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镍离子树脂
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635665	His60 Ni Buffer Set	20 Purifications	￥5,997
Clontech	635659	His60 Ni Superflow Resin	10 ml	￥1,558 ￥1,246
Clontech	635660	His60 Ni Superflow Resin	25 ml	￥3,350 ￥2,680
Clontech	635661	His60 Ni Superflow Resin	4 x 25 ml	￥12,730
Clontech	635662	His60 Ni Superflow Resin	250 ml	￥22,213
Clontech	635663	His60 Ni Superflow Resin	2 x 250 ml	￥44,122
Clontech	635664	His60 Ni Superflow Resin	4 x 250 ml	￥85,325

Code No. 产品名称 635665   His60 Ni Buffer Set 635659   His60 Ni Superflow Resin 635660   His60 Ni Superflow Resin 635661   His60 Ni Superflow Resin 635662   His60 Ni Superflow Resin 635663   His60 Ni Superflow Resin 635664   His60 Ni Superflow Resin

■ 产品简介

His60 Ni Superflow Resin是一个高容量的Ni-IDA树脂，可以从细菌、哺乳动物和杆状病毒感染的细胞中，一步纯化重组的His标签蛋白。该产品属于改良型的Ni-IDA树脂，相比于其他Ni-NTA或Ni-IDA树脂来说，容量高、金属离子泄漏少，纯度高。

■ 产品特点

·高达60 mg/ml的His标签重组蛋白 ·洗脱的His标签重组蛋白中，金属离子泄露少 ·可在变性或非变性的条件下进行纯化 ·可用于分批/重力流和自动化FPLC纯化系统

■ 使用His60 Ni Superflow Resin进行蛋白纯化的流程图

■ 实验例

同其他公司的Ni-NTA树脂相比，使用His60 Ni树脂 纯化获得的His标签重组蛋白的纯度更高。 注：以上实验例的图片及比较数据均来自Takara Bio USA, Inc.

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页面更新：2019-11-12 09:23:04

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钴离子树脂
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635606	TALON 2 ml Disposable Gravity Column	50 Columns	￥1,492
Clontech	635501	TALON Metal Affinity Resin	10 ml	￥1,459 ￥1,167
Clontech	635502	TALON Metal Affinity Resin	25 ml	￥3,103 ￥2,482
Clontech	635503	TALON Metal Affinity Resin	100 ml	￥11,456 ￥9,165
Clontech	635504	TALON Metal Affinity Resin	250 ml	￥22,879 ￥18,303
Clontech	635652	TALON Metal Affinity Resin (2 x 250 ml)	2 x 250 ml	￥36,866
Clontech	635653	TALON Metal Affinity Resin (4 x 250 ml)	4 x 250 ml	￥69,989

■ 产品简介

使用TALON His-Tag纯化树脂，可以在变性或非变性条件下，从细菌、哺乳动物，酵母和杆状病毒感染细胞中纯化His标签蛋白。TALON是一种螯合固定钴离子的固定化金属离子亲和层析（IMAC）树脂，相比于镍离子树脂而言，结合His标签蛋白的特异性更高。因此，使用TALON树脂纯化可获得更高纯度的His标签蛋白。另外，每个钴离子被树脂的4个配位基团螯合固定，结构稳定，金属离子泄漏少。

■ 产品特点

·对His标签蛋白有很高的亲和力 ·无共纯化蛋白 ·金属离子泄漏少 ·在宽广的实验条件下，仍保持良好的性能

■ 产品操作流程

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页面更新：2019-11-12 08:59:53

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钴离子树脂-细胞粗提液样品
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635513	CellThru 10-ml Disposable Columns	20 Columns	￥1,657
Clontech	635509	TALON CellThru Resin	10 ml	￥1,684
Clontech	635510	TALON CellThru Resin	100 ml	￥11,856

Code No. 产品名称 635513   CellThru 10-ml Disposable Columns 635509   TALON® CellThru 635510   TALON® CellThru

■ 产品简介

TALON CellThru是一款新型的IMAC树脂，可以从细胞裂解粗提液、超声破碎裂解液和发酵液中纯化His标签蛋白。该树脂和TALON Metal Affinity Resin一样，使用了配位键结合，但树脂颗粒较大 (300–500 μm)， 无需离心，允许细胞碎片通过。TALON CellThru Resin可以从细胞裂解粗提液中，一步快速纯化His标签蛋白，有效地减少了蛋白质的降解，相比于传统的纯化方式而言，纯化蛋白的收率更高。

