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Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒
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货号 | 21603 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 10000 Tests | 价格 | 38292 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起着重要作用。 ATP的定量可用于各种生物应用。由于ATP是几乎所有活生物体的能源，在缺乏有生物体的情况下它们迅速降解，因此其存在可用于识别活生物体的存在。 ATP的测量已用于细胞毒性，表面细菌的检测，水中细菌的定量，培养中的体细胞和食品质量。使用萤火虫生物发光来测量ATP最初是由McElroy提出的，他发现ATP对于轻量生产至关重要。萤火虫萤光素酶是单体61kD酶，其催化荧光素的两步氧化，其在560nm处产生光。第一步涉及通过ATP活化蛋白质以产生反应性混合酸酐中间体。在第二步中，活性中间体与氧反应产生一过性二氧杂环丁烷，其迅速分解为氧化产物oxyluciferin和二氧化碳以并放出光。当ATP是限制性成分时，光的强度与ATP的浓度成比例。因此，光强度的测量可以用于使用发光计来量化ATP。 AAT Bioquest的ReadiUse 快速发光测定ATP分析试剂盒（不含DTT）带有即用型所有必需组分。它为监测哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性提供了一种快速，简单和均匀的发光测定法。该测定基于使用萤火虫萤光素酶来催化ATP和萤光素释放光的ATP的检测。它可以在化学发光酶标仪上以便利的96孔或384孔微量滴定板格式进行。该测定非常灵敏，可以检测50个细胞/孔。它具有稳定的半衰期超过2小时的发光信号。此ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂盒不使用DTT。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒。
适用仪器
| 发光酶标仪 | |
| 推荐孔板： | 白色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的即用型ReadiUse 快速光度ATP分析试剂（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监控发光强度
溶液配制
标准溶液配制
1.ATP标准
用ddH2O或适当的缓冲液制成1 mM ATP储备溶液，然后进行系列稀释以达到10 pM至10 µM的ATP浓度。
点击查看细胞制备方案
样品示例及操作
表1.白色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 SD = ATP标准液，BL =空白对照，TS =测试样品
| BL | BL | TS | TS |
| SD1 | SD1 | … | … |
| SD2 | SD2 | … | … |
| SD3 | SD3 | ||
| SD4 | SD4 | ||
| SD5 | SD5 | ||
| SD6 | SD6 | ||
| SD7 | SD7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| SD1-SD7 | 100ul | ATP的连续稀释（例如10 pM至10 µM） |
| BL | 100ul | ATP测定缓冲液（组分A） |
| TS | 100ul | 样品 |
1.通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL的10X化合物（用于96孔板）或5 µL的5X化合物（用于384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在37 oC，5％CO2培养箱中孵育所需的时间，例如24、48或96小时。
3.加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ReadiUse 快速光度ATP分析试剂。
4.在室温下孵育10-20分钟。 注意：将未使用的ReadiUse 快速发光ATP分析试剂分装并储存在-20℃，并避免重复的冷冻/解冻循环。
5.使用标准发光计监控发光强度。
参考文献
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