Screen Quest Amylin 3受体表达细胞株

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简要概述

产品基本信息

货号：38000

产品名称：Screen Quest Amylin 3受体表达细胞株

规格：Each

产品介绍

G蛋白偶联受体（GPCRs）是药物发现计划中最大的靶向受体之一。钙通量（通过Gq途径耦合）分析是筛选GPCR靶点的首选方法。然而，超过60%的已知GPCRs信号通过腺苷酸环化酶活性偶联到cAMP。现有的cAMP检测方法不仅需要细胞裂解，而且缺乏时间和空间分辨率。Screen Quest Amylin 3受体表达细胞株能够研究不通过细胞内钙结合的GPCR。Screen Quest Amylin 3受体表达细胞株以一系列G蛋白嵌合物为基础，包括混杂的G蛋白、Gα16和外源性环核苷酸门控通道（CNGC）。嵌合体由一个Gq蛋白复合物的α亚单位组成，其5个羧基末端氨基酸已被另一个G蛋白（Gαs、Gαi、Gαo或Gαz）的氨基酸所取代。这些氨基酸负责受体与其G蛋白的偶联。这些嵌合体或CNGC与特定的非Gq偶联受体的共表达可能在受体刺激下产生细胞内钙信号。Screen Quest HEK-CNGC胰淀素3受体（AMY3）细胞系是稳定转染人胰淀素3受体和CNGC受体的HEK-293细胞。细胞内组成性表达的CNGC通过协同改变阳离子通量（如钙、钾或钠）实时响应细胞内cAMP水平的增加或减少。可使用钙敏感荧光指示剂（如Calbryte 520 AM、Cal-520 AM、Fluo-8 AM或Fluo-4 AM和相应的免洗钙试剂盒）或AAT优化的膜电位测定试剂盒检测这些细胞中的AMY3的活化。该细胞系已成功应用于药物发现和筛选环境，用于研究不通过细胞内钙结合的GPCRs。它已有效地用于FLIPR和FDSS系统。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Screen Quest Amylin 3受体表达细胞株。 

图示

图1. Screen Quest 活细胞cAMP测定原理

图2.HEK-AMY3细胞和亲代细胞对胰岛淀粉样多肽和降钙素的反应。 将HEK-Aym3细胞和亲本细胞均在Poly-D-赖氨酸包被的黑色384孔板中以20 µL /孔的培养基铺板过夜。 将细胞与等体积（20 µL）的MP染料工作溶液在室温下孵育2小时。 在添加大鼠胰岛淀粉样多肽或hCT之前和之后30分钟获得两个读数。 图中绘制了两个读数的比率（F / F0）。 A：大鼠胰岛淀粉样多肽和人降钙素在HEK-AMY3细胞系中的剂量反应曲线。 在存在PDE抑制剂Ro20-1724的情况下，rAmy的EC50 = 7.2 pM，hCT的EC50 = 934 pM。 B：大鼠胰岛淀粉样多肽和人降钙素在亲代细胞中的剂量反应曲线。 在存在PDE抑制剂Ro20-1724的情况下，rAmy的EC50 = 230 pM，hCT的EC50 = 28.7 pM

参考文献

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