TNF-α转换酶(TACE),在主要SARS-CoV受体、血管紧张素转换酶2(ACE2)的脱落和调节病毒进入中起着重要作用。我们的ADAM17 荧光法药物筛选试剂盒非常适合分析ADAM17酶活性的药理学调节。


产品编号

产品名称

规格

BML-AK310-0001

ADAM17 fluorometric drug discovery kit
ADAM17 荧光法 药物筛选试剂盒

96 wells



药物筛选检测


产品编号

产品名称

规格

ADI-EKS-420A

PKC kinase activity kit
    蛋白激酶C活性检测试剂盒

96 wells

BML-AK310-0001

ADAM17 fluorometric drug discovery kit
ADAM17 荧光法 药物筛选试剂盒

96 wells

BV-K227-100

Angiotensin I Converting Enzyme Activity (ACE1) Assay Kit   (Fluorometric)

100 assays

BV-K310-100

Angiotensin II Converting Enzyme (ACE2) Inhibitor Screening Kit

100 assays

BV-K2001-100

ACE1 Colorimetric Activity Assay Kit

100 assays

ADI-900-203

Angiotensin I ELISA kit
血管紧张素 I ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-204

Angiotensin II ELISA kit
血管紧张素Ⅱ酶联免疫试剂盒

96 wells

BML-P126-0001

OMNIMMP® fluorogenic substrate
Omni金属基质蛋白酶 荧光 底物

1 mg

BML-P132-0500

TACE substrate (fluorogenic)
TACE 底物 (荧光)

0.5 mg

BML-P161-0001

Abz-FRK(Dnp)-P
Abz-FRK(Dnp)-P

1 mg

BML-P162-0001

Abz-SDK(Dnp)-P
Abz-SDK(Dnp)-P

1 mg

BML-P163-0001

Mca-APK(Dnp)
Mca-APK(Dnp)

1 mg

BML-P228-0100

TACE substrate II (fluorogenic)
TACE 底物 II (荧光)

100 μg



小分子疗法


产品编号

产品名称

规格

BML-GR340-0005

Apicidin

5 mg

BML-GR340-0001

1 mg

LKT-A6132-M001

Apicidin

1 mg

LKT-A6132-M005

5 mg

LKT-A6132-M010

10 mg

BV-B1226-25

Azithromycin

25 mg

BV-B1226-100

100 mg

LKT-A9834-M500

Azithromycin Dihydrate

500 mg

LKT-A9834-G001

1 g

LKT-A9834-G005

5 g

BML-CM110-0100

Bafilomycin A1
巴弗洛霉素A1

100 μg

ALX-270-212-G005

Captopril
卡托普利

5 g

ALX-270-212-G001

1 g

LKT-C2844-G005

Chloramphenicol

5 g

LKT-C2844-G010

10 g

LKT-C2844-G050

50 g

LKT-C2950-G025

Chloroquine Diphosphate

25 g

LKT-C2950-G050

50 g

LKT-C2950-G100

100 g

ENZ-CHM219-0500

Dabrafenib (free base)
达拉菲尼(游离碱)

500 mg

ENZ-CHM219-1000

1 g

ENZ-CHM219-2000

2 g

ENZ-CHM219-0200

200 mg

ENZ-CHM219-0100

100 mg

ENZ-CHM219-0010

10 mg

ENZ-CHM219-0025

25 mg

ENZ-CHM219-0050

50 mg

ENZ-CHM220-0500

Dabrafenib.methanesulfonate salt
达拉非尼.甲磺酸盐

500 mg

ENZ-CHM220-1000

1 g

ENZ-CHM220-2000

2 g

ENZ-CHM220-0200

200 mg

ENZ-CHM220-0100

100 mg

ENZ-CHM220-0010

10 mg

ENZ-CHM220-0050

50 mg

ALX-380-043-M010

Daunorubicin.Hydrochloride
道诺霉素盐酸盐

10 mg

LKT-E5575-M025

Entacapone

25 mg

LKT-E5575-M100

100 mg

LKT-E5575-M500

500 mg

ALX-260-022-M001

Furin convertase inhibitor (chloromethylketone)
弗林转化酶抑制剂(氯甲基)

1 mg

ALX-260-022-M005

5 mg

BML-EI196-0025

H-89.2HCl
H-89 . 二盐酸盐

25 mg

BML-EI196-0005

5 mg

LKT-H0142-G001

Haloperidol

1 g

LKT-H0142-G005

5 g

LKT-H0142-G010

10 g

LKT-H0142-G025

50 g

BV-B2051-50

Hydroxychloroquine sulfate

50 mg

BV-B2051-250

250 mg

ALX-270-086-G025

Indomethacin
吲哚美辛

25 g

ALX-270-086-G005

5 g

LKT-I5440-M001

INK128

1 mg

LKT-I5440-M005

5 mg

LKT-I5440-M0025

25 mg

LKT-L3453-M100

Linezolid

100 mg

LKT-L3453-G001

1 g

LKT-L3453-G005

5 g

LKT-L3453-G025

25 g

LKT-L3374-M100

Lisinopril Dihydrate

100 mg

LKT-L3374-G001

1 g

LKT-L3374-G005

5 g

ALX-270-432-G005

Metformin
二甲双胍

5 g

LKT-M4454-M001

MLN-4924

1 mg

LKT-M4454-M005

5 mg

LKT-M4454-M0025

25 mg

BML-A249-0500

Mycophenolic acid
霉酚酸

500 mg

BML-A249-0100

100 mg

BML-EI370-0005

PKC-412

5 mg

BML-EI370-0001

1 mg

ENZ-CHM179-0010

Ponatinib
帕纳替尼

10 mg

ENZ-CHM179-0005

5 mg

BML-A275-0005

Rapamycin
雷帕霉素

5 mg

BML-A275-0025

25 mg

LKT-R3205-M025

Ribavirin

25 mg

LKT-R3205-M050

50 mg

LKT-R3205-M100

100 mg

LKT-R3205-M500

500 mg

ENZ-CHM156-0010

Ruxolitinib
可替尼

10 mg

ENZ-CHM156-0005

5 mg

LKT-T3324-M025

Tigecycline

25 mg

LKT-T3324-M100

100 mg

LKT-T3324-M250

500 mg

LKT-T3324-G001

1 g

ENZ-CHM119-0005

TNF-α inhibitor
TNF-α 抑制剂

5 mg

ENZ-CHM119-0001

1 mg

ALX-550-304-G005

Valproic acid.sodium salt
丙戊酸钠盐

5 g

LKT-V182685-M001

Verdinexor

1 mg

LKT-V182685-M005

5 mg

LKT-V182685-M025

25 mg


抗病毒反应


产品编号

产品名称

规格

PBL-41100-1

VeriKine Human Interferon Alpha ELISA Kit

96 wells

PBL-41100-2

5×96 wells

PBL-41410-1

VeriKine Human Interferon Beta ELISA Kit

96 wells

PBL-41410-2

5×96 wells

PBL-41415-1

VeriKine-HS Human Interferon Beta Serum ELISA Kit

96 wells



炎症和免疫反应监测


IL-6 (人) 高灵敏ELISA 试剂盒


  白介素6(IL-6)是关键的促炎细胞因子,并且是COVID-19相关免疫反应的关键参与者。据信SARS-CoV 棘突蛋白会上调IL-6和TNF-α,从而引发所谓的“细胞因子风暴”,显著推动COVID-19的症状和病理。是市场上超灵敏的IL-6(人)ELISA试剂盒之一。

