Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒

简要概述

Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒，β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因，而这其中，萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。最近，其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升，例如海肾荧光素酶。由于海肾荧光素酶受体分子非常小，因此不需要ATP的辅助。Amplite 海肾荧光素酶报告基团检测试剂盒提供了一个快速灵敏的检测海肾荧光素酶活性的方案。该方案使用了独特的荧光基质形成以实现基于细胞的胞内海肾荧光素酶活性检测。独特的荧光基质与海肾荧光素酶反应时，产生强烈的荧光。本试剂盒提供所有必需组分，并且适用于HTS（高通量筛选）研究。本试剂盒灵敏度高，可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基，也可用于原始或合成的hRluc基因表达检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号：荧光素酶到底该如何检测？

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞板
2.根据需要处理细胞
3.从细胞板中去除培养基
4.加入海肾荧光素酶工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
5.在室温下孵育5-10分钟
6.检测荧光强度

溶液制备  

1.工作溶液

将1体积100X荧光素酶底物（组分A）添加到100体积的测定缓冲液（组分B）中，制成海肾荧光素酶工作溶液。 注意：海肾荧光素酶工作溶液对光非常敏感，应避免光照。 另外，它不稳定，应放在冰上并在2小时内使用。

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样品操作及分析

1.用测试化合物处理细胞（或样品），在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）。
 
2.将细胞板在5％CO₂培养箱中于37°C孵育一段时间（通常为4小时至过夜）。

3.每孔海肾荧光素酶工作溶液中加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）。

4.在室温下避光将平板孵育5-10分钟。 

5.用酶标仪检测荧光强度。

参考文献

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