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OglyZOR^® 内切糖苷酶

OglyZOR内切糖苷酶（O-糖苷酶）特异性水解天然糖蛋白上核心1的O-聚糖，并在一定程度上水解核心3二糖。与市场上其他类似的酶相比，新颖的OglyZOR酶技术高效且易于使用。

◆详细信息

OglyZOR是一种内切糖苷酶（内切-α-N-乙酰半乳糖苷酶），可催化天然糖蛋白中的核心1以及一定程度上核心3 O-聚糖（二糖）水解。为了保证OglyZOR酶的活性，应去除聚糖的唾液酸。SialEXO由唾液酸酶混合物组成，可高效水解α2-3，α2-6或α2-8键，与OglyZOR一起使用可有效去除O-联二糖。在pH 6.5至7.5和37°C下获得最佳活性。

 

OglyZOR来源于口腔链球菌（Streptococcus oralis）并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签，分子量为227 kDa。SialEXO来源于黏液阿克曼菌（Akkermansia muciniphila），并在大肠杆菌中表达。SialEXO酶含有His-tags，组分的分子量分别为42 kDa和66 kDa。

单位定义

当与1 unit SialEXO在20 mM Tris pH 6.8中，于37°C孵育2h，1 unit OglyZOR可消化1 µg糖蛋白（TNFαR）中≥ 90％的O-聚糖。

包含试剂和存储

该试剂盒包括：

●　1瓶在TBS pH 7.6中冻干的OglyZOR（G1-OG1-020），未添加防腐剂。

●　1瓶SialEXO（G1-SM1-020），在TBS pH 7.6中冻干，未添加防腐剂。

 

试剂盒在室温下运输，收货后应存放在-20°C下。溶解后，酶在+4-8°C下稳定保存1个月。

 ◆特点

作用对象：水解糖蛋白上的O-聚糖

反应时间：2-4 h

反应条件：需要使用SialEXO^®（试剂盒已包含）去除唾液酸

酶切位点：核心1型O-聚糖二糖

 ◆应用

●　去除O-聚糖以进行聚糖分析

●　确认O-聚糖存在

●　减少样品异质性

常见问题和支持

Q. OglyZOR可以用于将由OpeRATOR生成的肽去糖基化吗？

A. 是的，试剂盒启用了去除了O-聚糖的O-糖基化肽段的MS/MS。

Q. OglyZOR是否可以在扩展的核心1结构或单个HexNAc上工作？

A. 不可以，OglyZOR识别核心1二糖HexNAcHex（或GalNAcGal），并且在某种程度上还延伸了核心3二糖HexNAc（2）（或GalNAcGlcNAc）。

 

Q. OglyZOR会保留N聚糖完整吗？

A. OglyZOR仅适用于脱唾液酸化的O-聚糖，该产品附赠唾液酸酶（SialEXO）。该唾液酸酶不是O-聚糖特异性的，但是也将使存在的任何N-聚糖

A. 脱唾液酸化。

 

Q. 可以在同一反应中使用OnglyZA和PNGase F吗？

A. 可以的，我们已经在非变性，pH~7.0过夜的条件下，在同一反应中使用OglyZOR，SialEXO和PNGaseF成功地进行了实验。