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EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基
EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基是一种间充质干细胞(MSC)专用的外泌体(EVs)生产培养基。只要将EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添加剂,无动物源成分添加至EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基,无动物源成分中配成完全培养基即可使用。本品不含血清及动物源成分, 适用于多种组织来源的MSCs的培养。
◆特点
● 比血清培养基的外泌体分泌量高
● 培养的外泌体活性高
● 维持MSC的高存活率
◆适用细胞
适用于多种组织来源的MSC
细胞种类
骨髓来源的MSC,脂肪来源的MSC,脐带基质来源的MSC等
◆使用方法
*1:往EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基,无动物源成分(产品编号:053-09451)中添加了EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添
*1:加剂,无动物源成分(产品编号:298-84001)即为EV-Up™ 完全培养基
6孔板培养
1. 将各种间充质干细胞以5×103的密度来铺板,然后用增殖培养基(血清培养基或无血清培养基)培养至80-90%汇合。
2. 去除增殖培养基后加入4 mL EV-UP™完全培养基。培养3-5日。
3. 回收培养上清,2,000×g离心20分钟,用干净试管收集离心后的上清液,避免吸入沉淀。
※ 可在培养上清中添加1/100的EV-Save™ 细胞外囊泡吸附抑制剂来抑制试管或吸头等对EV的吸附。
4. 用MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS提取培养上清中的外泌体。
◆应用数据
外泌体粒子数
利用PS亲和法*1从各种培养基的培养上清液中提取外泌体,使用NanoSight的Nano Tracking Analysis技术对外泌体的粒子数进行分析。
*1:在金属离子的存在下,结合分子通过磷脂酰丝氨酸(PS)捕获细胞外囊泡后,再使用螯合剂洗脱的方法。
*1:使用MagCapture™外泌体提取试剂盒PS时,可以通过本方法进行外泌体提取。
*2:Exosome-Depleted FBS
FUJIFILM Wako研发的EV-Up™ 完全培养基,在培养MSC时,释放的外泌体粒子数是D-MEM+10% EV depleted FBS培养的2.6倍左右。另外,FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基与血清培养基相比,可以分泌更多的EV。
抗纤维化活性
用TGFβ刺激培养人胎肺成纤维细胞(TIG3细胞),用PS亲和法从不同培养基的培养上清中提取EV,取5×107 particles/mL提取出的EV,用RT-PCR对纤维化标记物(Collagen III,αSMA)的基因表达水平进行定量,以比较抗纤维化活性。
使用FUJIFILM Wako研发的EV-Up™ 完全培养基的EV,强力抑制了由TGFβ引起的纤维化相关基因的表达。由此可见,FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基能培养出的外泌体活性更高。
细胞存活率
将在血清培养基中扩增培养的人骨髓来源的MSC用不同培养基培养5天,然后检测产生外泌体后的细胞存活率。
FUJIFILM Wako 的EV-Up™ 完全培养基培养的MSC与D-MEM+10% EV-depleted FBS相比,具有同样高的细胞存活率。
外泌体标志物蛋白表达
用PS亲和法从培养上清液中提取外泌体,并通过ELISA检测标记蛋白CD9、CD63和CD81的表达。
FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基与其他血清培养基相比,不同外泌体标记分子的表达更好。
◆产品列表
EV-Up™ MSC专用外泌体生产用培养基
产品列表 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
053-09451 |
EV-Up™ EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基, 无动物源成分 |
for Cell Culture |
95 mL |
298-84001 |
EV-Up™ MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添加剂, 无动物源成分 |
for Cell Culture |
5 mL(100 mL用) |
外泌体防吸附&冻结保护试剂
产品列表 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
058-09261 |
EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent |
for Genetic Research |
1 mL |
外泌体提取和纯化试剂
产品列表 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
299-77603 |
MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS |
for Genetic Research |
2 tests |
293-77601 |
10 tests |
||
290-80301 |
PS Capture™ Exosome Isolation Resin Kit |
for Genetic Research |
1 kit |
294-84101 |
MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2 |
for Genetic Research |
2 tests |
290-84103 |
10 tests |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |