- 型号 ISEQ00010
- 品牌 Merck Millipore密理博
- 【简单介绍】
密理博PVDF转印膜 孔径0.22um
Millipore 提供三种不同的 Immobilon PVDF 膜，是针对不同的蛋白质印迹应用的理想选择。 现在我们还 提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治。密理博PVDF转印膜 孔径0.22um ISEQ00010
Millipore 提供三种不同的 Immobilon PVDF 膜，是针对不同的蛋白质印迹应用的理想选择。 现在我们还 提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治。
与硝酸纤维素膜相比，Immobilon 膜具有多种优点。 它们不易破裂或卷 曲，便于裁剪且在切割过程中不会碎裂。 它们还有低背景、广泛溶剂相容性以及优异的着色能力。 此外，它们可以重复检测。
Immobilon-P 膜
· 0.45μm 孔径
· 建议用于大多数免疫印迹，特别在蛋 白质大于 20kDa 时
· Millipore 的快速免疫检测实验方法不需要膜封闭并缩短洗涤时间，将检测时间至少减少了两个小时，而不致降低灵敏 度或特异性
用于高通量实验室的印迹三明治
· 当您需要处理多个印迹时，印迹三明治是一种便利省时的选择。 我们的印迹三明 治包含多片 Immobilon-P 膜，其中插入了按规格裁切的多张层析级印迹纸。
转印滤纸
· 按照大多数免疫印迹尺寸进行裁切的层析级转印滤纸。
Immobilon-PSQ 膜
· 0.2μm 孔径和大的内表面面积
· 较其它膜具有更高的 蛋白质吸附率和测序得率
· 建议用于小于 20kDa 的印迹蛋白质
· 防止小分子量的蛋白质的渗漏
Immobilon-FL 膜
· 针对荧光应用进行优化的转印膜
· 极低的背景提高了所 有荧光检测实验的灵敏度
· 与所有常用的荧光探针（所有激发和发射波长）兼容
· 是多态性检测和化学荧光应用的理想选择密理博PVDF转印膜 孔径0.22um ISEQ00010
产品详情：
标签归档：印迹
732-0591-VWR艾万拓703级印迹纸
- 型号 732-0591
- 品牌 艾万拓 VWR
- 【简单介绍】
品牌 其他品牌 VWR艾万拓703级印迹纸适合用作蛋白和核酸印迹中的芯体。为印迹夹层中缓冲液通过凝胶流向转移膜提供了均匀的流速。另外，还适用于从玻璃支撑件中移除凝胶。
VWR艾万拓703级印迹纸 732-0591
适合用作蛋白和核酸印迹中的芯体。为印迹夹层中缓冲液通过凝胶流向转移膜提供了均匀的流速。另外，还适用于从玻璃支撑件中移除凝胶。由bai分bai棉纤维制成一致且光滑使用超纯水生产不含添加剂规格等级 703重量 185 g/m²厚度 0,38 mmHerzberg 流速 10 cm水头100 ml/250 s克列姆芯吸率测试 每升高7.5 cm用时626 sVWR艾万拓703级印迹纸 732-0591
3030-861-英国whatman层析纸3MM杂交用纸
- 型号 3030-861
- 品牌 GE whatman沃特曼
- 【简单介绍】
品牌 其他品牌 英国whatman层析纸3MM杂交用纸
【实验目的】
掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。英国whatman层析纸3MM杂交用纸 3030-861
【实验目的】
掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。
【实验原理】
将RNA变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同，但RNA变性方法与DNA不同，不能用碱变性，因为碱会导致RNA的水解。
Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平进行比较，或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。
【实验对象】
待测RNA样品。
【试剂与器材】
1． 焦碳酸二乙酯 （DEPC）。
2． 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳所需试剂。
3． 0.5 mol ／ L乙酸铵（NH4Ac）。
4． 溴化乙啶 （EB）：0.5μg／ml，溶于0.5mol／L乙酸铵中。
5． 0.05mol ／ L NaOH／1.5mol／L NaCI（选用）。
6． 0.5mol ／ L Tris·CI （pH 7.4） ／1.5mol／L NaCl（选用）。
7． 20×SSC、6×SSC和2×SSC。
8． 亚甲蓝（终浓度为0.03％），溶于0.3mol ／ L （pH 5.2）的乙酸钠缓冲液中 （选用）。
