HEPES

13 生化学用緩衝剤

HEPES

• 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

• 製品コード
  GB10　 HEPES
• CAS番号
  7365-45-9
• 化学名
  2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid
• 分子式・分子量
  C₈H₁₈N₂O₄S=238.31

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Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

Q

温度によりpHは変化しますか？

A

 変化します。温度が上がるほどpHは下がります。

下記にデータを示しますが、濃度によって変化の値は変わります。

0.1mol/lで調製した緩衝液（HEPES）の温度とpHの変化です。
Temp(℃）ｐＨ
14.2　　 7.30
15.1 　　7.28
16.9　　 7.26
18.9 　　7.24
20.9 　　7.22
22.8 　　7.21
24.9 　　7.19
26.2 　　7.17
28.8 　　7.15
29.9 　　7.13
30.8 　　7.12
32.4 　　7.10
33.7 　　7.08
34.2 　　7.07
35.2 　　7.06
36.0 　　7.05
36.4 　　7.04
48.8 　　6.87
67.0 　　6.70

Q

HEPESの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l HEPES 溶液
　HEPES 23.831 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。