Amino Acid Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Amino Acid Uptake Assay Kit

• 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
• 細胞機能解析
• 細胞老化
• 細胞内代謝
• 蛍光色素
• 顕微鏡
• FCM

アミノ酸取り込み検出キット

• アミノ酸取り込み能力を簡便に検出できる
• 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターを用いて検出が可能

• 製品コード
  UP04　 Amino Acid Uptake Assay Kit

<使用回数の目安> 100 testsあたり、35 mm dish 10枚、96-well plate 1枚

• ご購入方法
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マニュアル

Q

BPAはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか？

A

BPAは、LAT1, LAT2, ATB^0,+を介して取り込まれることが報告されています(Wongthai P et al., “Boronophenylalanine, a boron delivery agent for boron neutron capture therapy, is transported by ATB^0,+, LAT1 and LAT2”, Cancer Sci., 2015, Mar;106(3):279-86)。また、小社では、LAT1の阻害剤BCHや、LAT1の基質であるleucineなどの競合阻害実験でBPAの取り込みが阻害されることを確認しています。

Q

使用実績のある細胞種を教えて下さい。

A

付着細胞(HeLa, A549, HepG2, MCF-7, C2C12, MEF, U251), 浮遊細胞(MOLT4)

Q

BPAは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか？

A

BPAは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

BPAを生細胞へ取り込ませた後、細胞を固定することは可能でしょうか？

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

BPAは細胞内での局在性はありますか？

A

取り込まれたBPAは細胞内に均一に存在します。

Q

BPA uptake solution, Working solutionは保存可能でしょうか？

A

BPA uptake solution, Working solutionは保存できません。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか？

A

2点原因が考えられるため、以下のようにすると改善される可能性があります。
①BPA uptake solutionの取り込み量が少ない可能性があります。その場合は、BPA Solutionの希釈倍率を下げてご検討ください。(5～50倍希釈)
②Working solutionが劣化している可能性があります。再度、Working solutionを調製してください。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか？

A

細胞に取り込まれなかったBPAがウェル内に残存している可能性があります。
HBSSによる洗浄を繰り返してください。

Q

BPAの定量はできますか？

A

取り込まれたBPAの定量を行う事はできません。本キットは、アミノ酸取り込み能力の増減を確認するためのキットとなります。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか？

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名	製品名	Cat No.
ibidi	μPlate 96 well ibiTreat black S 15	ib89626
AGC techno glass	EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well	5866-096
Thermo Fisher	96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10	165305

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。