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Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒
货号 | 23171 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 300 Slides | 价格 | 5136 | |
Ex (nm) | Em (nm) | |||
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒提供了一种可靠的方法,可以用Tubulite Red对活细胞中的微管蛋白进行荧光成像。该探针可透过活细胞,因此不需要固定细胞即可显像微管蛋白。它可以方便地用于跟踪活细胞中微管蛋白的聚合过程。它的红色光谱波长和良好的细胞渗透性使该探针易于与其他颜色(如GFP表达的细胞)或核染料(如DAPI)一起使用。中性的Tubulite Red容易穿过活细胞的质膜。亲脂性封闭基团一旦进入细胞,就会被酯酶裂解,形成带负电荷的产物,并充分保留在细胞内部。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒。
适用仪器
荧光显微镜 | |
激发: | Cy5滤波片 |
发射: | Cy5滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
- 用5×105到1×106细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞
- 准备并向细胞添加Tubulite Red工作溶液
- 在37℃孵育30至60分钟
- 使用Cy5滤波片组读取荧光强度
注意:开始实验之前,请在室温下解冻每种试剂盒成分。该说明书仅提供指南,实际情况应根据您的特定需求进行修改。
溶液配制
储备溶液配制
Tubulite Red储备液(500X):将25 µL(Cat#23170)或75 µL(Cat#23171)DMSO(组分D)加入Tubulite Red(小瓶A)的小瓶中,并充分混合。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的储备溶液在-20 ℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。
工作溶液配制
Tubulite Red工作溶液(1X):
将2.5 µL Tubulite Red储备溶液和100 µL 25 mM ReadiUse 丙磺舒(组分D)加入1 mL的测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中,混合均匀。注意:我们建议每次都使用新鲜的Tubulite Red工作溶液。工作溶液可以稳定几个小时,不要长时间放置。
实验步骤
- 根据需要准备细胞样品。
- 除去细胞生长培养基,并用PBS(未提供)或自备缓冲液洗涤细胞。(可选)。
- 加入100 µL Tubulite Red工作溶液,并在37oC的培养箱中孵育30至60分钟。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。最佳的孵育时间需要根据细胞类型等因素自行测试。
- 除去工作溶液,并用PBS或自备缓冲液(2.5mg丙磺舒(从组分C稀释))洗涤细胞两次。
- 添加含2.5 mM丙磺舒的测定缓冲液(从组分C稀释)到带测细胞中,并使用Cy5滤光片组在荧光显微镜下检测荧光强度。
图示
图1.活HeLa细胞中微管蛋白的成像。HeLa细胞与Tubulite red和DAPI(目录#17507)一起在37℃,5%CO2培养箱中孵育60分钟,然后用荧光显微镜(Cy5滤光片组)拍摄荧光图像。 |