9． *纤维素 （NC） 膜或尼龙膜。
【实验方法与步骤】
1. RNA甲醛变性凝胶电泳（5V/cm, 3h）,（见附录三）。
电泳结束后用EB染色：取出凝胶，切下需要染色的泳道，放置于无RNA酶的玻璃平皿，加入0.5mol ／L乙酸铵浸泡20min。换液再浸泡20min以除去甲醛，将凝胶转入含0.5（g ／ ml EB的0.5mol ／L乙酸铵溶液中染色40min，必要时，以0.5mol ／ L乙酸铵脱色1h。
3．在紫外透射仪中使凝胶中的RNA显迹，沿凝胶的边缘放一把尺子拍照，以便随后能确定膜中的条带。
4．将非染色的部分凝胶放置于无RNA酶的玻璃平皿中，加足够的DEPC处理的去离子水浸洗几次以除去甲醛。
5. 凝胶浸泡在10倍体积的0.05mol/L NaOH ／ 1.5mol/LNaCl中30min，使RNA部分水解。接着浸泡于10倍体积的0.5mol/L Tris·C1（pH 7.4） ／ 1.5mol/LNaCl缓冲液中和30min （可选）, 将胶的多余部分切除，并切边标记。
6． 将溶液换成10倍体积的20×SSC，浸泡45min。
7． 在一玻璃或塑料平皿中放置-块比凝胶略大的有机玻璃作为平台（必要时，可并排放两块或更多） ，加入足够的20×SSC以使平台半淹没在液体中。
8． 构筑转移平台，剪3张与平台同样大小的Whatman 3MM滤纸，放在平台表面，以20×SSC润湿。把凝胶置于滤纸表面，用玻棒滚动表面以压挤去除气泡。切4条塑料保鲜膜覆盖在凝胶的边缘。
9．剪一片与凝胶暴露面积大小相当的尼龙膜或NC膜，在一个无RNA酶的玻璃平皿中加入约0.5mm深的用DEPC处理的去离子水，将膜漂在水面使之润湿，直至膜沉没在水中。如果是尼龙膜，只需让膜在水中泡上5min，如果是NC膜，则换成20×SSC再浸泡10min。
10．将润湿的膜放在凝胶表面，用干净刀片切去滤膜一角，使其与凝胶的切角相对应，排去气泡，以20×SSC漂洗膜表面。切 3张与膜大小相当的湿润的Whatman3MM滤纸，放于膜的表面。赶出气泡。然后将与膜大小相当的纸巾整齐地堆放在滤纸的表面，高约4cm。
11． 在纸堆的顶部放一块玻璃平板，压一重物 （0.2～0.4kg），放置12h左右。
12．拆卸转移装置，回收膜和压扁了的凝胶。在膜上用铅笔标上加样孔的位置和方向。
13．用2×SSC洗膜，然后放于滤纸上，让膜于室温干燥30分钟。NC膜则应夹于2张Whatman 3MM滤纸之间，80℃真空干烤2h。将干的转印膜置于可透过紫外线的塑料保鲜膜中，带有RNA的一面朝下，置于紫外透射仪（波长在254nm）上，以合适的照射强度进行紫外线交联,以固定RNA。备作核酸杂交。
14． 凝胶可按步骤2，用EB染色以检查转印效率。
【注意事项】
1．为了抑制RNA酶的活性，所有用于Northern印迹的溶液，均须用经DEPC处理过的无菌去离子水配制。DEPC是一种致癌剂，须小心操作。尤其在用DEPC处理乙酸铵时，因为DEPC能与铵离子反应产生氨基甲酸乙酯（一种潜在的致癌剂），故在以DEPC处理乙酸铵时，更须分外小心。
2．RNA极易被环境中存在的RNA酶降解，因此须特别警惕RNA酶的污染
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。
英国whatman层析纸3MM杂交用纸 3030-861 订货信息：
3030-861-GE WHATMAN 3MM层析滤纸
- 型号 3030-861
- 品牌 GE whatman沃特曼
- 【简单介绍】
GE WHATMAN 3MM层析滤纸3030-861
Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平进行比较，或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。GE WHATMAN 3MM层析滤纸3030-861
【实验目的】
掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。
【实验原理】
将RNA变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同，但RNA变性方法与DNA不同，不能用碱变性，因为碱会导致RNA的水解。
Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平进行比较，或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。
【实验对象】
待测RNA样品。
【试剂与器材】
1． 焦碳酸二乙酯 （DEPC）。
2． 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳所需试剂。
3． 0.5 mol ／ L乙酸铵（NH4Ac）。
4． 溴化乙啶 （EB）：0.5μg／ml，溶于0.5mol／L乙酸铵中。
5． 0.05mol ／ L NaOH／1.5mol／L NaCI（选用）。
6． 0.5mol ／ L Tris·CI （pH 7.4） ／1.5mol／L NaCl（选用）。
7． 20×SSC、6×SSC和2×SSC。
8． 亚甲蓝（终浓度为0.03％），溶于0.3mol ／ L （pH 5.2）的乙酸钠缓冲液中 （选用）。
9． *纤维素 （NC） 膜或尼龙膜。
【实验方法与步骤】
1. RNA甲醛变性凝胶电泳（5V/cm, 3h）,（见附录三）。
电泳结束后用EB染色：取出凝胶，切下需要染色的泳道，放置于无RNA酶的玻璃平皿，加入0.5mol ／L乙酸铵浸泡20min。换液再浸泡20min以除去甲醛，将凝胶转入含0.5（g ／ ml EB的0.5mol ／L乙酸铵溶液中染色40min，必要时，以0.5mol ／ L乙酸铵脱色1h。
3．在紫外透射仪中使凝胶中的RNA显迹，沿凝胶的边缘放一把尺子拍照，以便随后能确定膜中的条带。
4．将非染色的部分凝胶放置于无RNA酶的玻璃平皿中，加足够的DEPC处理的去离子水浸洗几次以除去甲醛。
5. 凝胶浸泡在10倍体积的0.05mol/L NaOH ／ 1.5mol/LNaCl中30min，使RNA部分水解。接着浸泡于10倍体积的0.5mol/L Tris·C1（pH 7.4） ／ 1.5mol/LNaCl缓冲液中和30min （可选）, 将胶的多余部分切除，并切边标记。
6． 将溶液换成10倍体积的20×SSC，浸泡45min。
7． 在一玻璃或塑料平皿中放置-块比凝胶略大的有机玻璃作为平台（必要时，可并排放两块或更多） ，加入足够的20×SSC以使平台半淹没在液体中。
8． 构筑转移平台，剪3张与平台同样大小的Whatman 3MM滤纸，放在平台表面，以20×SSC润湿。把凝胶置于滤纸表面，用玻棒滚动表面以压挤去除气泡。切4条塑料保鲜膜覆盖在凝胶的边缘。
9．剪一片与凝胶暴露面积大小相当的尼龙膜或NC膜，在一个无RNA酶的玻璃平皿中加入约0.5mm深的用DEPC处理的去离子水，将膜漂在水面使之润湿，直至膜沉没在水中。如果是尼龙膜，只需让膜在水中泡上5min，如果是NC膜，则换成20×SSC再浸泡10min。
10．将润湿的膜放在凝胶表面，用干净刀片切去滤膜一角，使其与凝胶的切角相对应，排去气泡，以20×SSC漂洗膜表面。切 3张与膜大小相当的湿润的Whatman3MM滤纸，放于膜的表面。赶出气泡。然后将与膜大小相当的纸巾整齐地堆放在滤纸的表面，高约4cm。
11． 在纸堆的顶部放一块玻璃平板，压一重物 （0.2～0.4kg），放置12h左右。
12．拆卸转移装置，回收膜和压扁了的凝胶。在膜上用铅笔标上加样孔的位置和方向。
13．用2×SSC洗膜，然后放于滤纸上，让膜于室温干燥30分钟。NC膜则应夹于2张Whatman 3MM滤纸之间，80℃真空干烤2h。将干的转印膜置于可透过紫外线的塑料保鲜膜中，带有RNA的一面朝下，置于紫外透射仪（波长在254nm）上，以合适的照射强度进行紫外线交联,以固定RNA。备作核酸杂交。
14． 凝胶可按步骤2，用EB染色以检查转印效率。
【注意事项】
1．为了抑制RNA酶的活性，所有用于Northern印迹的溶液，均须用经DEPC处理过的无菌去离子水配制。DEPC是一种致癌剂，须小心操作。尤其在用DEPC处理乙酸铵时，因为DEPC能与铵离子反应产生氨基甲酸乙酯（一种潜在的致癌剂），故在以DEPC处理乙酸铵时，更须分外小心。
2．RNA极易被环境中存在的RNA酶降解，因此须特别警惕RNA酶的污染
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。
GE WHATMAN 3MM层析滤纸3030-861
Immuno-enhancer 仅需作为抗体稀释液即可起效！提高蛋白印迹和ELISA的检测灵敏度。
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
Immuno-enhancer
仅需作为抗体稀释液即可起效！提高蛋白印迹和ELISA的检测灵敏度。
本产品是适用于促进蛋白印迹、斑点印迹和ELISA抗原-抗体反应的试剂，用于反应性较低的抗体时效果明显，可获得高S/N比。
由一抗反应用的Reagent A和二抗反应用的Reagent B构成，可以使用原液作为抗体稀释液使用。
◆特点
● 增强信号
● 高S/N比
● 无需特别的操作。可替代抗体稀释液
◆产品构成
※1次的使用量为5 mL时的使用次数。
|
2次用 |
10次用 |
40次用 |
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Reagent A |
