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Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)
Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)
- 酸化ストレス関連試薬
DNAダメージ検出抗体
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製品コードAB02 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)
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化学名Monoclonal anti-nitroguanosine antibody
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 μg | ￥71,200 | 341-90671 |
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マニュアル
-
プロトコル
ニトログアノシンを検出したい 
技術情報
検出例
使用濃度
ELISA(1 μg/mL)、免疫染色組織(10 μg/mL)
図1．モノクローナル抗体NO2G52の反応性
プレートに固相化したNO2-Guanosine結合BSAと各種の物質に対する、本抗体の反応を
競合法ELISAで検定したものである。本抗体が反応する物質は濃度に依存した右下がりの
曲線を与え抗体が反応していることを示している。
モノクローナル抗体は、8位がニトロ化されたものを幅広く認識し、正常なヌクレオシド
や核酸塩基には反応しない。抜群の特異性と高力価を有している。
＜無刺激＞ LPS+INF-γ刺激 L-NMMA投与
図2. RAW264.7細胞(murine macrophage cell line)における内因性のグアニンのニトロ化
蛍光標識したAnti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)にて検出。
（データ提供：熊本大学医学部 教授 赤池孝章先生）
参考文献
1) T. Akaike, S. Okamoto, T. Sawa, J. Yoshitake, F. Tamura, K. Ichimori, K. Miyazaki, K. Sasamoto and H. Maeda, "8-nitroguanosine formation in viral pneumonia and its implication for pathogenesis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 685.
2) J. Yoshitake, T. Akaike, T. Akuta, F. Tamura, T. Ogura, H. Esumi and H. Maeda, "Nitric oxide as an endogenous mutagen for Sendai virus without antiviral activity", J. Virol., 2004, 78, 8709.
3) T. Sawa, M. H. Zaki, T. Okamoto, T. Akuta, Y. Tokutomi, S. Kim-Mitsuyama, H. Ihara, A. Kobayashi, M. Yamamoto, S. Fujii, H. Arimoto and T. Akaike, "Protein S-guanylation by the biological signal 8-nitroguanosine 3',5'-cyclic monophosphate", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 727.
4) M. H. Zaki, S. Fujii, T. Okamoto, S. Islam, S. Khan, K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Cytoprotective function of heme oxygenase 1 induced by a nitrated cyclic nucleotide formed during murine salmonellosis", J. Immunol., 2009, 182, 3746.
5) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine nitration in idiopathic pulmonary fibrosis and its implication for carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 2006, 174, 665.
6) T. Sawa, M. Tatemichi, T. Akaike, A. Barbin and H. Ohshima, " Analysis of urinary 8-nitroguanine, a marker of nitrative nucleic acid damage, by high-performance liquid chromatography-electrochemical detection coupled with immunoaffinity purification: association with cigarette smoking", Free Radic. Biol. Med., 2006, 40, 711.
7) M. Feelisch, "Nitrated cyclic GMP as a new cellular signal", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 687.
8) K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Protein cysteine S-guanylation and electrophilic signal transduction by endogeneous nitro-nucleotides", Amino Acids, 2011, 41(1), 123.
9) T. Sawa, H. Arimoto and T. Akaike, "Regulation of redox signaling involving chemical conjugation of protein thiols by nitric oxide and electrophiles", Bioconjugate Chem., 2010, 21(7), 1121
よくある質問
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Q
ニトログアノシンは酸化ストレスの指標として使用されますが、 ニトログアノシンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか？
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A
酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。下記URLよりダウンロード可能です。
「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル～カスタマーサポートの視点から～」
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Q
この抗体を用いることで何がわかりますか？
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A
8-Nitroguanosineは、一酸化窒素（NO）と活性酸素（スーパーオキサイドアニオンラジカル）によって生じる過酸化亜硝酸（パーオキシナイトライト）によってRNAがニトロ化された核酸です。
生体組織が炎症を起こすと多量のNOが産生され、多くの過酸化亜硝酸が生じて、グアノシン,デオキシグアノシンをニトロ化することが知られております。
8-Nitroguanosineの局在や量などを調べることにより、8-Nitroguanosine残基の役割や遺伝子傷害、発癌機構の解明に役立つことが期待されます。＊ポリクローナル抗体で染色された場合、次のような確認を行なうことをお勧めします。
1.標準の8-Nitroguanineと競合させて染色されなくなること
2.Sodium hydrosulfiteなどの還元剤で試料中のニトログアノシン、ニトログアニンをアミノグアノシン、アミノグアニンに還元して染色されなくなること
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Q
抗ニトログアノシン抗体はどのくらい保存できますか？
-
A
有効期間は設けておりませんが、希釈前の段階で冷蔵で1年
使用できることを確認しております。凍結・融解の繰り返しは劣化を早めますので、一旦解凍後は冷蔵にて保管してください。
また、希釈されますと吸着などもあり、期間の保証は出来ません。
取扱条件
| 性状： | 本品は、無色～淡黄色微濁液体である。 |
|---|---|
| 力値： | 試験適合 |
| 1.保存方法：冷凍 |
