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钙离子荧光探针Rhod-2,三钾盐
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货号 | 21067 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
| Ex (nm) | 553 | Em (nm) | 577 | |
| 分子量 | 869.05 | 溶剂 | Water | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
钙离子荧光探针Rhod-2,三钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2 +后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2 +浓度的变化。长波长Rhod-2 Ca2 +指示剂是Fluo-3的有价值的替代品，可用于在具有高水平自发荧光的细胞和组织中进行实验。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Rhod-2,三钾盐。
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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
产品说明书
钙指示剂AM Esters的使用
1.带有钙指示剂AM酯：
AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。
b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。
注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。
c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。
d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。
e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。
注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。
f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。
g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。
2.测量细胞内钙响应：
为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：
[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]
其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。
解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。
参考文献
Biomaterial Surface Can Modify HUVEC Morphology and Inflammatory Response by Regulating MicroRNA Expression
Authors: Shuangying Gu, Baoxiang Tian, Weicong Chen, Yue Zhou
Journal: Journal of Biosciences and Medicines (2017): 8
Csseverin inhibits apoptosis through mitochondria-mediated pathways triggered by Ca2+ dyshomeostasis in hepatocarcinoma PLC cells
Authors: M Shi, L Zhou, L Zhao, M Shang, T He, Z Tang
Journal: PLoS Negl Trop Dis (2017): e0006074
GluR3B Ab’s induced oligodendrocyte precursor cells excitotoxicity via mitochondrial dysfunction
Authors: Yi Liu, Yan Chen, Wan Tong Du, Xiu Xiang Wu, Fu Xing Dong, Xue Bin Qu, Hong Bin Fan, Rui Qin Yao
Journal: Brain Research Bulletin (2017)
Spatially Organized β-Cell Subpopulations Control Electrical Dynamics across Islets of Langerhans
Authors: Matthew J Westacott, Nurin WF Ludin, Richard KP Benninger
Journal: Biophysical Journal (2017): 1093–1108
ABT737 reverses cisplatin resistance by regulating ER-mitochondria Ca2+ signal transduction in human ovarian cancer cells
Authors: CHUNYAN YU, XIANRUI JIANG, YE XU, LIANKUN SUN
Journal: International Journal of Oncology (2016): 2507–2519
BAX inhibitor-1 is a Ca2+ channel critically important for immune cell function and survival
Authors: D Lisak, T Schacht, A Gawlitza, P Albrecht, O Aktas, B Koop, M Gliem, HH Hofstetter, K Zanger, Geert Bultynck
Journal: Cell Death & Differentiation (2016): 358–368
Calcium efflux from the endoplasmic reticulum regulates cisplatin-induced apoptosis in human cervical cancer HeLa cells
Authors: Luyan Shen, Naiyan Wen, Meihui Xia, Yu Zhang, Weimin Liu, Ye Xu, Liankun Sun
Journal: Oncology letters (2016): 2411–2419
Failure of Elevating Calcium Induces Oxidative Stress Tolerance and Imparts Cisplatin Resistance in Ovarian Cancer Cells
Authors: Liwei Ma, Hongjun Wang, Chunyan Wang, Jing Su, Qi Xie, Lu Xu, Yang Yu, Shibing Liu, Songyan Li, Ye Xu
Journal: Aging and Disease (2016): 254
Cardiac tissue slices: preparation, handling, and successful optical mapping
Authors: Ken Wang, Peter Lee, Gary R Mirams, Padmini Sarathchandra, Thomas K Borg, David J Gavaghan, Peter Kohl, Christian Bollensdorff
Journal: American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology (2015): H1112–H1125
Tolerance to endoplasmic reticulum stress mediates cisplatin resistance in human ovarian cancer cells by maintaining endoplasmic reticulum and mitochondrial homeostasis
Authors: Ye Xu, Chunyan Wang, Jing Su, Qi Xie, Liwei Ma, Linchuan Zeng, Yang Yu, Shibing Liu, Songyan Li, Zhixin Li
Journal: Oncology reports (2015): 3051–3060
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