  超灵敏——可以量化低白介素量

  高特异性——与其他家族成员的反应可忽略不计

  严格的质量控制——确保各批次的结果可重复

  科学家信赖——过去40多年来在同行评审的出版物中被定期引用


COVID-19研究产品                              共同应对全球健康危机

产品编号

产品名称

规格

ENZ-KIT178-0001

IL-6 (human), high sensitivity ELISA kit
IL-6(人),高灵敏度ELISA试剂盒

96 wells



ELISA分析


产品编号

产品名称

规格

ADI-900-130A

IL-1β (human), ELISA kit
IL-1β(人),ELISA试剂盒

96 wells

ENZ-KIT178-0001

IL-6 (human), high sensitivity ELISA kit
IL-6(人),高灵敏度ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-036

IL-10 (human), ELISA kit
IL-10 (人), ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-099

TNF-α (human), ELISA kit
肿瘤坏死因子-α (人), ELISA试剂盒

96 wells

AFR-LF-EK50811

Human GM-CSF ELISA Kit

96 wells

AFR-LF-EK60019

Human Granulocyte Macrophage-Colony Stimulating Factor (GM-CSF) ELISA Kit

96 wells

ADI-900-118A

IL-2 (human), ELISA kit
IL-2(人)酶联免疫试剂盒

96 wells

ADI-900-136

IFN-γ (human), ELISA kit
干扰素-γ (人), ELISA试剂盒

96 wells

AFR-LF-EK0294

CymaxTM Human G-CSF ELISA Kit

96 wells

AFR-LF-EK50053

G-CSF (human) ELISA kit

96 wells

AFR-LF-EK50653

Human IL-7 ELISA kit

96 wells

ASB-OKEH00401

CXCL10 ELISA Kit (Human) : 96 Wells

96 wells



MAPK信号通路监测


产品编号

产品名称

规格

ADI-900-098A-0001

[pThr202/Tyr204]Erk1/2 ELISA kit
Erk1/2(pThr202/ Tyr204)酶联免疫试剂盒

96 wells

ADI-900-101

[pThr180/Tyr182]p38 ELISA kit
[pThr180/Tyr182]p38 ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-106

[pThr183/Tyr185]Jnk1/2 ELISA kit
[pThr183/Tyr185]Jnk1/2 ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-152

Erk1/2 ELISA kit
Erk1/2 ELISA试剂盒

96 wells



扩大生产


产品编号

产品名称

规格

ENZ-KIT128-0001

CHO host cell protein ELISA kit
CHO宿主细胞蛋白ELISA试剂盒

96 wells

ENZ-KIT127-0001

E. coli host cell protein ELISA kit
E. coli宿主细胞蛋白 ELISA试剂盒

96 wells

ENZ-KIT162-0001

HEK293T host cell protein ELISA kit
HEK293T宿主细胞蛋白ELISA试剂盒

96 wells

ADI-900-001

PGE2 ELISA kit
前列腺素E2酶联免疫试剂盒

96 wells

ADI-900-057

Protein A ELISA kit
蛋白A酶联免疫试剂盒

96 wells

ENZ-51023-KP002

PROTEOSTAT® Protein aggregation assay
proteostat蛋白聚集分析试剂盒

2×96 tests

ENZ-51023-KP050

50 tests

ENZ-51027-K400

PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit
PROTEOSTAT® 热稳定检测试剂盒

400 tests

ENZ-51027-K100

100 tests

ALX-522-020-3005

SUPERFASLIGAND® Protein (soluble) (human), (recombinant)
SuperFas配体 (可溶性) (人) (重组)

3×5 µg

ALX-522-020-C005

5 µg

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

抗寨卡病毒胞膜蛋白单抗 anti-Zika Virus Envelope Protein mAb

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

抗寨卡病毒胞膜蛋白单抗                              anti-Zika Virus Envelope Protein mAb

抗寨卡病毒胞膜蛋白单抗

anti-Zika Virus Envelope Protein mAb



◆规格/处理

产品详情

别称

 ZIKV E蛋白

产品类型

 重组抗体

性质

克隆号

 ZKA64

亚型

 人IgG1K

免疫原/抗原

 寨卡病毒

标签/偶联物

 不含防腐剂

应用

 功能应用(中和):使用IC50约为93 ng/mL中和寨卡病毒(ZIKV)。在较宽的浓度范围 (不超过1 µg/mL)

 下,还可以增强非容纳性K562细胞中的ZIKV感染。

 理想条件应根据个人实验条件决定。

交叉反应

 病毒

特异性

 特异性识别并结合寨卡病毒包膜蛋白(ZIKV E)的EDIII结构域。

 不与登革热病毒包膜蛋白(DENV E)交叉反应。

纯度

 ≥95%   (SDS-PAGE)

纯度条件

 蛋白A亲和纯化

内毒素含量

 <0.001 EU/μg

浓度

 1 mg/mL

规格

 液体,溶于PBS中。

其他产品数据

 来源:来源于感染寨卡病毒的永生化EBV记忆B细胞,且无登革热病毒的人类供体。

运输与处理

运输

 冰袋运输

短期储存

 +4°C

长期储存

 -20°C

操作建议

 避免反复冻融

使用/稳定性

 在-20°C条件下,至少稳定保存1年。
 在+ 4°C条件下,至少稳定保存3个月。

◆描述


寨卡病毒(ZIKV)感染的主要途径是伊蚊叮咬,但该病毒也可能通过性传播和母婴传播。尽管大多数寨卡病毒感染为隐性感染或仅引起轻度症状,但有证据表明寨卡病毒感染可导致神经系统并发症,如成人的吉兰-巴雷综合征和先天性出生缺陷,包括发育中胎儿的头小畸型(可能由于该病毒感染人类神经祖细胞的能力)。然而黄病毒包膜(E)蛋白介导融合且作为中和抗体的主要靶标,而由感染细胞分泌的非结构蛋白1(NS1),参与免疫逃逸和发病机理。E蛋白包含三个结构域:EDI参与病毒进入所需的构象变化;EDII含有融合环的;EDIII可能参与细胞受体结合。寨卡病毒的理想特异性中和抗体是直接靶向寨卡病毒EDIII结构域的。

 


◆产品列表

产品编号

产品名称

包装

AG-27B-6004PF-C100

anti-Zika Virus Envelope Protein (EIII domain), mAb (rec.) (neutralizing)   (ZKA64) (preservative free)

抗寨卡病毒包膜蛋白(EIII结构域),单克隆抗体(rec.)(中和)(ZKA64)(不含防腐剂)

100 µg

◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

AG-20B-0009-C100

anti-RIG-I, mAb (Alme-1) (Biotin)
RIG-I单抗(Alme-1)(生物素标记)

100 µg

AG-20B-0009B-C100

anti-RIG-I, mAb (Alme-1)
RIG-I单抗(Alme-1)

100 µg

AG-20B-0003-C100

anti-NS5B (HCV), mAb (blocking) (5B-12B7)
NS5B(丙肝)单抗(封闭作用)(5B-12B7)

100 µg

AG-20B-0002-C100

anti-NS5B (HCV), mAb (5B-3B1)

NS5B(丙肝)单抗(5B-3B1)

100 µg

AG-20B-0001-C100

anti-NS3 (HCV), mAb (1B6)
NS3(丙肝)单抗(1B6)

100 µg


参考文献


1.