■ 产品特点

·从细胞裂解粗提液中纯化 ·膜结合蛋白和蛋白复合体的理想纯化树脂 ·无共纯化蛋白 ·金属离子泄露少 ·快速、简便的操作流程

■ 实验例

以上为使用TALON CellThru Resin纯化蛋白的SDS-PAGE实验例。E. coli BL21细胞使用TALON wash buffer进行超声破碎， 之后经TALON CellThru column纯化，使用150 mM咪唑进行洗脱。请注意，某些目的蛋白可能与膜碎片相结合，而不能被树脂吸附纯化 。

■ 使用Talon resin进行非变性或变性纯化的对比流程图

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钴离子树脂-磁性
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635636	TALON Magnetic Beads	2 x 1 ml	￥2,156
Clontech	635637	TALON Magnetic Beads	6 x 1 ml	￥6,159
Clontech	635638	TALON Magnetic Beads Buffer Kit	Each	￥3,124

Code No. 产品名称 635636   TALON® Magnetic Beads 635637   TALON® Magnetic Beads 635638   TALON® Magnetic Beads Buffer Kit

■ 产品简介

该产品结合了TALON 树脂高特异性纯化与磁珠分离方法的优势。当样品放置在磁珠分离器中时，磁珠中有磁性的微粒可以帮助我们快速方便 地分离微小差异的蛋白。以Co2+作为螯合金属离子的磁珠，相比于以Ni2+作为螯合金属离子的磁珠来说，对His标签蛋白具有更高的选择特异性。其中，Co2+是以TALON 树脂特有的四个配位基螯合固定在磁珠上的，结构稳定，在纯化过程中 很少有金属离子泄漏。

■ 产品特点

·简便快速地纯化His标签蛋白 ·TALON 树脂的选择特异性高、纯度好 ·溶出的样品是小体积应用的理想选择

■ 实验例

以上为使用TALON 磁珠纯化His标签蛋白的两个实验例。蛋白在BL21 E. coli 细胞中表达后，使用xTractor Buffer (Code No. 635623) 提取。用水清洗200 μl 5%的TALON 磁珠悬浮液以去除保存buffer，之后使用loading buffer (50 mM磷酸钠， 0.3 M NaCl， pH 7.2)平衡化。在室温30 min (6xHN-AcGFP1) 或者4°C 60 min (6xHN-LacZ) 的条件下，将提取液与TALON 磁珠混合。之后使用loading buffer 进行第一次清洗，再用含10 mM咪唑的loading buffer进行第二次清洗，最后使用含250 mM咪唑的loading buffer洗脱目的蛋白。

A. 使用TALON 磁珠纯化6xHN-AcGFP1蛋白，使用4-20%的梯度凝胶进行SDS-PAGE电泳分析。 1: 大肠杆菌破碎液 2: 未吸附物质 3: 洗脱的目的蛋白 M ：蛋白Marker B. 使用TALON 磁珠纯化6xHN-LacZ蛋白，使用4-20%的梯度凝胶进行SDS-PAGE电泳分析 1: 大肠杆菌破碎液 2: 未吸附物质 3: 洗脱的目的蛋白 M ：蛋白Marker 以上两个实验例的SDS-PAGE结果显示，使用TALON磁珠均获得了较高水平的纯化

■ 使用Talon resin进行非变性或变性纯化的对比流程图

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镍离子树脂-磁性
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635693	His60 Ni Magnetic Beads	1 mL	￥1,429
Clontech	635692	His60 Ni Magnetic Beads	10 ml	￥6,411

Code No. 产品名称 635692   His60 Ni Magnetic Beads 635693   His60 Ni Magnetic Beads

■ 产品简介

该产品结合了His60 Ni Superflow Resin产品优势与磁珠分离方法的优势。当样品放置在磁珠分离器中时，磁珠中有磁性的微粒可以帮助我们快速方便地分离微小差异的蛋白。该产品属于改良型的Ni-IDA树脂，相比于其他Ni-NTA或者Ni-IDA树脂而言，容量高、金属离子泄漏少，纯度高。

■ 产品特点

·简便快速地纯化His标签蛋白 ·采用改良型的His60 Ni 树脂，获得的纯度相对更高 ·溶出的样品是小体积应用的理想选择

■ 实验例

以上是在非变性条件下，使用His60 Ni磁珠从细胞裂解液中纯化带His标签的AcGFP1蛋白的实验例。首先向His60 Ni磁珠中添加400 μl在大肠杆菌中表达的AcGFP1-6xHis蛋白的澄清的裂解液，孵育30分钟。使用500 μl的清洗buffer清洗磁珠3次，之后使用100 μl的洗脱buffer（来自于His60 Ni Buffer Set，Code：635665）洗脱4次。 使用12%的SDS-PAGE进行电泳分析，每孔10 μl上样。 M：彩色宽范的蛋白ladder 1：起始样品    2： 流穿液 3：清洗样品①  4：清洗样品②  5：清洗样品③ 6：洗脱样品①  7：洗脱样品②  8：洗脱样品③  9：洗脱样品④

