CTGF ELISA 试剂盒

结缔组织生长因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38 kDa的分泌蛋白。除了参与细胞粘附和软骨细胞的增殖和分化以外，它也被认为是组织纤维化的一个主要因素，还可作为纤维化疾病的候选标志物。

FUJIFILM Wako可提供用于检测CTGF全长的ELISA试剂盒以及检测全长+N末端的ELISA试剂盒，通过组合使用这两种ELISA试剂盒，能够准确检测作为特发性肺纤维化（IPF）候选生物标志物的血液N末端CTGF片段。

◆什么是CTGF？

CTGF（ Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一种，亦称为CCN2。CTGF主要由Module 1 – Module 4的四个部分组成，Module 1称为IGF结合结构域，Module 2称为VWC结构域，Module 3称为TSP-1结构域，Module 4称为CT结构域。各结构域通过与不同的因子结合来发挥作用。

CTGF在组织纤维化中发挥重要作用，因此可作为纤维化的候选生物标志物。CTGF由TGF-β诱导表达，通过促进产生细胞外基质的肌成纤维细胞的分化和胶原蛋白的合成，从而参与纤维化^1）。在小鼠皮肤纤维化中，TGF-β和CTGF已被证明分别在纤维化的发生和持续中起重要作用^2）。此外，还有报告称CTGF与软骨细胞的增殖和分化，细胞间的粘连有关。

CTGF除了全长CTGF之外，还有Module 2 － Module 3间被切断产生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF（C末端）容易被分解，所以血液中主要以CTGF （全长）和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作为特发性肺纤维化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物标志物备受期待³⁾，但由于CTGF（全长)和CTGF（N末端）同时存在，所以单独检测CTGF（N末端）非常困难。

◆CTGF ELISA试剂盒 Wako

FUJIFILM Wako可分别提供检测CTGF全长以及全长+N末端的ELISA试剂盒。通过组合使用两种ELISA试剂盒，可准确检测特发性肺纤维化(IPF)的生物标志物——血液中的N末端CTGF⁴⁾。

产品系列

产品名称	CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako	CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako
产品编号	290-84701	292-84901
检测对象	CTGF（全长）	CTGF（全长+N末端）
检测原理
样品	人血清，人血浆(EDTA)
标准曲线范围	7.81-500 pM
所需样品量	人血清：5 μL，人血浆(EDTA)：10 μL
检测时间	2 h 50 min
检测法	显色法

◆性能数据

全长，N末端片段，C末端片段的交叉性

分别使用各ELISA试剂盒与全长，N末端片段，C末端片段反应，确认其交叉性。

【结果】

CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长，CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长和N末端片段。

与CCN家族的交叉性

确认了包含CTGF在内的与CCN家族的交叉率（500 pM，n=8）。

	CTGF ELISA（全长） 交叉率 (%)	CTGF ELISA（全长+N末端区域） 交叉率 (%)
CCN1	<0.5	N.D.
CCN2（CTGF）	100	100
CCN3	<0.5	N.D.
CCN4	<0.5	N.D.
CCN5	<0.5	N.D.
CCN6	<0.5	N.D.

N.D. = 未检出

【结果】

FUJIFIM Wako的试剂盒在CCN家族中，对CCN2(CTGF)显示高特异性。

◆应用数据

N末端CTGF的检测（稀释线性测试）

使用梯度稀释的人血清或人血浆(EDTA)，用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长+N末端， 用CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长。求差值计算CTGF（N末端）量，确认稀释线性。

样品	稀释倍率	CTGF（全长＋N末端）（pM）	CTGF（全长）（pM）	CTGF（N末端）(pM）
人 血清	1/1	1735	952	783
	1/2	875	495	380
	1/4	417	237	180
人 血浆(EDTA)	1/1	684	126	558
	1/2	347	66.2	281
	1/4	157	34.9 * 参考值	122

【结果】

使用该方法检测定量CTGF（N末端），可观察到高稀释线性。

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

参考文献

1.	Biernacka, A., Dobaczewski, M., and Frangogiannis, N. G.: Growth Factors, 29(5), 196(2011). TGF-β signaling in fibrosis
2.	Mori T., et al.: J. Cell Physiol., 181(1), 153(1999). Role and interaction of connective tissue growth factor with transforming growth factor-beta in persistent fibrosis: A mouse fibrosis model.
3.	Kono, M. et al.: Clin. Chim. Acta, 412, 2211(2011). Plasma CCN2 (connective tissue growth factor; CTGF) is a potential biomarker in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF)
4.	Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010). Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor