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Sodium bicinchoninate
Sodium bicinchoninate
- 比色試薬／金属指示薬
比色試薬／金属指示薬
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製品コードB037 Sodium bicinchoninate
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CAS番号979-88-4
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化学名4,4′-Dicarboxy-2,2′-biquinoline, disodium salt
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分子式・分子量C20H10N2Na2O4=388.28
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 5 g | ￥25,000 | 343-05521 |
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技術情報
応用可能な物質
Cu＋、糖、蛋白質
標準測定法（1）（蛋白量 100～1,200 μg/mL）
[試薬]
溶液 A：Sodium Bicinchoninate(BCA) 1 g, Na2CO3・H2O 2 g, Na2C4H4O6・2H2O（酒石酸ナトリウム）0.16 g, NaOH 0.4 g, NaHCO3 0.95 gを脱イオン水 95.5 mLに溶解し、NaHCO3を用いてpH11.25に調整する。
溶液 B：CuSO4・5H2O 0.4 gを脱イオン水 9.6 mLに溶解する。
溶液 C：溶液A 50 mL と溶液B 1 mLを混合する。（用時調製）
[操作]
試料あるいは標準の 100 μLと溶液C 2 mLを試験管にとり、混合して37℃で30分間インキュベートし、562 nmの吸光度（試薬ブランク対照）を測定。検量線を作成して、試料中の濃度を決定する。
標準測定法（2）（蛋白量 0.5～10 μg/mL）
[試薬]
溶液 A ：Na2CO3・H2O 8 g, NaOH 1.6 g, Na2C4H4O6・2H2O（酒石酸ナトリウム） 1.6 gを脱イオン水 89 mlに溶解し、NaHCO3 を用いて H11.25 に調整する。
溶液 B：Sodium bicinchoninate 4 g を脱イオン水 96 mLに溶解する。
溶液 C：CuSO4・5H2O 0.08 gを脱イオン水 2 mLに溶解し、これに溶液B 50 mLを加え混合する（用時調製）。
溶液 D：溶液A 50 mLと溶液C 50 mLを混合する（用時調製）。
[操作]
試料あるいは標準の1 mLと溶液D 1 mLを試験管に入れ、60℃で60分間インキュベートし、室温にもどした後、562 nm の吸光度（試薬ブランク対照）を測定、検量線を作成して、試料中の濃度を決定する。
参考文献
1) K. Ueno and K. Kina, "Colloid Titration – A Rapid Method for the Determination of Charged Colloid", J. Chem. Education, 1985, 62, 627.
2) P. K. Smithm, R. I. Krohn, G. T. Hermanson, A. K. Mallia, F. H. Gartner, M. D. Provenzano, E. K. Fujimoto, N. M. Goeke, B. J. Olson and D. C. Klenk, "Measurement of Protein Using Bicinchoninic Acid", Anal. Biochem., 1985, 150, 76.
3) M. G. Redinbaugh and R. B. Turley, "Adaptation of the Bicinchoninic Acid Protein Assay for Use with Microtiter Plates and Sucrose Gradient Fractions", Anal. Biochem., 1986, 153, 267.
4) 中村洋, "生体高分子 －タンパク質・ペプチド－", ぶんせき, 1990, 878.
取扱条件
| 性状： | 本品は、白色～黄色粉末であり水に溶ける。 |
|---|---|
| 水溶状： | 試験適合 |
| モル吸光係数： | 15,500 以上(332 nm 付近) |
| 強熱残分(硫酸塩)： | 30.0～40.0％ |
| 蛋白定量ブランク： | 試験適合 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