Specificity, cross-reactivity, and function of antibodies elicited by Zika virus infection: K. Stettler, et al.; Science 353, 823 (2016)

2.

De Novo Isolation & Affinity Maturation of yeast-displayed Virion-binding human fibronectin domains by flow cytometric screening against Virions: P. Heinzelmann, et al.; J. Biol. Eng. 13, 76 (2019)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

其他抗病毒药成分

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

其他抗病毒药成分其他抗病毒药成分


◆更昔洛韦(Ganciclovir)


CAS No. 82410-32-0

C9H13N5O4=255.23

纯度:98.0+%(HPLC)

可溶性溶媒:氢氧化钠溶液

用途(作用):模拟核酸逆转罗酶抑制剂。可以通过病毒DNA聚合

                      酶/逆转录酶竞争性抑制底物的吸收,通过停止

                      DNA链伸长抑制病毒增殖。

其他抗病毒药成分

◆替诺福韦(Tenofovir)

CAS No. 147127-20-6

C9H14N5O4P=287.21

纯度:97.0+%(HPLC)

可溶性溶剂:水

用途(作用):可以通过DNA聚合酶竞争性抑制底物

                      的吸收,抑制DNA链伸长。

其他抗病毒药成分

其他抗病毒药成分



◆三唑核苷(Ribavirin)


CAS No. 36791-04-5

C8H12N4O5=244.20

纯度:98.0+%(HPLC)

可溶性溶剂:水

用途(作用):抑制病毒RNA聚合酶,抑制病毒增殖。

其他抗病毒药成分

其他抗病毒药成分



◆瑞乐沙(Zanamivir)


CAS No. 139110-80-8

C12H20N4O7=332.31

纯度:90.0+%(HPLC)

可溶性溶剂:水

用途(作用):神经氨酸苷酶抑制剂。可以切断和糖链末端结合的

                      唾液酸。可以抑制在宿主细胞内增殖的病毒游离

                      感染其他细胞。

其他抗病毒药成分

相关资料详情请查看:80.html



产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
078-04481 Ganciclovir 
更昔洛韦
250mg
074-04483 Ganciclovir 
更昔洛韦
1g
207-17961 Tenofovir 
替诺福韦
100mg
203-17963 Tenofovir 
替诺福韦
1g
182-02331 Ribavirin 
三唑核苷
250mg
188-02333 Ribavirin 
三唑核苷
1g
264-02021 Zanamivir 
瑞乐沙
100mg
260-02023 Zanamivir 
瑞乐沙
500mg

慢病毒纯化酶试剂盒Takara

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息。

慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631246 Collection Rack L Each ¥1,469 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ¥3,287 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ¥5,474 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631245 Lenti-X Maxi Purification Kit (with Rack) Each ¥6,864 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
 
 
慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作,快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统,后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒,从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒,未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒?
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA,不明感染和转导抑制剂,细胞和血清蛋白质,以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前,有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱,只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品(9-45 ml)中,然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂,就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中,杂质被去除掉了,纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导,因为在感染的过程中,原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80%优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多,通常低于20%。而与基于过滤器的系统相比,Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上,纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低,而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比,获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买,也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导,收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1. 收集架L。组装后,这个收集架可安全牢固地容纳三根色谱柱(例如慢病毒纯化柱)和三根收集管(50 ml锥形管)。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量,通过qRT-PCR(RNA拷贝数)或流式细胞仪/荧光(IFU)测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度,展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统(Vendor M和Vendor S)制备等量的纯化后慢病毒(1×105 IFU)进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比,在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
产品详情请点击:慢病毒纯化
 
 

页面更新:2020-02-25 11:41:30

诺如病毒酶试剂盒Takara

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诺如病毒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR250A TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit 50 Rxns ¥2,695 诺如病毒 诺如病毒 诺如病毒
Takara RR250B (A × 5) TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit 50 Rxns × 5 ¥13,071 诺如病毒 诺如病毒 诺如病毒
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■ 制品列表
Code No. 制品名称
RR250A/B   TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit
 
 

页面更新:2018-11-15 11:05:04

CRISPR/Cas9慢病毒系统酶试剂盒Takara

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CRISPR/Cas9慢病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632629 Lenti-X CRISPR/ Cas9 System 1 System ¥14,572 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统
Clontech 632630 pLVX-hyg-sgRNA1 Vector System 10 Rxns ¥4,610 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统
Clontech 632631 pLVX-puro-Cas9 Vector 20 μl ¥7,483 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统
Clontech 632633 Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9 System 1 System ¥22,832 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统
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          基因敲除    
          CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统
CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统 CRISPR/Cas9慢病毒系统            
  基因敲入        
          CRISPR/Cas9慢病毒系统        
 
 
注意:购买632633时,需要填写专利确认书
 
慢病毒介导的CRISPR/Cas9 系统
Lenti-X CRISPR/Cas9 System
Lenti-X CRISPR/Cas9 System是一个完整的由慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统。该系统包括Lenti-X Packaging Single Shots(用于产生高滴度的病毒)和两个不同的质粒载体(用于在靶细胞中表达Cas9 和客户自定义的sgRNA)。表达sgRNA的质粒系统pLVX-hyg-sgRNA1,易于插入客户自定义的sgRNA 序列,并且该系统提供足够的质粒供客户构建10种不同的sgRNA序列质粒。利用慢病毒导入sgRNA和Cas9基因,可以对难转染细胞系实现靶向基因编辑。
Lenti-X CRISPR/Cas9 System涉及到Cas9在靶细胞中的恒定表达,而Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9 System结合了Tet-On 3G 反式转录激活蛋白,这使得用户可以通过添加强力霉素(doxycycline)来诱导Cas9的表达。通过严格控制Cas9的表达,Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9 System可以使用户在细胞培养中,减少与Cas9稳定表达相关的毒性与脱靶效应。
 
■ 产品特点
· 利用病毒导入Cas9 基因和sgRNA ,使得一些难转染的哺乳动物细胞可以实现基因编辑,包括增殖细胞和非增殖细胞。
· Lenti-X Packaging Single Shots易于产生高滴度病毒。
· 由慢病毒介导客户自定义的sgRNA 和Cas9,用于哺乳动物使用CRISPR/Cas9 技术进行基因编辑。
· 通过严格控制Cas9的表达,Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9 System可以使用户在细胞培养中,减少与Cas9稳定表达相关的毒性与脱靶效应。
 
