Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒

	货号	15991	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 tests	价格	5136
	Ex (nm)	695	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测MDA的试剂盒，脂质过氧化物的特征在于不饱和脂肪酸，磷脂，糖脂，胆固醇酯和胆固醇的氧化降解。丙二醛（MDA）是脂质过氧化最常用的生物标志物之一。 MDA的测量历史上依赖于与硫代巴比妥酸（TBA）的反应以产生可以在532nm处比色测量的产物或在Ex / Em = 530550nm处以荧光法测量的产物。但是，TBA分析具有相当多的限制。（1）该反应对MDA没有特异性。（2）TBA-MDA反应需要在酸性条件下进行。（3）测定需要在高温下进行，一般在90-100ºC。由于这些限制，商业的基于TBA的MDA测定非常繁琐。这种Cell Meter 比色脂质过氧化（MDA）定量试剂盒提供了最快速，最方便的方法来测量MDA而不需要TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应产生蓝色产物，用吸光度酶标仪在695 nm测量。该测定非常快速并且对MDA具有特异性，而与其他醛的干扰很小。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准和/或测试样品（50 µL）
2.准备并添加MDA Blue （10 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液（40 µL）
5.监测OD在695 nm处的增加

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
MDA标准储备液（100 mM）：
将100 µL ddH2O加入MDA标准品（组分C）中，并充分混合。 注意：未使用的MDA储备溶液应以-20℃的形式等次储存。

2.标准溶液配制

MDA标准
将4μLMDA标准溶液（100 mM）添加到996μL稀释缓冲液（组分B）中以获得MDA标准溶液（400μM）。

样品操作及实验分析

表1.在透明的底部96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准（MDA1-MDA7）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

MDA测定

1.加入50 µL MDA标准品，空白对照和测试样品以清除底部96孔微孔板（如表1和表2所示）。

2.将10 µL /孔的MDA Blue （组分A）添加到MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。 注意：对于384孔板，将25 µL样品，5 µL MDA Blue 溶液添加到每个孔中。 注意：请分装成一次性使用的组分A，并在-20ºC下闲置存放，并避免光照。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.加入40 µL反应溶液（组分D）使总测定体积为100 µL /孔。 注意：对于384孔板，请添加20 µL反应溶液（组分D），使总测定体积为50 µL /孔。

5.使用吸光度板读数器监控吸光度，并在695〜700 nm的OD处进行路径检查校正。

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
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Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
Journal: J Lipid Res (2013): 852

Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
Journal: Life Sci (2007): 51

Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
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[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

活性氧 ROS Brite 570

	货号	16000	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	2544
	Ex (nm)	555	Em (nm)	569
	分子量	732.81	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针570是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂，活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如：超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性，因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物，它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下（如紫外线照射或者高温环境下），ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害，日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ，如电磁辐射。在氧化应激条件下，活性氧产量大幅度增加， 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关，例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 570试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针，可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 570试剂是没有荧光的，在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的ROS Brite 活性氧荧光探针570。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品操作及实验分析

1）在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成5至10 µM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞（例如，使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时）。

3）将细胞与ROS Brite （5-10 µM，来自步骤＃1）在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意：所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同，需要测试不同的浓度才能获得最佳剂量。 对于cat＃16053，可能使用的浓度较低，例如0.5-5 uM。

4）用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5）用适当的荧光仪器（例如荧光显微镜，流式细胞仪或体内成像仪器）分析细胞。

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

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