T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） 高浓度–NEB酶试剂

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5´ -三磷酸腺苷（ATP）
 

 通用 miRNA 克隆接头

特性

 连接单链 RNA 和 DNA
 用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸  

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。  

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。  

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。  

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。  

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM ATP（NEB #M0437中包含）50% PEG 8000  

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。  

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。  

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。