10 mL |
50 mL |
200 mL |
|
Reagent B |
10 mL |
50 mL |
200 mL |
◆使用方法
蛋白印迹
※抗原-抗体反应在第1步就进行时（使用直接标记的一抗直接检测）时，抗体用Reagent B稀释。
ELISA
※使用一抗，二抗时，一抗用Rwagent A，二抗用Reagent B进行稀释。
◆应用实例
应用实例1：检测A549细胞裂解液中的EB1
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将5 μg（×1）或10 μg（×2）A549细胞裂解液进行SDS-PAGE电泳后，转至硝酸纤维素膜，封闭后进行蛋白印迹。 使用3%脱脂乳TBS-T溶液与本产品进行对照。 一抗：抗EB1，兔（1：500） 2小时 二抗：HRP标记抗兔IgG抗体（1：7,000） 1小时 曝光时间：10 秒 |
应用实例2：检测出HeLa细胞裂解液中的肌动蛋白
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HeLa细胞裂解液（原液，稀释1/2，1/4，1/8）进行SDS-PAGE电泳后，转至PVDF膜，封闭后进行蛋白印迹。 使用TBS-T溶液和本产品进行对照。
一抗：抗肌动蛋白，山羊（0.5 μg/mL） 1小时 二抗：HRP标记抗山羊IgG抗体（1：10,000） 1小时 曝光时间：5 min |
应用实例3：检测Atg+ 和Atg– 细胞中的LC3
|
|
用12.5%SDS-PAGE分离细胞的提取液，转至PVDF膜后，用Reagent A稀释并进行蛋白质印迹。 用含有1%BSA的20 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）-0.15mol/L NaCl-0.1% NaN3作为对照 二抗用20 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）-0.15 mol/L NaCl-0.05% Tween20稀释。
一抗：抗肌动蛋白，山羊（0.5 μg/mL） 1小时 二抗：HRP标记抗山羊IgG抗体（1：10,000） 1小时 曝光时间：5 min |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 294-68601 | Immuno-enhancer 免疫印迹抗原抗体反应促进剂 |
2 test | 蛋白印迹用 |
| 290-68603 | Immuno-enhancer 免疫印迹抗原抗体反应促进剂 |
10 test | 蛋白印迹用 |
| 298-68604 | Immuno-enhancer 免疫印迹抗原抗体反应促进剂 |
40 test | 蛋白印迹用 |
| 091-05811 | Immuno-enhancer Reagent A | 200 mL | 蛋白印迹用 |
| 098-05821 | Immuno-enhancer Reagent B | 200 mL | 蛋白印迹用 |
免疫印迹显色试剂盒（抗小鼠） Chromogenic Western Blot Kit (Anti-Mouse)
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
免疫印迹显色试剂盒（抗小鼠）
Chromogenic Western Blot Kit (Anti-Mouse)
信号、灵敏度更强的蛋白印迹显色试剂盒
Chromogenic Western Blot kit with increased signal and sensitivity
● 更灵敏的检测——能够检测较低浓度的蛋白质
● 易于使用——所有试剂均可随时使用或即可稀释，节省宝贵的时间
● 适应性好——适用于各种小鼠来源的蛋白质
显色蛋白质印迹试剂盒（抗小鼠）能通过免疫检测来识别蛋白质印迹上的一抗。该试剂盒内有完整的一套试剂，包含经优化的即用型或即可稀释试剂。
高灵敏度，可检测ng级蛋白，低表达蛋白无需纯化或浓缩样品，节省1~2h实验时间。
经过12.5 μM依托泊苷处理18 h的Jurkat细胞及未经处理对照的12 μg的总细胞裂解液上样
◆产品详情
反应时间：1小时
应用：免疫印迹法
物种反应性：小鼠
运输： 蓝冰
短期储存：+4°C
长期储存：+4°C
科学背景：免疫印迹法是一种常用的实验室技术，用于检测组织匀浆或提取物样品中的蛋白。由于具灵活性，它广泛应用于分子生物学和生物化学，
包括对翻译后修饰的检测以及对蛋白克隆的检验。根据蛋白质条带的大小和颜色强度，即可对蛋白质进行半定量的估计。
◆试剂盒组成
1. Antibody Diluent, 4 x 90 mL
用于稀释一抗和二抗的稀释液。
