上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒
 |
货号 | 17656 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 100 Tests | 价格 | 3840 | |
| Ex (nm) | 509 | Em (nm) | 529 | |
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的RNA检测试剂盒，检测和定量少量RNA对于各种分子生物学程序非常重要，例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度，然后进行Northern印迹分析，S1核酸酶测定，RNase保护测定，cDNA文库制备，反向转录PCR和差异显示PCR。最常用的测量核酸浓度的技术是测定260nm处的吸光度。基于吸光度的方法的主要缺点是由蛋白质，游离核苷酸和其他UV吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色可以缓解这种干扰问题。 StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏荧光核酸染色剂，用于定量溶液中的RNA。 StrandBrite RNA定量试剂可使用荧光酶标仪或荧光分光光度计检测低至1.4 ng / mL的RNA。我们的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒包括我们的StrandBrite 绿色核酸染色，具有优化且稳健的方案。它提供了一种方便的方法来量化溶液中的RNA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| 激发： | 490nm |
| 发射: | 545nm |
| cutoff： | 515nm |
| 推荐孔板： | 黑色孔板 |
产品说明书
96孔板检测示例
操作步骤
以下方案是使用StrandBrite Green定量RNA的示例。 打开前让所有组件升温至室温。处理所有材料时，务必使用干净的一次性手套 使用无核酸酶水和无菌一次性聚丙烯塑料制品进行试剂制备。
注意：没有数据可用于解决StrandBrite Green RNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合，所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理，并进行适当的处理。 应谨慎处理DMSO储备溶液，因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。
1.准备1X测定缓冲液
通过用无菌，蒸馏，无核酸酶的水稀释浓缩的缓冲液20X（组分B）来制备1X测定缓冲液。
2.准备StrandBrite 绿色工作溶液
通过在1X测定缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备StrandBrite Green工作溶液。例如，将50μLStrandBrite Green（组分A）加入10 mL 1X测定缓冲液中（来自步骤1）。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。
注1：我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备，因为染料可能会吸附到玻璃表面。
注2：为获得最佳结果，该溶液应在制备后几小时内使用。
3.准备RNA标准品的连续稀释液（0至1μg/ mL）：
3.1将10μL100μg/ mL RNA原液（组分C）加入990μL分析缓冲液（组分B）中，得到1μg/ mL RNA溶液，然后进行1：3连续稀释，得到约1000,300， 100,30,10,3,1和0 ng / mL。
注意：未使用的核糖体RNA标准品（组分C）应在无核酸酶的塑料瓶中分成单次使用的等分试样，并储存在-20℃。
3.2如说明书中表1和2中所述，将RNA标准品和含有测试样品的RNA添加到96孔固体黑色微孔板中。
4.运行RNA测定：
4.1将100μLStrandBrite 绿色工作溶液（来自步骤2）添加到RNA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3）中，使总RNA测定体积为200μL/孔。
注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLStrandBrite 绿色工作溶液。
4.2在室温下孵育反应2至5分钟，避光。
4.3使用荧光分光光度计在Ex / Em = 490 / 545nm（515nm处的截止值）下观察荧光增加。
注意：为尽量减少光漂白，请保持所有样品的荧光测量时间不变。
4.4空白孔中的荧光（仅含测定缓冲液）用作对照，并从具有RNA标准品或测试样品的那些比色皿的值中减去。根据RNA标准曲线确定样品的RNA浓度。
参考文献
Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247
Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444
Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010
Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933
Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95
Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)
Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997
Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541
Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221
Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性 | Cat#17657 |
| StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 | Cat#17656 |