■ 产品应用
· 利用CRISPR/Cas9技术对哺乳动物基因组编辑时,以慢病毒为基础的、用户自定义sgRNA和 Cas9的导入系统。
 
■ 实验例
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图1. 诱导敲除HEK293细胞中CD81基因
Tet-On 3G慢病毒转导靶细胞后采用G418筛选阳性单细胞克隆,选取24个单克隆分析荧光素酶报告基因的诱导表达倍数,选择荧光素酶报告基因背景量表达量最低的细胞克隆,然后以Cas9慢病毒(MOI=5)进行转导。转导后的靶细胞以1 μg/ml嘌呤霉素进行筛选,2周后,任意选择6个稳定细胞克隆分析Cas9的诱导表达倍数。将每个单克隆扩增培养的细胞分别接种至两个孔(12孔板)进行培养,其中一孔细胞添加0.5 μg/ml强力霉素诱导培养2天。采用抗Cas9的多克隆抗体(Code No. 632607)和ECL试剂通过Western blot分析Cas9诱导表达情况,抗体稀释比例为1:1,000。从中选取3个Tet-On 3G-Cas9-阳性细胞克隆(C-1, C-2和C-3)进行扩增培养并将其分别接种至2个孔(12孔板)中,CD81-sgRNA慢病毒(MOI=5)再次转导靶细胞,转导8小时后,添加0.5 μg/ml强力霉素至其中一孔进行诱导培养。6天后,收集细胞并采用FITC标记的抗人CD81抗体进行染色,通过FACS检测CD81表达情况。图A. Western blot检测结果显示了在添加0.5 μg/ml强力霉素(+)进行诱导或者不添加强力霉素(-)的情况下,6个分别独立的Tet-On 3G-Cas9-阳性细胞群Cas9蛋白质的表达情况。图B. FACS检测结果显示了CD81-sgRNA慢病毒转导的3个分别独立的Tet-On 3G-Cas9-阳性293T细胞群,在添加0.5 μg/ml强力霉素(+)进行诱导或者不添加强力霉素(-)的情况下,目的基因的敲除效率。在所检测的3个细胞群中,其中2个细胞群C-1和C-2在不添加强力霉素进行诱导的情况下基本不发生基因编辑现象,添加强力霉素进行诱导的情况下CD81基因的敲除效率分别为58.6%和30.7%。而另外一个细胞群C-3在不添加强力霉素进行诱导的情况下仍然会发生基因编辑现象,CD81基因的敲除效率为27.9%。
 
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图2. 以可诱导的方式编辑HEK293细胞中AAVS1基因
通过qRT-PCR分析6个Tet-On 3G-Cas9-阳性HEK293稳定细胞系中Cas9的诱导表达情况。将HEK293细胞分别接种至2个孔(12孔板),以AAVS1-sgRNA慢病毒(MOI=5)进行转导。转导8小时后,添加0.5 μg/ml强力霉素至其中一孔诱导培养6天。6天后采用Guide-it Mutation Detection Kit (Code No. 631443)检测AAVS1基因编辑效率。图A.通过qRT-PCR方法检测每个细胞克隆分别在未经诱导(-Dox)和经过诱导(+Dox)的情况下Cas9蛋白质的表达情况。未经诱导和经过诱导的细胞的Ct值和ΔCt值标注在相对应一栏,计算出来的表达倍数差异标注在右侧一栏。多个细胞克隆的检测结果显示,在所检测的细胞克隆中1号克隆(绿色数字)具有最好的诱导性能,只有3号克隆(红色数字)在没有强力霉素诱导的情况下Cas9也会有所表达而且诱导性能较差。图B. Guide-it解离酶分析实验检测未经诱导(–)和经过诱导(+)的细胞克隆中AAVS1基因编辑效率。亲本细胞(未转导细胞)检测结果显示未经诱导和经过诱导的细胞所产生的片段大小是等同的。而经过诱导的稳转细胞系的检测结果显示产生了较小的基因片段,这说明在所检测的细胞克隆中都发生了AAVS1基因编辑现象。3号克隆在未经诱导的情况下也可以观察到剪切产物,这一点与qRT-PCR检测结果是相一致的。
 
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图3. Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9系统载体组成
pLVX-EF1a-Tet3G载体编码表达Tet-On 3G转录激活蛋白质,由组成型启动子EF-1 alpha启动表达。与常用的CMV启动子相比,EF-1 alpha启动子在某些细胞类型(包括各种干细胞类型)中不易被沉默,所建立的诱导细胞系适用于长期使用。Tet-On 3G是由Tet-On Advanced转录激活蛋白质修饰而来,具有更高的强力霉素反应灵敏度。pLVX-TRE3G-Cas9-puro载体由诱导型启动子PTRE3GV启动表达经过优化的Cas9核酸酶。pLVX-TRE3G-Cas9-puro载体上的Cas9序列来源于杆菌属酿脓链球菌,进行了密码子优化以适用于哺乳动物细胞表达,另外在Cas9序列C端还引入了核定位信号(NLS)。pLVX-hyg-sgRNA1载体由组成型人U6启动子编码表达sgRNA(由用户设计并插入)。
 
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图4.为可诱导型基因编辑选择优质的细胞克隆
通过分析Cas9表达情况或者分析未诱导的或者经过诱导的细胞群基因编辑情况来筛选优质的细胞克隆。虽然通过Western blot检测Cas9蛋白质表达情况有助于预筛选细胞克隆,但是CRISPR/Cas9介导的基因编辑是非常高效的,即使在通过Western blot检测不到Cas9蛋白质表达的情况下,在相应的细胞克隆中仍然有可能发生基因编辑现象。我们建议通过qRT-PCR方法来筛选Cas9背景表达量较低的细胞克隆,以避免在没有添加强力霉素的情况下发生基因编辑现象。图4上面一行显示的是优质细胞克隆(C-1)的检测数据,经过诱导的C-1细胞中Cas9蛋白质表达情况良好(Western blot,+),Cas9 mRNA背景表达水平非常低(qRT-PCR)。和未经诱导的细胞(-或者-Dox)相比,经过诱导的细胞(+或者+Dox)中Cas9的诱导表达使得基因编辑发生的频率更高,解离酶分析实验中小片段(蓝色箭头)的出现,FACS检测结果显示较大比例的细胞出现在“knockout”范围而未经诱导的细胞中基因编辑水平非常低都可以证实这一点。图4下面一行显示的是非优质细胞克隆(C-3)的检测数据,在未经诱导的细胞克隆(-)中即使通过Western blot没有检测到Cas9蛋白质的表达,但依然可以检测到Cas9 mRNA的表达(qRT-PCR)和基因编辑现象(解离酶,FACS)。
 
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图5. LVX-hyg-CD81-sgRNA转导Jurkat或者HT1080细胞后采用潮霉素筛选稳定整合细胞系。之后采用LVX-puro-Cas9转导筛选获得的稳定细胞克隆,并采用嘌呤霉素再次进行筛选,通过FACS方法检测CD81敲除效率。以抗CD81抗体处理的未经Cas9转导的亲代细胞作为阳性对照,而未做抗体处理的亲代细胞作为阴性对照。
 
CRISPR/Cas9慢病毒系统
 
图6. 诱导敲除Jurkat细胞中CD81基因
按照实验手册操作流程建立Cas9背景表达较低的Tet-On 3G-Cas9-阳性Jurkat细胞,并以CD81-sgRNA慢病毒(MOI=5)连续转导两次。将成功转导的细胞接种至2个孔(12孔板)中并在其中一孔中添加0.5 μg/ml强力霉素(+Dox)诱导培养7天。采用FITC抗人CD81抗体进行检测并通过FACS进行分析,分析结果显示在未经强力霉素诱导的细胞(-Dox; top)中只有一小部分的细胞(0.4%)发生了基因编辑现象,而经过强力霉素诱导的细胞(+Dox; bottom)中发生CD81基因编辑的比例为32%。
 
■ 产品组份
Lenti-X CRISPR/Cas9 System (Code No.632629)
· pLVX-hyg-sgRNA1 Vector (Linear) (Code No. 632632,不单独销售)
· pLVX-puro-Cas9 Vector(Code No. 632631)
· Stellar Competent Cells(Code No. 636763)
· Guide-it Ligation Components v2 (Code No. 632615,不单独销售)
· Lenti-X Packaging Single Shots(Code No. 631275,不单独销售)

Lenti-X Tet-On 3G CRISPR/Cas9 System (Code No. 632633)
· pLVX-hyg-sgRNA1 Vector (Linear)
· pLVX-TRE3G-Cas9-puro Vector Set
· pLVX-EF1a-Tet3G Vector
· Stellar Competent Cells
· Guide-it Ligation Components v2
· Lenti-X Packaging Single Shots

pLVX-hyg-sgRNA1 Vector System (Code No. 632630)
· pLVX-hyg-sgRNA1 Vector (Linear) (Code No. 632632,不单独销售)
· Guide-it Ligation Components v2 (Code No. 632615,不单独销售)
· Stellar Competent Cells(Code No. 636763)

 
 
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CRISPR/Cas9腺相关病毒系统酶试剂盒Takara

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CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632608 AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) 1 System ¥10,846 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632609 AAVpro CRISPR/Cas9 Vector System 1 System ¥6,766 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632618 AAVpro CRISPR/SaCas9 Vector System 1 System ¥5,931 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632619 AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) 1 System ¥10,643 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
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          基因敲除    
          CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统            
  基因敲入        
          CRISPR/Cas9腺相关病毒系统        
 
 
重组腺相关病毒基因编辑系统(AAV2)
AAVpro® CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2)
· 以病毒传递的方式导入Cas9基因和sgRNA,可以实现在难转染哺乳动物细胞中进行基因编辑,包括分裂细胞和非分裂细胞
· AAV病毒导入Cas9基因可以排除基因组整合和Cas9基因持续表达所带来的影响,降低脱靶效应
· 包装辅助质粒表达人microRNA miR-342有助于显著提高AAV病毒滴度
 
■ 产品说明:
我们可以提供两种CRISPR/Cas9 AAV2病毒粒子制备系统,无需辅助病毒,可采用Cas9进行基因编辑:AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System和AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System。这两个试剂盒都可以用于将Cas9表达框和一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)导入至哺乳动物细胞中。Cas9基因序列来源于酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)或者金黄色酿脓葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。AAV系统可用于广泛哺乳动物细胞类型,有效实现体外基因组修饰。CRISPR/Cas9系统采用两个AAV载体导入较大的S. pyogenes Cas9 (SpCas9),而由于SaCas9相对较小,CRISPR/SaCas9系统可以借助单个载体实现导入。sgRNAs可被直接一步克隆至预线性化的pAAV-Guide-it-Down或者pAAV-Guide-it-1质粒。无需辅助病毒,只需与试剂盒所包含的辅助质粒共转染HEK 293T细胞即可制备高滴度的AAV2病毒粒子。AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (Code No. 632608) 和AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System (Code No. 632619) 都是完整试剂盒,包含了sgRNAs克隆和AAV病毒粒子制备所需要的所有试剂。同样也包含了有效分离提取AAV2病毒粒子的AAV Extraction Solution。需要注意的是,SpCas9和SaCas9即使作用于基因组的同一区域,其靶向效率也是不同的–详细信息请见实验例。
 
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free Systems (with S. pyogenes Cas9)
· SpCas9基因被分成两段分别承载在pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down两个质粒上,两段SpCas9基因之间有1.6-kb的区域是同源的,同源区域在靶细胞中通过同源重组形成全长SpCas9基因
· SpCas9使用的前间区序列邻近基序(Protospacer Adjacent Motif,PAM)序列为NGG,其中N代表任意碱基-详细信息请见AAVpro CRISPR/Cas9 Systems使用手册
· 所提供的pAAV-Guide-it-Down质粒是预线性化的,有利于一步克隆sgRNAs,降低由于质粒自连所产生的背景
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free Systems (with S. aureus Cas9)
· SaCas9基因组装在单个质粒pAAV-Guide-it-1上,同时也包含了sgRNA表达框
· SaCas9 (来自于金黄色酿脓葡萄球菌)使用的前间区序列邻近基序(Protospacer Adjacent Motif,PAM) 序列为NNGRR(T),其中N代表任意碱基,R代表A或者G碱基,(T)具有较强的偏好性-详细信息请见AAVpro CRISPR SaCas9 Systems使用手册
· 所提供的pAAV-Guide-it-1质粒是预线性化的,有利于一步克隆sgRNAs,降低由于质粒自连所产生的背景
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图1. 全长Cas9和sgRNA产生。
 
pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down载体分别编码被删减的Cas9基因上游和下游部分,两者之间有1.6-kb同源重叠区域。将一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)克隆至pAAV-Guide-it-Down(见载体图谱)。pAAV-Guide-it-Up或者pAAV-Guide-it-Down与pRC2-mi342和pHelper载体共同转染HEK 293T细胞制备AAV2-Up或者AAV2-Down病毒。采用AAV Extraction Solution分离提取制备产生的病毒粒子。AAV2-Up和AAV2-Down病毒共转导靶细胞。AAV基因组处理过程中会在1.6-kb同源重叠区域发生同源重组,形成全长Cas9基因,转录并翻译成Cas9蛋白质。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图2. AAV载体重组产生全长Cas9和sgRNA。
 
Cas9基因较大导致不能将其包装至单个AAV病毒粒子中。pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down载体分别包含Cas9经过删减的上游和下游部分,这两部分之间具备1.6-kb同源重叠区域。采用两个质粒分别进行病毒包装制备病毒。制备完成的病毒共同转导靶细胞,通过同源重组形成全长Cas9基因(4.1 kb)。在靶细胞中表达的功能Cas9蛋白质由sgRNA导向至合适的基因型位点。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图3. pAAV-Guide-it-Up载体图谱。
 
这是pAAV-Guide-it-Up载体的结构。这个载体包含在AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System中,此系统用于制备AAV病毒粒子实现Cas9和sgRNA基因的细胞导入,这两者是进行CRISPR/Cas9基因编辑所必需的组分。由于Cas9基因较大,使得其不能包装在单个AAV病毒粒子中。为了可以实现AAV介导的Cas9基因的导入,此系统采用了两个单独的Cas9质粒。pAAV-Guide-it-Up载体包含一段被删减的Cas9基因上游部分(3,106 bp),由CMV启动子驱动编码Cas9 N端1,035个氨基酸。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图4. pAAV-Guide-it-Down载体图谱。
 