2. NBT/BCIP, 100 mL
即用型印迹显色溶液。
3. Wash Buffer (10×), 2 x 100 mL
用于洗涤膜的10×Wash Buffer。
4. Secondary Antibody (Anti-Mouse), 4.5 mL
碱性磷酸酶偶联的抗小鼠二抗，用于在Western Blot中与小鼠源的一抗检测。
◆实验流程
试剂准备
二抗（抗小鼠）
在抗体阻断剂/稀释剂中以1：100-1000的稀释度制备二抗（抗小鼠）。例如，对于1：100的稀释度来说，将100 µL抗体加入到10 mL的抗体阻断剂/稀释剂中。
Wash Buffer（1×）
用90 mL去离子水稀释10 mL试剂盒中提供的10×Wash Buffer来制备1×Wash Buffer。 该缓冲液可以在室温下储存，可储存直至试剂盒有效期或储存3个月，以较早者为准。
◆实验流程
1. 在一抗孵育之后，将膜置于合适的塑料托盘中，在轨道式振荡器或摆动振荡器轻轻用1×Wash Buffer洗涤3-4次，每次10分钟（每次洗涤加入
约10 mL的 1×Wash Buffer）。
2. 在最后一次洗涤期间，如前文所述制备二抗（抗-小鼠）。
3. 将带有二抗溶液的膜置于轨道式振荡器或摆动振荡器上适度摇荡，在室温下孵育1小时。
4. 在轨道式振荡器或摆动振荡器轻轻用1×Wash Buffer洗涤3-4次，每次10分钟（每次洗涤加入约10 mL的 1×Wash Buffer）。
5. 将膜置于黑暗中（用铝箔覆盖住托盘），加入NBT/BCIP（碱性磷酸酶显色试剂）孵育，直到膜上出现紫色条带（通常为10秒至2.5分钟）。
期间不要摇动。
6. 在蒸馏水中洗涤3-5次。
7. 为获得理想图像效果，请在第6步之后对膜进行扫描。
8. 如有必要，可使用滤纸或将膜置于红外灯下使膜干燥，并储存于4°C条件下。
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
ENZ-KIT182-0001 |
Chromogenic Western Blot Kit (Anti-Mouse) |
1 Kit |
◆相关产品
一抗来源并非小鼠？请用下面列表中的二抗替换本试剂盒中的二抗：
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产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
ENZ-ACC103-0150 |
POLYVIEW® PLUS HRP (anti-rabbit) reagent |
150 test |
|
ENZ-ACC104-0150 |
POLYVIEW® PLUS HRP (anti-mouse) reagent |
150 test |
|
ENZ-ACC110-0150 |
POLYVIEW® PLUS AP (anti-rabbit) reagent |
150 test |
|
ENZ-ACC114-0150 |
POLYVIEW® PLUS AP (anti-Mouse) Reagent |
150 test |
想做多重检测？请看下面列表中的其他颜色的显色剂:
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产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
ADI-950-140-0030 |
HIGHDEF red IHC chromogen (AP) |
30 mL |
|
ADI-950-141-0030 |
HIGHDEF red IHC chromogen (AP, plus) |
30 mL |
|
ADI-950-150-0030 |
HIGHDEF blue IHC chromogen (AP) |
30 mL |
|
ADI-950-151-0030 |
HIGHDEF blue IHC chromogen (HRP) |
30 mL |
|
ADI-950-170-0030 |
HIGHDEF yellow IHC chromogen (HRP) |
30 mL |
|
ADI-950-171-0030 |
HIGHDEF black IHC chromogen (HRP) |
30 mL |
|
ADI-950-210-0030 |
HIGHDEF IHC chromogen substrate (AEC, stable) |
30 mL |
|
ENZ-ACC130-0030 |
HIGHDEF® Green AP Chromogen/Substrate |
30 mL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |