日度归档：2023年11月28日

Carbomix Ca–NP 4.6×300 mm Carbomix 离子交换色谱柱 品牌：Sepax

发表于由

品牌：Sepax
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

251005-4630

 – 1根 – 咨询 – –


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磷酸化Erk5 (Thr218/Tyr220) 抗体 Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody

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磷酸化Erk5 (Thr218/Tyr220) 抗体

Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody

详细描述：

应用范围：W； 反应种属：Human,Mouse,Rat,Monkey； 标记：无标记。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
3371L 磷酸化Erk5 (Thr218/Tyr220) 抗体 300µl 咨询客服
3371S 磷酸化Erk5 (Thr218/Tyr220) 抗体 100µl 咨询客服

Wakopak Wakosil-II 3C18 HG 4.6*10mm 高纯硅胶柱3C18 HG 品牌：FUJIFILM Wako

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Wakopak Wakosil-II 3C18 HG 4.6*10mm

高纯硅胶柱3C18 HG

品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

233-62737

 No grade 1 column(W) –

Wakopak Wakosil-II 3C18 HG 4.6*10mm 高纯硅胶柱3C18 HG 品牌：FUJIFILM Wako

 – –


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Protonex 绿 500 pH荧光探针 货号21215-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Protonex 绿 500 pH荧光探针

Protonex 绿 500 pH荧光探针

Protonex 绿 500 pH荧光探针 货号21215 货号 21215 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2544
Ex (nm) 445 Em (nm) 503
分子量 398.46 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Protonex 绿色染料显示出pH依赖性荧光。与大多数现有的荧光染料在较高的pH值下具有更高的荧光性不同，酸性条件可以增强Protonex Green染料的荧光性。当pH从中性降低到酸性时，Protonex Green染料的荧光增加。细胞外部缺乏荧光，省去了洗涤步骤。Protonex Green染料提供了一个强大的工具来监控酸性细胞区室，例如内体和溶酶体。Protonex 绿色染料在细胞外不发荧光，但在酸性隔室（例如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的绿色荧光。这款Protonex Green能够特异性检测细胞酸性隔室，从而减少了信号变化并提高了成像或流量应用的准确性。

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产品说明书

操作步骤

在制备Protonex 工作溶液之前，请根据需要处理细胞。

 1.在DMSO中准备1至10 mM Protonex 储备溶液。通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成0.1至10 µM的工作溶液。

 2.根据需要处理细胞。

 3.将细胞与Protonex 工作溶液在37ºC下孵育15分钟至2小时。

 4.用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

 5.用装有正确滤光片组的合适荧光仪器分析细胞

 

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

说明书
Protonex 绿 500 pH荧光探针.pdf

Sodium Dextran Sulfate 5,000 葡聚糖硫酸钠（DSS）5,000 品牌：Wako

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品牌：Wako
CAS No.：9011-18-1
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

197-08362

 for Biochemistry 25 g – 1,070.00 – –


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Protonex 绿 500, SE pH荧光探针 货号21216-AAT Bioquest荧光染料

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Protonex 绿 500, SE pH荧光探针

Protonex 绿 500, SE pH荧光探针

Protonex 绿 500, SE pH荧光探针 货号21216 货号 21216 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2544
Ex (nm) 445 Em (nm) 503
分子量 539.54 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：21216

产品名称：Protonex 绿 500, SE pH荧光探针

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：539.54

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：443

发射波长(nm)：505

 

产品介绍

Protonex 绿 500, SE pH荧光探针是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Protonex 绿色染料显示出pH依赖性荧光。与大多数现有的荧光染料在较高的pH值下具有更高的荧光性不同，酸性条件可以增强Protonex Green染料的荧光性。当pH从中性降低到酸性时，Protonex Green染料的荧光增加。细胞外部缺乏荧光，省去了洗涤步骤。Protonex Green染料提供了一个强大的工具来检测酸性细胞区室，例如内体和溶酶体。Protonex 绿色染料在细胞外不发荧光，但在酸性区室（例如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的绿色荧光。这款Protonex Green能够特异性检测细胞酸性区室，从而减少了信号变化并提高了成像或流量应用的准确性。Protonex Green具有类似于FITC的光谱特性，从而使FITC的通用滤光片组易于用于Protonex Green的测定。这种具有氨基反应性的Protonex Green衍生物可用于制备Protonex Green偶联物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Protonex 绿 500, SE pH荧光探针。 