以上是在变性条件下，使用His60 Ni磁珠从细胞裂解液中纯化带His标签的AcGFP1 蛋白的实验例。首先向His60 Ni磁珠中添加500 μl在大肠杆菌中表达的AcGFP1-6xHis蛋白的澄清的裂解液，孵育30分钟。使用500 μl的平衡化buffer清洗磁珠3次，500 μl 1X的清洗buffer清洗1次，之后使用50 μl的洗脱buffer（来自于His60 Ni Buffer Set，Code：635665）洗脱3次。8M尿素已添加到以上所有的buffer当中。 使用4-20%的SDS-PAGE进行电泳分析，每孔10 μl上样。 M：彩色宽范的蛋白ladder 1：起始样品    2：流穿液 3：清洗样品①  4：清洗样品②  5：清洗样品③  6：清洗样品④ 7：洗脱样品①  8：洗脱样品②  9：洗脱样品③

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抗体纯化树脂-嗜硫树脂
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635616	Thiophilic-Superflow Resin	10 ml	￥2,287
Clontech	635617	Thiophilic-Superflow Resin	100 ml	￥17,880

Code No. 产品名称 635616   Thiophilic-Superflow Resin 635617   Thiophilic-Superflow Resin

■ 产品描述

使用嗜硫树脂进行抗体纯化是一种简单有效的方法，也是纯化免疫球蛋白最常用的方法，是Protein A法的经济替代品。尽管Protein A法纯化抗体很常用，但仍有一些种类的抗体，例如单链抗体IgE，IgY和IgM等不能用Protein A的方法纯化，因此嗜硫亲和层析（TAC）就可以作为一种替代方法，是此类抗体以及一般免疫球蛋白（包括IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及C3和C4 补体因子）纯化的理想选择。

TAC法可以简单有效地纯化蛋白质，特别适用于免疫球蛋白，可以代替Protein A从血清以及组织培养液中纯化抗体。与Protein A的免疫吸附相比，嗜硫吸附剂对免疫球蛋白有更广泛的亲和力。此外，使用嗜硫吸附剂能达到99%以上的总蛋白质回收率，而使用苯基和辛基琼脂糖吸附剂却只有92%和75%。

TAC对广泛物种来源的不同类别和亚类的免疫球蛋白具有广泛的特异性，并且容量与其他亲和方法相似。其优点是样品制备简单，适用于各种来源的材料以及各种浓度表达的蛋白质，洗脱条件温和，不同于洗脱pH比较极端的Protein A/Protein G分离法，可能影响抗体的稳定性。

■ 基本结构

■ 产品特点

Thiophilic-Superflow Resin基于嗜硫亲和层析技术，通过砜硫醚配基吸附蛋白质。树脂对于不同蛋白质的吸附能力可以通过向混合物中加入不同的盐来操控，改变加入的盐浓度能够影响IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及 C3和C4 补体因子的亲和吸附能力。 与Protein A法相比，使用Thiophilic-Superflow Resin用于免疫球蛋白纯化有如下优势：

· 中性pH条件下纯化 · 选择性更广泛（IgY, IgM, IgE, scAb） · 高线性流速 · 结合能力强（15-20 mg抗体/ml树脂） · 可重复使用 · 纯化产物稳定性更高

■ 应用

抗体纯化，包括IgG, IgM和鸡的IgY。

■ Thiophilic-Superflow Resin的性质

性质 Thiophilic-Superflow Resin 批量法/重力流   适用 FPLC   适用 纯化规模   分析，制备 制备生产能力(mg IgG/ml树脂)   25 基质   交联的6%琼脂糖 最大线性流速 (cm/min)   5.0 最大体积流量 (ml/min)（5 x 1 cm 内径）   4.0 pH稳定性   2-10 保存   4℃，不可冷冻

■ 实验例

使用Thiophilic Resin纯化单链抗体。上图为以下组分的SDS-PAGE结果：表达scFv215的细菌裂解液 (Lane 2)，周质馏分 (Lane 3)，Ni-NTA树脂的洗脱峰部分 (Lane 4)，Thiophilic树脂的洗脱峰部分 (Lane 5). (Schulze, R. A. et al. (1994) Anal. Biochem. 220(1):212–214. Permission to reprint obtained.)。

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