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Screen Quest 膜电位检测试剂盒 红色荧光
| 货号 | 36005 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 10 plates | 价格 | 6432 |
| Ex (nm) | 635 | Em (nm) | 660 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Screen Quest 膜电位检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测膜电位的试剂盒，膜电位是电池内部和外部之间的电压差。膜电位允许电池充当电池，提供电力以操作嵌入膜中的各种“分子装置”。在诸如神经元的可电激发细胞中，膜电位用于在细胞的不同部分之间传递信号。在膜中的一个点处打开或关闭离子通道产生膜电位的局部变化，这导致电流快速流到膜中的其他点。离子通道已被确定为重要的药物发现目标。我们的Screen Quest 膜电位检测试剂盒是一种均质检测，具有快速读取时间。它使用我们专有的长波膜电位指示器来检测由离子通道的打开和关闭引起的膜电位变化。试剂盒中使用的膜电位指示剂的红色荧光在进入细胞时具有增强的荧光，并最小化由筛选化合物和/或细胞自发荧光引起的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Screen Quest 膜电位检测试剂盒。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| 激发： | 620nm |
| 发射： | 650nm |
| cutoff: | 630nm |
| 推荐孔板： | 黑色透明 |
| 读取模式： | 底读模式 |
| 其他仪器 |
| FDSS, NOVOStar, FlexStation |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
在生长培养基或HHBS中制备细胞
添加MP染料加载溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）
在室温或37℃孵育1小时
监测Ex / Em = 620 / 650nm处的荧光强度
工作溶液配制
MP染料加载方案：将1mL 10X MP（组分A）加入9mL HHBS（组分B）中，并充分混合。 注意：MP染料加载溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：1 mL 10X MP传感器足以容纳一块板。 如果储存得当，未使用的10X MP（A组分）可以等分并在<-20℃下储存几个月。 避免反复冻融循环。注意：为方便起见，HHBS（组分B）可以存储在4℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。
操作步骤
1.向细胞板中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的MP染料加载溶液。注意：如果筛选化合物干扰生长培养基和血清因子，在添加MP染料加载溶液之前，用等体积的HHBS缓冲液替换生长培养基。或者，细胞可以在无血清条件下生长。注意：加载染料后请勿清洗细胞。
2.将染料加载板在5％CO2,37℃培养箱中孵育30至60分钟。注意：在某些情况下，室温孵育30至60分钟可能会更好。
3.使用HHBS（组分B）或所需的缓冲液制备复合板。用HHBS或所需缓冲液制备化合物板。
4.监测Ex / Em = 620 / 650nm处的荧光强度。注意：在实验前进行信号测试非常重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10％至15％的水平。
数据分析
从空白标准孔获得的读数（对照（Max）的％）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。
| 图1.用P2X受体瞬时转染的HEK细胞中的ATP剂量反应。 将用P2X受体瞬时转染的HEK细胞以40,000个细胞/100μL/孔接种在Costar黑壁/透明底96孔板中过夜。 将细胞与100μLMP染料加载溶液在5％CO2,37℃培养箱中孵育60分钟。 通过FlexStation添加ATP（50μL/孔）以达到最终指示的浓度。 在底部读取模式下在Ex / Em = 620 / 650nm（630nm处的截止值）下测量荧光信号。 |
参考文献
The short-chain fatty acid propionate increases glucagon and FABP4 production, impairing insulin action in mice and humans
Authors: Amir Tirosh, Ediz S Calay, Gurol Tuncman, Kathryn C Claiborn, Karen E Inouye, Kosei Eguchi, Michael Alcala, Moran Rathaus, Kenneth S Hollander, Idit Ron
Journal: Science translational medicine (2019): eaav0120