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参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

 

相关产品

产品名称 货号
Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用 Cat#21217

说明书
Protonex 绿 500, SE pH荧光探针.pdf

Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用 货号21217-AAT Bioquest荧光染料

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Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用

Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用

Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用 货号21217 货号 21217 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2544
Ex (nm) 445 Em (nm) 503
分子量 ~11000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Protonex 绿 500 Dextran 是美国AAT Bioquest生产的用于检测胞吞的荧光探针，Protonex Green染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Green染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Green染料的荧光增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex 绿色染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Green染料在细胞外是非荧光的，但在酸性区室（如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的绿色荧光。Protonex Green可以对细胞酸性隔室进行特异性检测，降低信号可变性，提高成像或流量应用的准确度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Protonex 绿 500 Dextran 检测胞吞作用。 

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产品说明书

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如，将贴壁细胞在生长培养基中以40,000至80,000细胞/孔/100μL过夜  

对于384孔板，96孔或10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定最佳细胞密度。

 

2.准备RatioWorks Protonex 绿色葡聚糖装载解决方案：

2.1在1 mL 无菌水或Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）中制备1mg / mL Protonex 绿色葡聚糖原液。应立即使用原液。任何未使用的溶液需要等分并在< -20 o C重新冷冻。

注意：避免反复冻融循环，避免光照。

2.2在HHBS中制备20-100ug / mL Protonex 绿色葡聚糖加载溶液。

 

3.运行内吞作用测定

3.1取出培养基，将100μL/孔（96孔板）或25μL /孔（384孔板） Protonex Green Dextran 上样溶液加入细胞板（步骤2.2）。

注1：如果您的化合物干扰血清，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基（96孔板100μL/孔或染料加载前384孔板25μL/ 孔）。

注2： Protonex 绿色葡聚糖从早期内体快速运输到晚期内体，随后可能与溶酶体融合。为了帮助在内体中可视化Protonex 绿色葡聚糖，我们建议增加标记浓度并减少加载时间，并立即成像。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育5至20分钟。

3.3用HHBS或生长培养基清洗并更换染料加载溶液。

3.4通过监测Ex / Em = 443/505 nm处的荧光来进行胞吞作用测定。

 

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

 

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产品名称 货号
Protonex 绿 500, SE pH荧光探针 Cat#21216

说明书
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pCAG-Hyg TARGET tag-C C端插入TARGET标签的pCAG-Hyg 载体 品牌：Wako

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品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

169-26421

 for Genetic Research 20 ug –

pCAG-Hyg TARGET tag-C C端插入TARGET标签的pCAG-Hyg 载体 品牌：Wako

 – –


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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 该载体可转染动物细胞进行短暂表达，载体上的TARGET Tag位于多克隆位点的C端。载体大小: 6.0 kbp 组成: 10 mM Tris-HCl, 1mM EDTA 浓度: 0.5 μg/μl 抗生素标记：潮霉素 B

PrimeSurface 96V plate PrimeSurface 96V 板 品牌：Sumitomo Bakelite

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PrimeSurface 96V plate

PrimeSurface 96V 板

品牌：Sumitomo Bakelite
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

MS-9096VZ

 – 20个 –

PrimeSurface 96V plate PrimeSurface 96V 板 品牌：Sumitomo Bakelite

 – –


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1-(3-Isothiocyanatobenzyl)-4-[2-(3,4-dihydro-2H-1-benzopyran-6-yl)-5-oxazolyl] pyridinium bromide 品牌：Chemodex

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品牌：Chemodex
CAS No.：155863-01-7
储存条件：-20°C
纯度：>90% (HPCE)
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

CDX-I0034-M250

 – 250 mg – 7,250.00 – –


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Wakogel 50NH2 氨丙基硅胶填料 品牌：Wako

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品牌：Wako
CAS No.：N/A
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

239-02311

 for Column Chromatography 100 g – 900.00 – –


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SEEBRIGHT® Green 496 dUTP 绿色 496 dUTP 品牌：Enzo

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品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：≥93% (HPLC)
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-42831

 – 25 nmol – 4,140.00 – –


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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 浓度: 1mM 
组成：液体 溶解性：溶解于水 
纯度:≥93% (HPLC) 
离子交换色谱纯化。
用途：标记FISH探针的DNA

Carbomix Ca–NP 7.8×50 mm Carbomix 离子交换色谱柱 品牌：Sepax

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品牌：Sepax
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

251005-7805

 – 1根 – 咨询 – –


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Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 货号21225-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 货号21225 货号 21225 存储条件 避免光照, 在2-8度冷藏保存
规格 100 Tests 价格 3840
Ex (nm) 576 Em (nm) 597
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的吞噬检测试剂盒，吞噬作用定义为细胞对质膜内的颗粒的细胞摄取。通过吞噬和破坏入侵的微生物，吞噬作用的过程对先天免疫反应至关重要。通过清除凋亡小体，维持组织稳态和重塑也需要吞噬作用。吞噬作用的摄取机制取决于颗粒的大小，受体 – 配体相互作用和细胞骨架的参与。一旦内化，吞噬体与溶酶体融合形成用于消化的第二吞噬溶酶体，导致pH逐渐降低。我们的Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒使用独特的pH依赖性Protonex 600红色染料。与大多数现有荧光染料不同，Protonex 600染料在细胞外是非荧光的。然而，当它们在检测酸性区室如内体和溶酶体时，荧光会大幅度增加。这种特性使其易于使用而无需台盼蓝淬灭步骤和用于研究吞噬作用。 Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，可通过荧光显微镜同时检测活细胞和吞噬作用过程。该测定还可以适用于荧光酶标仪和流式细胞术检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒。 

 

适用仪器

荧光显微镜  
推荐孔板： 黑色透明
仪器规格： Texas Red/FITC滤波片

产品说明书

操作步骤

1.将Cytochalasin D作为阳性对照或DMSO或您的测试化合物添加到每个孔中。 注意：测定中使用的细胞松弛素D的浓度应针对每个单独的细胞系进行优化。

2.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

3.每孔加入12.5μLProtonex 600 Red-Latex Beads Conjugate溶液（12X）。

4.将板在细胞培养箱中孵育4小时。 注意：每个细胞系的用户应优化孵育时间。

5.每孔加入12.5μLCytoTrace Green工作溶液（12X）。

6.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

7.用1X PBS洗涤板两次。

8.用德克萨斯红过滤器（Ex / Em = 570 / 600nm）和具有FITC过滤器的CytoTrace Green（Ex / Em = 490 / 525nm）观察细胞内的吞噬作用。

 

数据分析

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 货号21225

图示：使用Cell Meter 荧光吞噬作用测定试剂盒（Cat＃21225）检测RAW 264.7细胞中的吞噬作用。 将RAW 264.7细胞与（B）或不用（A）细胞松弛素D孵育30分钟，然后加入Protonex 600 Red-Latex Beads在生长培养基中并孵育4小时，然后加入Cell Tracker并孵育30分钟。 使用Keyence荧光显微镜拍摄图像。

 

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

说明书
Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 .pdf

CRISPR/Cas9腺相关病毒系统酶试剂盒Takara

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CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632608 AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) 1 System ￥10,846 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632609 AAVpro CRISPR/Cas9 Vector System 1 System ￥6,766 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632618 AAVpro CRISPR/SaCas9 Vector System 1 System ￥5,931 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
Clontech 632619 AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) 1 System ￥10,643 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
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          基因敲除    
          ↗ CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 → CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 → CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 → CRISPR/Cas9腺相关病毒系统 → CRISPR/Cas9腺相关病毒系统            
  基因敲入        
          ↘ CRISPR/Cas9腺相关病毒系统        
 
 
重组腺相关病毒基因编辑系统（AAV2）
AAVpro® CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2)
· 以病毒传递的方式导入Cas9基因和sgRNA，可以实现在难转染哺乳动物细胞中进行基因编辑，包括分裂细胞和非分裂细胞
· AAV病毒导入Cas9基因可以排除基因组整合和Cas9基因持续表达所带来的影响，降低脱靶效应
· 包装辅助质粒表达人microRNA miR-342有助于显著提高AAV病毒滴度
 
■ 产品说明：
我们可以提供两种CRISPR/Cas9 AAV2病毒粒子制备系统，无需辅助病毒，可采用Cas9进行基因编辑：AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System和AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System。这两个试剂盒都可以用于将Cas9表达框和一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)导入至哺乳动物细胞中。Cas9基因序列来源于酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes）或者金黄色酿脓葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。AAV系统可用于广泛哺乳动物细胞类型，有效实现体外基因组修饰。CRISPR/Cas9系统采用两个AAV载体导入较大的S. pyogenes Cas9 (SpCas9)，而由于SaCas9相对较小，CRISPR/SaCas9系统可以借助单个载体实现导入。sgRNAs可被直接一步克隆至预线性化的pAAV-Guide-it-Down或者pAAV-Guide-it-1质粒。无需辅助病毒，只需与试剂盒所包含的辅助质粒共转染HEK 293T细胞即可制备高滴度的AAV2病毒粒子。AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (Code No. 632608) 和AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System (Code No. 632619) 都是完整试剂盒，包含了sgRNAs克隆和AAV病毒粒子制备所需要的所有试剂。同样也包含了有效分离提取AAV2病毒粒子的AAV Extraction Solution。需要注意的是，SpCas9和SaCas9即使作用于基因组的同一区域，其靶向效率也是不同的–详细信息请见实验例。
 
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free Systems (with S. pyogenes Cas9)
· SpCas9基因被分成两段分别承载在pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down两个质粒上，两段SpCas9基因之间有1.6-kb的区域是同源的，同源区域在靶细胞中通过同源重组形成全长SpCas9基因
· SpCas9使用的前间区序列邻近基序(Protospacer Adjacent Motif,PAM)序列为NGG，其中N代表任意碱基-详细信息请见AAVpro CRISPR/Cas9 Systems使用手册
· 所提供的pAAV-Guide-it-Down质粒是预线性化的，有利于一步克隆sgRNAs，降低由于质粒自连所产生的背景
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free Systems (with S. aureus Cas9)
· SaCas9基因组装在单个质粒pAAV-Guide-it-1上，同时也包含了sgRNA表达框
· SaCas9 (来自于金黄色酿脓葡萄球菌)使用的前间区序列邻近基序(Protospacer Adjacent Motif,PAM) 序列为NNGRR(T)，其中N代表任意碱基，R代表A或者G碱基，(T)具有较强的偏好性-详细信息请见AAVpro CRISPR SaCas9 Systems使用手册
· 所提供的pAAV-Guide-it-1质粒是预线性化的，有利于一步克隆sgRNAs，降低由于质粒自连所产生的背景
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图1. 全长Cas9和sgRNA产生。
 
pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down载体分别编码被删减的Cas9基因上游和下游部分，两者之间有1.6-kb同源重叠区域。将一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)克隆至pAAV-Guide-it-Down（见载体图谱）。pAAV-Guide-it-Up或者pAAV-Guide-it-Down与pRC2-mi342和pHelper载体共同转染HEK 293T细胞制备AAV2-Up或者AAV2-Down病毒。采用AAV Extraction Solution分离提取制备产生的病毒粒子。AAV2-Up和AAV2-Down病毒共转导靶细胞。AAV基因组处理过程中会在1.6-kb同源重叠区域发生同源重组，形成全长Cas9基因，转录并翻译成Cas9蛋白质。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图2. AAV载体重组产生全长Cas9和sgRNA。
 
Cas9基因较大导致不能将其包装至单个AAV病毒粒子中。pAAV-Guide-it-Up和pAAV-Guide-it-Down载体分别包含Cas9经过删减的上游和下游部分，这两部分之间具备1.6-kb同源重叠区域。采用两个质粒分别进行病毒包装制备病毒。制备完成的病毒共同转导靶细胞，通过同源重组形成全长Cas9基因（4.1 kb）。在靶细胞中表达的功能Cas9蛋白质由sgRNA导向至合适的基因型位点。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图3. pAAV-Guide-it-Up载体图谱。
 
这是pAAV-Guide-it-Up载体的结构。这个载体包含在AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System中，此系统用于制备AAV病毒粒子实现Cas9和sgRNA基因的细胞导入，这两者是进行CRISPR/Cas9基因编辑所必需的组分。由于Cas9基因较大，使得其不能包装在单个AAV病毒粒子中。为了可以实现AAV介导的Cas9基因的导入，此系统采用了两个单独的Cas9质粒。pAAV-Guide-it-Up载体包含一段被删减的Cas9基因上游部分（3,106 bp），由CMV启动子驱动编码Cas9 N端1,035个氨基酸。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图4. pAAV-Guide-it-Down载体图谱。
 
这是预线性化的pAAV-Guide-iT-Down载体的结构。这个载体包含在AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free system中，此系统用于制备AAV病毒粒子实现Cas9和sgRNA基因的细胞导入，这两者是进行CRISPR/Cas9基因编辑所必需的组分。由于Cas9基因较大，使得其不能包装在单个AAV病毒粒子中。为了可以实现AAV介导的Cas9基因的导入，此系统采用了两个单独的Cas9质粒。pAAV-Guide-it-Down载体包含了一段被删减的Cas9基因下游部分（2,616 bp），编码Cas9 C端872个氨基酸。一个用户自定义的单向导RNA (sgRNA)可被克隆至pAAV-Guide-it-Down载体中，位于人U6启动子的下游。要构建这个载体，需要先将作用于基因组靶位点的一对寡核苷酸链（向导序列）退火形成双链，然后将形成的双链DNA克隆至预线性化的载体中。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图5. HEK 293T细胞制备的AAV2-Up和AAV2-Down 病毒粒子的基因组滴度相同。
 
采用AAVpro Extraction Solution从HEK 293T细胞中分离提取AAV2-Up和AAV2-Down病毒粒子（参考protocol overview）。采用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR)检测基因组滴度。3次平行实验的结果表明所获得的AAV2-Up和AAV2-Down基因组滴度相近。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图6. 与质粒转染相比，尤其针对难转染的细胞系，AAVpro CRISPR/Cas9系统会产生更多的基因突变。
 
转导前1天将所标注的细胞类型(1.0 x 105 cells)接种至12孔板中。作用于CCR5 基因的AAV2-Up和AAV2-Down病毒粒子以1.0 x 105 MOI（基因组滴度）转导靶细胞。72小时后，收集细胞并采用Guide-it Mutation Detection Kit进行分析。作为对照，采用Xfect Transfection Reagent转染编码Cas9和靶向CCR5基因的向导序列的质粒(P: 2.5 μg)至靶细胞。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图7. AAVpro CRISPR/SaCas9系统通过单个载体表达SaCas9和sgRNA。
 
pAAV-Guide-it-1以预线性化形式提供，用于插入sgRNA靶序列（橘色标注部分为sgRNA）。采用此载体包装获得的病毒转导靶细胞时，靶细胞会同时表达进行基因编辑的SaCas9和sgRNA。
 
CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
图8. Guide-it Mutation Detection Kit平行比较采用AAVpro CRISPR/Cas9 System (SpCas9)和AAVpro CRISPR/SaCas9 System产生的基因组修饰。
 
以CYP2外显子1两个不同的基因组区域为靶位点，孔1和2显示每个酶的检测结果，凝胶图下面的图显示靶区域。每个细胞类型的突变百分比标注在每个孔下面。转导前1天将3种不同细胞系分别接种1 x 105个细胞至12孔板。采用两载体系统AAVpro CRISPR/Cas9 System (SpCas9)或者单载体系统AAVpro CRISPR/SaCas9 System制备的病毒粒子以1.0 x 105 MOI（基因组滴度）转导靶细胞。72小时后，收集细胞并采用Guide-it Mutation Detection Kit进行分析 。
 
■ 产品组份
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2)（Code No. 632608）
1. AAVpro CRISPR/Cas9 Vector Set
pAAV-Guide-it-Up Vector 500 ng/μl
pAAV-Guide-it-Down Vector（Linear） 7.5 ng/μl
2. Guide-it Ligation Components
DNA Ligation Mighty Mix  
Guide-it Oligo Annealing Buffer  
Guide-it Control Annealed Oligos 100 fmol/μl
Guide-it Sequencing Primer 1 100 pmol/μl
PCR-Grade Water  
3. Stellar Competent Cells（Code No. 636763）
4. pRC2-mi342 Vector（1 μg/μl）
5. pHelper Vector（1 μg/μl）
6. AAVpro Extraction Solution
    AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
    AAV Extraction Solution B 150 μl×3
 
AAVpro CRISPR/Cas9 Vector System（Code No. 632609）
1. AAVpro CRISPR/Cas9 Vector Set
20 μl pAAV-Guide-it-Up Vector 500 ng/μl
20 μl pAAV-Guide-it-Down Vector（Linear） 7.5 ng/μl
2. Guide-it Ligation Components
DNA Ligation Mighty Mix  
Guide-it Oligo Annealing Buffer  
Guide-it Control Annealed Oligos 100 fmol/μl
Guide-it Sequencing Primer 1 100 pmol/μl
PCR-Grade Water  
3. Stellar Competent Cells（Code No. 636763）
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System (AAV2)（Code No. 632619）
1. pAAV-Guide-it-1 Vector (Linear) （7.5 ng/μl） 20 μl
2. Guide-it Ligation Components v3
  
DNA Ligation Mighty Mix 50 μl
Guide-it Oligo Annealing Buffer 1.5 ml
Guide-it Control Annealed Oligos v3 (100 fmol/μl) 10 μl
Guide-it Sequencing Primer 1 (100 pmol/μl) 10 μl
PCR Grade Water 1 ml
3. Stellar Competent Cells（Code No. 636763）
4. pRC2-mi342 Vector（1 μg/μl） 20 μl
5. pHelper Vector（1 μg/μl） 20 μl
6. AAVpro Extraction Solution
  
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
 
AAVpro CRISPR/SaCas9 Vector System（Code No. 632618）
1. pAAV-Guide-it-1 Vector (Linear) （7.5 ng/μl） 20 μl
2. Guide-it Ligation Components v3
  
DNA Ligation Mighty Mix 50 μl
Guide-it Oligo Annealing Buffer 1.5 ml
Guide-it Control Annealed Oligos v3 (100 fmol/μl) 10 μl
Guide-it Sequencing Primer 1 (100 pmol/μl) 10 μl
PCR Grade Water 1 ml
3. Stellar Competent Cells（Code No. 636763）
 
■ 保存
Stellar Competent Cells：－80℃
其它：－20℃
（AAVpro Extraction Solution溶解后置于室温保存）
 
 
 
产品详情请点击：CRISPR/Cas9腺相关病毒系统
 
 

页面更新：2020-03-05 10:39:22

SLP Reagent Set 蚕幼虫血浆试剂盒（细菌、真菌感染检测试剂盒） 品牌：Wako

发表于由

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：2-10℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

297-51501

 for Microorganism Detection 3 mL –

SLP Reagent Set 蚕幼虫血浆试剂盒（细菌、真菌感染检测试剂盒） 品牌：Wako

替代品：296-81001

 – –


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* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 配套试剂为Peptidoglycan, from Micrococcus luteus (Code #162-18101, 2 mL (1micro-g/mL) 以及Curdlan [1 -> 3)-beta-D-glucan] (Code #030-09903, 1 g)

Precut PEEK Capillary Tubes 0.508 x 250mm 品牌：Sugiyama

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Precut PEEK Capillary Tubes 0.508 x 250mm

品牌：Sugiyama
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

306-21551

 – 10 pcs –

Precut PEEK Capillary Tubes 0.508 x 250mm 品牌：Sugiyama

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锌离子荧光探针Zinquin CAS 151606-29-0 货号21260-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

锌离子荧光探针Zinquin CAS 151606-29-0

锌离子荧光探针Zinquin CAS 151606-29-0

锌离子荧光探针Zinquin CAS 151606-29-0 货号21260 货号 21260 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1236
Ex (nm) 355 Em (nm) 491
分子量 386.42 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：21260

产品名称：锌离子荧光探针Zinquin 

CAS：151606-29-0

规格：5mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：386.42

外观：淡黄色固体

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：355

发射波长（nm）：491

 

产品介绍

锌离子荧光探针Zinquin 是美国AAT Bioquest生产的用于检测锌离子的荧光探针。Zinquin是一种锌敏感的，细胞不可渗透的荧光探针。锌是人体中第二丰富的过渡金属，它是催化，结构和调节离子必不可少的元素。锌离子参与体内平衡，免疫反应，氧化应激，细胞凋亡和衰老。已经提出锌起突触前神经元的常规神经递质的作用，并作为横穿突触后神经元的跨膜信号。锌代谢异常与许多神经系统疾病有关，包括阿尔茨海默氏病，帕金森氏病和癫痫病。已经证明用于体内锌监测的最合适技术是荧光成像。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的锌离子荧光探针Zinquin 。 

 

参考文献

Zinquin identifies subcellular compartmentalization of zinc in cortical neurons. Relation to the trafficking of zinc and the mitochondrial compartment
Authors: Colvin RA, Laskowski M, Fontaine CP.
Journal: Brain Res (2006): 1

S-Nitroso compounds interfere with zinc probing by Zinquin
Authors: Jansen S, Arning J, Dulcks T, Beyersmann D.
Journal: Anal Biochem (2004): 145

Coordination and fluorescence of the intracellular Zn2+ probe [2-methyl-8-(4-toluenesulfonamido)-6-quinolyloxy]acetic acid (Zinquin A) in ternary Zn2+ complexes
Authors: Hendrickson KM, Geue JP, Wyness O, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: J Am Chem Soc (2003): 3889

Fluorescent detection of Zn(2+)-rich vesicles with Zinquin: mechanism of action in lipid environments
Authors: Snitsarev V, Budde T, Stricker TP, Cox JM, Krupa DJ, Geng L, Kay AR.
Journal: Biophys J (2001): 1538

The synthesis and fluorescent properties of analogues of the zinc(II) specific fluorophore zinquin ester
Authors: Kimber MC, Mahadevan IB, Lincoln SF, Ward AD, Tiekink ER.
Journal: J Org Chem (2000): 8204

Changes in distribution of labile zinc in mouse spermatozoa during maturation in the epididymis assessed by the fluorophore Zinquin
Authors: Zalewski PD, Jian X, Soon LL, Breed WG, Seamark RF, Lincoln SF, Ward AD, Sun FZ.
Journal: Reprod Fertil Dev (1996): 1097

Flux of intracellular labile zinc during apoptosis (gene-directed cell death) revealed by a specific chemical probe, Zinquin
Authors: Zalewski PD, Forbes IJ, Seamark RF, Borlinghaus R, Betts WH, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: Chem Biol (1994): 153

Measurement of zinc in hepatocytes by using a fluorescent probe, zinquin: relationship to metallothionein and intracellular zinc
Authors: Coyle P, Zalewski PD, Philcox JC, Forbes IJ, Ward AD, Lincoln SF, Mahadevan I, Rofe AM.
Journal: Biochem J (1994): 781

说明书
锌离子荧光探针Zinquin CAS 151606-29-0.pdf