这是预线性化的pAAV-Guide-iT-Down载体的结构。这个载体包含在AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free system中,此系统用于制备AAV病毒粒子实现Cas9和sgRNA基因的细胞导入,这两者是进行CRISPR/Cas9基因编辑所必需的组分。由于Cas9基因较大,使得其不能包装在单个AAV病毒粒子中。为了可以实现AAV介导的Cas9基因的导入,此系统采用了两个单独的Cas9质粒。pAAV-Guide-it-Down载体包含了一段被删减的Cas9基因下游部分(2,616 bp),编码Cas9 C端872个氨基酸。一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)可被克隆至pAAV-Guide-it-Down载体中,位于人U6启动子的下游。要构建这个载体,需要先将作用于基因组靶位点的一对寡核苷酸链(向导序列)退火形成双链,然后将形成的双链DNA克隆至预线性化的载体中。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图5. HEK 293T细胞制备的AAV2-Up和AAV2-Down 病毒粒子的基因组滴度相同。
 
采用AAVpro Extraction Solution从HEK 293T细胞中分离提取AAV2-Up和AAV2-Down病毒粒子(参考protocol overview)。采用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR)检测基因组滴度。3次平行实验的结果表明所获得的AAV2-Up和AAV2-Down基因组滴度相近。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图6. 与质粒转染相比,尤其针对难转染的细胞系,AAVpro CRISPR/Cas9系统会产生更多的基因突变。
 
转导前1天将所标注的细胞类型(1.0 x 105 cells)接种至12孔板中。作用于CCR5 基因的AAV2-Up和AAV2-Down病毒粒子以1.0 x 105 MOI(基因组滴度)转导靶细胞。72小时后,收集细胞并采用Guide-it Mutation Detection Kit进行分析。作为对照,采用Xfect Transfection Reagent转染编码Cas9和靶向CCR5基因的向导序列的质粒(P: 2.5 μg)至靶细胞。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图7. AAVpro CRISPR/SaCas9系统通过单个载体表达SaCas9和sgRNA。
 
pAAV-Guide-it-1以预线性化形式提供,用于插入sgRNA靶序列(橘色标注部分为sgRNA)。采用此载体包装获得的病毒转导靶细胞时,靶细胞会同时表达进行基因编辑的SaCas9和sgRNA。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图8. Guide-it Mutation Detection Kit平行比较采用AAVpro CRISPR/Cas9 System (SpCas9)和AAVpro CRISPR/SaCas9 System产生的基因组修饰
 
CYP2外显子1两个不同的基因组区域为靶位点,孔1和2显示每个酶的检测结果,凝胶图下面的图显示靶区域。每个细胞类型的突变百分比标注在每个孔下面。转导前1天将3种不同细胞系分别接种1 x 105个细胞至12孔板。采用两载体系统AAVpro CRISPR/Cas9 System (SpCas9)或者单载体系统AAVpro CRISPR/SaCas9 System制备的病毒粒子以1.0 x 105 MOI(基因组滴度)转导靶细胞。72小时后,收集细胞并采用Guide-it Mutation Detection Kit进行分析 。
 
■ 产品组份
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2)(Code No. 632608)
1. AAVpro CRISPR/Cas9 Vector Set
pAAV-Guide-it-Up Vector 500 ng/μl
pAAV-Guide-it-Down Vector(Linear) 7.5 ng/μl
2. Guide-it Ligation Components
DNA Ligation Mighty Mix  
Guide-it Oligo Annealing Buffer  
Guide-it Control Annealed Oligos 100 fmol/μl
Guide-it Sequencing Primer 1 100 pmol/μl
PCR-Grade Water  
3. Stellar Competent Cells(Code No. 636763)
4. pRC2-mi342 Vector(1 μg/μl)
5. pHelper Vector(1 μg/μl)
6. AAVpro Extraction Solution
    AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
    AAV Extraction Solution B 150 μl×3
 
AAVpro CRISPR/Cas9 Vector System(Code No. 632609)
1. AAVpro CRISPR/Cas9 Vector Set
20 μl pAAV-Guide-it-Up Vector 500 ng/μl
20 μl pAAV-Guide-it-Down Vector(Linear) 7.5 ng/μl
2. Guide-it Ligation Components
DNA Ligation Mighty Mix  
Guide-it Oligo Annealing Buffer  
Guide-it Control Annealed Oligos 100 fmol/μl
Guide-it Sequencing Primer 1 100 pmol/μl
PCR-Grade Water  
3. Stellar Competent Cells(Code No. 636763)
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System (AAV2)(Code No. 632619)
1. pAAV-Guide-it-1 Vector (Linear) (7.5 ng/μl) 20 μl
2. Guide-it Ligation Components v3
 
DNA Ligation Mighty Mix 50 μl
Guide-it Oligo Annealing Buffer 1.5 ml
Guide-it Control Annealed Oligos v3 (100 fmol/μl) 10 μl
Guide-it Sequencing Primer 1 (100 pmol/μl) 10 μl
PCR Grade Water 1 ml
3. Stellar Competent Cells(Code No. 636763)
4. pRC2-mi342 Vector(1 μg/μl) 20 μl
5. pHelper Vector(1 μg/μl) 20 μl
6. AAVpro Extraction Solution
 
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Vector System(Code No. 632618)
1. pAAV-Guide-it-1 Vector (Linear) (7.5 ng/μl) 20 μl
2. Guide-it Ligation Components v3
 
DNA Ligation Mighty Mix 50 μl
Guide-it Oligo Annealing Buffer 1.5 ml
Guide-it Control Annealed Oligos v3 (100 fmol/μl) 10 μl
Guide-it Sequencing Primer 1 (100 pmol/μl) 10 μl
PCR Grade Water 1 ml
3. Stellar Competent Cells(Code No. 636763)
 
■ 保存
Stellar Competent Cells:-80℃
其它:-20℃
(AAVpro Extraction Solution溶解后置于室温保存)
 
 
 
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慢病毒浓缩酶试剂盒Takara

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慢病毒浓缩
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631231 Lenti-X Concentrator 100 ml ¥2,984
¥2,387
慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩
Clontech 631232 Lenti-X Concentrator 500 ml ¥10,205
¥8,164
慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩
 
 
 
提高100倍病毒滴度,无需超速离心
 
· 操作简便,只需与慢病毒上清液混合后离心即可
· 无需繁琐的超速离心操作
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    Lenti-X浓缩试剂是一款无需超速离心,可简单、快速且高效地浓缩慢病毒上清液的试剂。其操作流程非常简单,只需要将慢病毒上清液与Lenti-X浓缩试剂相混合,孵育一段时间后,采用标准离心机进行离心,离心后去除上清,以1/10 - 1/100原体积液体重悬沉淀。通过以上操作可将病毒滴度最高提高约100倍。Lenti-X浓缩试剂可用于浓缩包含Clontech Lenti-X慢病毒系统制备的慢病毒在内的大多数慢病毒上清液,浓缩规模可按照需求扩大或者缩小。
 
