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亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

重组蛋白纯化检测用

亲和标签抗体系列

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

　　和光为您准备了DYKDDDDK, 6×His, GFP, HA, MBP, c-Myc, GST,V5融合蛋白提纯、检测用抗体及珠。
　　另外，和光还准备了上述各样品的试用装，您可向当地代理商索取。

◆DYK标签：DYKDDDDK

　　DYK标签是识别DYKDDDDK肽的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物中的DYKDDDDK标签融合蛋白。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

数据提供：　
鹿儿岛大学研究生院医疗牙科综合研究科附属顽固病毒病理控制研究中心分子病毒感染研究领域草野秀一老师

将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞株中，经过24小时培养后，随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行溶解，对所得的细胞溶解液用Western Blot法检测，可检测出3×FLAG标签融合蛋白。

分别用Wako（克隆号 1E6）（产品编号：018-22381）抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。

与A公司抗体相比，Wako（克隆号 1E6）抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。

A公司产品和Wako产品在Western Blot检测中的灵敏度比较

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

Lane 1: 293T细胞溶解液
Lane 2: 瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3: 瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭：含5%脱脂奶的TBS-T、4℃，一晚

抗体反应：2小时、室温
发光剂：ImmunoStar^® LD
检测：LAS-3000、曝光时间15分

Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗DYKDDDDK标签，单抗 Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody	小鼠IgG_2b 1E6	WB,IP,FCM,ChIP	免疫化学用	018-22381	200 μg
				014-22383	1 mg
				012-22384	5 mg
抗DYKDDDDK标签，单抗 Anti DYKDDDDK tag,Monoclonal Antibody,Rat	大鼠IgG₁ 6F7	WB,IP,ELISA,IHC,FCM	免疫化学用	018-23621	200 μg
				012-23624	1 mg
HRP标签单抗
抗DYKDDDDK标签，单抗，过氧化酶结合 Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2b 1E6	WB	免疫化学用	015-22391	200 μL
				019-22394	1 mL

◆6×His标签：HHHHHH (6×组氨酸)

　　可用于检测His(6×组氨酸)标签融合蛋白。克隆不同，识别端的特异性、应用也有所不同。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

克隆号	识别端	Western blot		Immunoprecipitation		ELISA	产品编号
克隆号	识别端	N端	C端	N端	C端	ELISA	产品编号
9F2	C端	ND	+++++	ND	++	–	010-21861
9C11	N・C端	+++++	++++	+++++	++	○	011-23091
21-48	N・C端	+++	++++	+++	+++	○	017-23211
28-75	N・C端	++	++	+++++	+++++	○	014-23221
9F2	C端	ND	+++++	–	–	–	013-23171
9C11	N・C端	+++++	++++	–	–	◎	010-23181

B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blot检测功能比较

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

N端His：HEK293T表达的6×His-

ProteinZ, 1×10⁵ cells
C端His：Protein P-6×His＋CHO细胞溶解液, 1×10⁵ cells

一抗：1 μg/mL
二抗：抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液
可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。

6×His tag抗体　选购指南

N端的检测中，最强的克隆号是什么？
WB：9C11　IP： 9C11, 28-75
C端的检测中，最强的克隆号是什么
WB：9F2　IP：28-75
适用于WB检测中，识别N/C端的克隆号是什么？
9C11
适用于IP检测中，识别N/C端的克隆号是什么？
28-75

可灵活应用于WB/IP的万能型克隆号是哪个？
21-48
适用于WB检测的克隆号是哪个？
9C11
适用于IP检测的克隆号是哪个？
28-75
只识别C端的性价比较高的克隆号是哪个？
9F2

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9F2)	小鼠IgG₁ 9F2	WB,IP	免疫化学用	010-21861	200 μg
				014-21864	1 mg
				010-21866	5 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9C11)	小鼠IgG₁ 9C11	WB,IP,ELISA	免疫化学用	011-23091	200 μg
				015-23094	1 mg
				011-23096	5 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(21-28)	小鼠IgG₁・κ 21-48	WB,IP,ELISA	免疫化学用	017-23211	200 μg
				011-23214	1 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(28-75)	小鼠IgG₃・κ 28-75	WB,IP,ELISA	免疫化学用	014-23221	200 μg
				018-23224	1 mg
HRP标签单抗
抗6×组氨酸，单抗，过氧化酶结合 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9F2	WB	免疫化学用	013-23171	100 μL
				017-23174	500 μL
抗6×组氨酸，单抗，过氧化酶结合 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9C11	WB	免疫化学用	010-23181	100 μL
				014-23184	500 μL

◆GFP tag： Green Fluorescent Protein (GFP)

　　可识别Green Fluorescent Protein (GFP)抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白，可应用于各个领域。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗及多抗
抗绿色荧光蛋白，单抗 Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP, MoAb)	小鼠IgG_2a・κ mFX73	IP, IHC	免疫化学用	012-20461	100 μL
	小鼠IgG_2a・κ mFX73	IP, IHC	免疫化学用	018-20463	100 μL×5
抗绿色荧光蛋白，单抗 Anti GFP,MoAb(mF×75)	小鼠IgG_2a・κ mFX75	WB	免疫化学用	012-22541	100 μL
抗绿色荧光蛋白，多抗 IS，兔 Anti Green Fluorescent Protein,Rabbit Polyclonal IS	–	WB, IHC	免疫化学用	013-23811	20 μg

◆HA tag：YPYDVPDYA

　　血凝素（HA）来源(98-106 aa)的多肽：抗YPYDVPDYA单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	容量
单抗
抗血凝素, 单抗 Anti HA,MoAb	小鼠IgG_2b 4B2	WB, IP	免疫化学用	014-21881	200 μg
				018-21884	1 mg
				014-21886	5 mg
HRP标签单抗
抗血凝素, 单抗，过氧化酶结合 Anti Hemagglutinin,Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2b 4B2	WB	免疫化学用	011-21911	100 μL
				015-21914	500 μL

参考数据

抗绿色荧光蛋白, 单抗（012-22541）
抗体浓度：1 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GFP重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，并取

　　　　10 μL进行电泳操作
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

抗血凝素，单抗（014-21881）

抗体浓度：0.5 μg/mL
抗原量：对5 ng HA标签重组蛋白进行电泳操作
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

◆MBP tag：Maltose Binding Protein

　　可识别Maltose-binding Protein (MBP)单抗。MBP是对麦芽糖、麦芽糊精具有结合性的蛋白，具有通过与目的蛋白融合，提高表达蛋白可溶性的特点，可简便纯化、检测重组蛋白。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗麦芽糖结合蛋白，单抗 Anti MBP, Monoclonal Antibody, Rat	大鼠IgG_2b TMab-2	ELISA, WB	免疫化学用	016-24141	200 μg

◆c-Myc标签：EQKLISEEDL

　　可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗c-Myc，单抗 ANTI c-Myc, Monoclonal Antibody	小鼠IgG₁ 9E10	WB, IP	免疫化学用	017-21871	200 μg
				011-21874	1 mg
				017-21876	5 mg
抗c-Myc，单抗 Anti c-Myc, Monoclonal Antibody (10D11)	小鼠IgG₁ 10D11	WB, IP	免疫化学用	017-26511	20 μg
				013-26513	200 μg
				011-26514	1 mg
HRP标签单抗
抗c-Myc, 单抗，过氧化酶结合 Anti c-Myc,MoAb, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9E10	WB	免疫化学用	014-21901	100 μL
				018-21904	500 μL
抗c-Myc, 单抗，过氧化酶结合 Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated (10D11)	小鼠IgG₁ 10D11	WB	免疫化学用	014-26521	10 μL
				010-26523	100μL
				018-26524	500 μL

◆GST标签：Glutathione-S-transferase

　　可识别Glutathione S-transferase（GST）单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗谷胱甘肽 S-转移酶，单抗 Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody	小鼠IgG_2b 5A7	WB, IP	免疫化学用	013-21851	200 μg
				017-21854	1 mg
				013-21856	5 mg
HRP标签单抗
抗谷胱甘肽 S-转移酶，单抗，过氧化酶结合 Anti Glutathione S-transferse,Monoclonal Antibody, HRP Conjugated	小鼠IgG_2b 5A7	WB	免疫化学用	011-21891	100 μL
				015-21894	500 μL

参考数据

抗c-Myc, 单抗（017-21871）
抗体浓度：0.25 μg/mL
抗原量：对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

抗谷胱甘肽 S-转移酶, 单抗（013-21851）
抗体浓度：1.0 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GTS标签重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，

　　　　并取10 μL进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

◆V5 tag：GKPIPNPLLGLDST

　　可识别多肽GKPIPNPLLGLDST单抗｡

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗V5 tag, 单抗 Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5)	小鼠IgG_2a 6F5	WB, IP	免疫化学用	011-23591	200 μg
				015-23594	1 mg
				011-23596	5 mg
HRP标签单抗
抗V5tag，单抗，过氧化酶结合 Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2a 6F5	WB	免疫化学用	019-24371	100 μL

◆相关产品

内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白，单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
抗β-微管蛋白，单抗 Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
抗GAPDH，单抗 Anti GAPDH, Monoclonal Antibody	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
抗GAPDH，单抗，过氧化酶结合 Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III，DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V（无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	–
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级