■ Lenti-XTM Concentrator操作流程
慢病毒浓缩
 
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■ 关联资料
Lenti-X Concentrator资料: 点击图片下载 慢病毒浓缩
 
产品详情请点击:慢病毒浓缩
 
 
 

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高滴度慢病毒包装系统酶试剂盒Takara

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高滴度慢病毒包装系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631275 Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 16 Rxns ¥11,501 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631276 Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 96 Rxns ¥26,205 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631277 Lenti-X Packaging Single Shots (Integrase Deficient) 16 Rxns ¥10,926 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631278 Lenti-X Packaging Single Shots (Ecotropic) 16 Rxns ¥10,926 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631282 Lenti-X Packaging Single Shots (96-well, VSV-G) 4 × 96-well plates ¥12,228 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631294 Lenti-X™ Packaging Single Shots (Envelope-Free) 16 Rxns ¥11,323 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
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高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
 
 
高滴度慢病毒包装系统
Lenti-X Packaging Single Shots是第四代慢病毒包装系统,它通过非常简便、操作一致的一步法来制备高滴度慢病毒。通常情况下,VSV-G型慢病毒滴度可达到107-108 IFU/ml。Lenti-X Packaging Single Shots由单管形式的Xfect Transfection Reagent和经过配比优化的Lenti-X包装质粒组成,两者预混后经过预分装和冻干处理,所以无需额外的转染试剂。只需要将这种混合物与您选择的慢病毒载体在无菌水中重新配制,然后将其添加到10厘米培养皿或者96孔培养板培养的293T细胞中,例如Lenti-X 293T Cells(Code No. 632180)即可制备高滴度病毒。
 
我们提供以下四种类型的Lenti-X Packaging Single Shots,这些包装系统针对不同的嗜性和整合特征进行了优化。每管中试剂和载体的量,都是以在10厘米培养皿或者96孔培养板中制备慢病毒来进行优化的。转染过程完全可以在血清存在的情况下进行,使用不含四环素的FBS,对于使用该技术获得高病毒滴度是很关键的。

· Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)Lenti-X Packaging Single Shots (96-well, VSV-G) 在四种类型系统中提供最高的病毒滴度(107-108 IFU/ml),具有最广泛的病毒嗜性,分别以单管和96孔的形式提供。
· Lenti-X Packaging Single Shots (Ecotropic)病毒嗜性限于小鼠和大鼠来源细胞
· Lenti-X Packaging Single Shots (Integrase Deficient)制备整合能力显著降低的VSV-G假型慢病毒
· Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free) 可灵活制备带有所选包膜蛋白的假型慢病毒。

 
■ 应用
· 慢病毒可以转导广泛的难转染细胞类型
· 轻松构建稳转细胞系
· 制备VSV-G假型,单嗜型或整合酶缺陷型慢病毒
 
■ 观看视频
了解我们的第四代包装系统如何可以产生如此高的病毒滴度。
 
了解使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 如何轻松始终如一地获得高滴度慢病毒。
 

■ 实验例

 
高滴度慢病毒包装系统
图1. Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 操作流程。
 
高滴度慢病毒包装系统
图2. Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)操作流程。
 
高滴度慢病毒包装系统
图3. 高效一致的转染可制备出高滴度病毒。在四个独立实验中,按照Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 操作流程包装含有ZsGreen1基因的慢病毒载体。简而言之,在四个Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 中,每一个都添加7 μg pLVX-ZsGreen1质粒;每管涡旋振荡20秒并在室温下孵育10分钟。然后,将混合物添加至汇合度约为80%的培养Lenti-X 293T cells中。转染后48小时,通过荧光显微镜(Panel A,顶部)和光学显微镜(Panel A,底部)拍摄图像。拍摄图像后,收集培养上清液,感染HT1080细胞并进行滴度测定(Panel B,IFU/ml)。
 
高滴度慢病毒包装系统
图4. 无论是哪种慢病毒载体骨架,使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 都可以制备出高滴度病毒。将CMV ZsGreen1表达框克隆到多个慢病毒载体骨架中,然后按照操作指导使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 将这些载体包装成为慢病毒。在四个Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 中,每一个都添加7 μg pLVX-ZsGreen1质粒;每管涡旋振荡20秒并在室温下孵育10分钟。然后,将混合物添加至汇合度约为80%的培养Lenti-X 293T cells中。转染后48小时,通过多种方法测定病毒滴度。为了确定感染性,收集上清液并感染HT1080细胞(流式细胞术)。收集的病毒上清液也通过RT-PCR方法定量病毒基因组拷贝数(qRT-PCR,Lenti-X qRT-PCR Titration Kit),ELISA方法测定p24(p24 ELISA,Lenti-X p24 Rapid Titer Kit),或者通过一种快速检测方法(Lenti-X GoStix)测定滴度。
 
高滴度慢病毒包装系统
图5. 第四代和第三代慢病毒包装系统比较。我们的Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 使用的是5个独立组件组成的包装系统(Panel A),这5个组件按照特别比例混合,优化了病毒包装性能。gagpolenv基因的分离有效地降低了RCL产生的概率(Wu et al., 2000)。Tet-Off和Tat反式激活因子驱动病毒必需成分高水平表达,诱导级联表达反应,从而可以制备出高滴度慢病毒。pol基因与vpr 基因的融合可以确保反转录酶/整合酶蛋白质能够转运到重组慢病毒颗粒中。本示意图没有显示所有的载体元件。而第三代慢病毒包装系统(Panel B)不包含分离的gagpol序列,也没有使用反式激活级联机制,所以产生的病毒滴度较低。
 
 
 
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慢病毒整合位点识别酶试剂盒Takara

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慢病毒整合位点识别
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631263 Lenti-X Integration Site Analysis Kit Each ¥11,162 慢病毒整合位点识别 慢病毒整合位点识别 慢病毒整合位点识别
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慢病毒整合位点识别
使用Lenti-X Integration Site Analysis Kit检测重组慢病毒载体整合的确切位点。慢病毒的复制生命周期会将慢病毒RNA基因组的一个DNA拷贝整合到宿主基因组中。所选择的整合位点对转基因的表达和宿主细胞的表现型都有重要影响。Lenti-X Integration Site Analysis Kit使用基因组步移技术来识别这些整合位点,以便对其进行测序和分析。
 
基因组步移技术主要包含以下步骤:
1. 从转导后细胞克隆或细胞群提取基因组DNA,使用平末端切割限制酶进行消化。
2. 将基因组步移接头连接到基因组DNA文库的平末端。
3. 通过一轮PCR从文库中扩增出同时包含文库接头和慢病毒序列的片段。
4. 第二轮巢式PCR通常会产生一个单一的主要PCR产物,可对其进行测序以确定整合位点。多个整合位点会产生多个条带,可对每个条带进行纯化和单独测序。
 
慢病毒整合位点识别
图1. Lenti-X Integration Site Analysis Kit操作流程图。主要包括以下3大步骤:构建三个病毒整合文库,PCR扩增文库基因组DNA,分析PCR产物。凝胶结果展示了一个典型的分析结果。 Lane 1:HpaI文库;Lane 2: DraI文库;Lane 3: SspI文库;Lane 4: 无模板对照;Lane M: DNA size markers;AP:接头引物;LSP:慢病毒特异性引物。
 
 
 
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慢病毒纯化酶试剂盒Takara

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慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ¥3,287 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ¥5,474 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作,快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统,后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒,从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒,未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒?
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA,不明感染和转导抑制剂,细胞和血清蛋白质,以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前,有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱,只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品(9-45 ml)中,然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂,就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中,杂质被去除掉了,纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导,因为在感染的过程中,原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80%优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多,通常低于20%。而与基于过滤器的系统相比,Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上,纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低,而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比,获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买,也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导,收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1 慢病毒纯化过程。基于Lenti-X重力柱的纯化方法(结合、清洗、洗脱),这种方法操作简便、有效,并且与基于针筒式过滤器的纯化方法相比能够更好地保存病毒。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量,通过qRT-PCR(RNA拷贝数)或流式细胞仪/荧光(IFU)测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度,展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统(Vendor M和Vendor S)制备等量的纯化后慢病毒(1×105 IFU)进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比,在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
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整合的慢病毒拷贝数测定酶试剂盒Takara

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整合的慢病毒拷贝数测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631239 Lenti-X Provirus Quantitation Kit 200 Rxns ¥6,511 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
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整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
 
 
Lenti-X Provirus Quantitation Kit可以让您快速确定转导细胞混合或克隆群体中存在的整合慢病毒(前病毒)的拷贝数。该试剂盒包括用于测定前病毒拷贝数的引物、基因组DNA纯化试剂盒、制备标准曲线的对照DNA,以及基于TB Green检测的qPCR试剂(可检测200次)。
 
正确确定慢病毒的有效滴度
通过量化已整合到靶细胞核DNA中的慢病毒的数量,您可以正确确定慢病毒上清液原液的真实滴度(即有效滴度)。利用这个信息,可以用正确的MOI(感染复数)去感染细胞,让您能够预测将有多少病毒基因组会整合到细胞中。您也可以使用此方法来校准其他滴定方法,那些方法可以测量包装细胞上清液中的病毒含量,但不能测定靶细胞中的功能性整合滴度。
 
一致并且可预测的慢病毒转基因表达
当使用慢病毒载体将基因导入至靶细胞时,表达水平会随着MOI的增加而增加,因为更多的慢病毒拷贝会整合到细胞核DNA中。同样,对于给定的病毒制剂,在不同目标细胞系中的有效MOI可能会因各个细胞系对慢病毒感染的敏感度不同而不同。Lenti-X Provirus Quantitation Kit可让您评估任何细胞系中的转导结果,而不受表达水平的影响,并且可确保不同细胞系间或使用不同病毒制剂间转导水平一致。
 
概述/特点
· 预测不同实验间一致的转基因表达水平
· 比较多个细胞系的转导数据
· 确保不同实验或不同细胞系之间的拷贝数一致
· 包含纯化10种基因组DNA和进行200 次TB Green qPCR反应试剂*
* 此试剂盒中包含的引物旨在扩增HIV-1基因组包装信号附近的的保守区域。这些引物与Takara Bio销售的所有慢病毒载体和常用的慢病毒载体相兼容。如果不能确定该试剂盒是否与您的载体相兼容,请将您的载体序列发送至service@takarabiomed.com.cn,我们的技术支持团队将很乐意为您确认引物的兼容性。
 
实验例
整合的慢病毒拷贝数测定
图1. 测定靶细胞中整合的慢病毒拷贝数。使用快速qPCR方法确定前病毒含量。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图2. 慢病毒前病毒拷贝数会影响转导细胞中转基因的表达水平。使用AcGFP1慢病毒表达载体分别以高或低MOI感染HT1080细胞。感染后72小时,对细胞进行嘌呤霉素药物选择。一周后,选择稳定转导的细胞克隆进行扩增和表达分析。使用流式细胞术确定AcGFP1的表达水平,并使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定基因组DNA中的前病毒含量。该图所示数据为低拷贝数(> 3; n = 8)和高拷贝数(> 9; n = 7)实验组两组合并数据。结果表明,前病毒含量越高,表达水平也就越高。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图3. 等量病毒感染细胞时,不同类型细胞获得的前病毒(整合的慢病毒)拷贝数不同。 用等量的单一慢病毒原液(100 μl)感染HT1080、HeLa和HEK 293细胞。感染后72小时,使用嘌呤霉素对细胞进行药物选择。一周后,使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定稳定转导细胞群的前病毒拷贝数
 
 
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组成型慢病毒系统酶试剂盒Takara

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组成型慢病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632182 Lenti-X Bicistronic Expression System (Hyg) Each ¥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632181 Lenti-X Bicistronic Expression System (Neo) Each ¥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632183 Lenti-X Bicistronic Expression System (Puro) Each ¥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632164 Lenti-X Expression System Each ¥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 631253 Lenti-X Expression System (EF1α Version) Each ¥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
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IRES双顺反子慢病毒系统酶试剂盒Takara

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IRES双顺反子慢病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632182 Lenti-X Bicistronic Expression System (Hyg) Each ¥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632181 Lenti-X Bicistronic Expression System (Neo) Each ¥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632183 Lenti-X Bicistronic Expression System (Puro) Each ¥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631253 Lenti-X Expression System (EF1α Version) Each ¥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631982 pLVX-EF1α-IRES-ZsGreen1 Vector 10 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631987 pLVX-EF1α-IRES-mCherry Vector 10 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632187 pLVX-IRES-ZsGreen1 Vector 10 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631237 pLVX-IRES-mCherry Vector 20 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631238 pLVX-IRES-tdTomato Vector 20 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631988 pLVX-EF1α-IRES-Puro Vector 10 μg ¥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
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逆转录病毒浓缩酶试剂盒Takara

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逆转录病毒浓缩
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631455 Retro-X Concentrator 100 ml ¥2,892 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩
Clontech 631456 Retro-X Concentrator 500 ml ¥10,005 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩
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Code No. 产品名称
631455   Retro-X Concentrator
631456   Retro-X Concentrator
 
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逆转录病毒滴度测定酶试剂盒Takara

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逆转录病毒滴度测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631453 Retro-X qRT-PCR Titration Kit 200 Rxns ¥6,010 逆转录病毒滴度测定 逆转录病毒滴度测定 逆转录病毒滴度测定
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Code No. 产品名称
631453   Retro-X qRT-PCR Titration Kit
 
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组成型逆转录病毒系统酶试剂盒Takara

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组成型逆转录病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631511 LRCX Retroviral Vector Set Each ¥6,953 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 631516 Retro-X Q Vector Set 20 μg×4 ¥7,559 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 631503 pLNCX2 Retroviral Vector 20 μg ¥5,301 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 631509 pLXSN Retroviral Vector 20 μg ¥5,301 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 631514 pQCXIN Retroviral Vector 20 μg ¥5,490 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 631515 pQCXIX Retroviral Vector 20 μg ¥5,490 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
Clontech 635002 pRetro-Lib Vector 20 μg ¥4,518 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统 组成型逆转录病毒系统
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