Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶–NEB酶试剂

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                              收藏

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#M0538L
8,000 units
3,369.00元

#M0538M
高浓度(15X)8,000 units
3,369.00元

#M0538S
1,600 units
849.00元

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特性

 最佳 DNA 等温扩增(LAMP)性能
 快速聚合
 反应条件灵活,比 Bst DNA 聚合酶具有更高的盐耐受力
 6 0 – 7 2℃ 之间具有最佳反应性能(WarmStart)
 用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响

 WarmStart DNA 聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率  

Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶--NEB酶试剂

概述

Bst 2.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR 聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以抑制酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。

NEB 的 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下抑制酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA 聚合酶或同源物可以掺入非模板序列核苷酸。

Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶--NEB酶试剂
Bst 2.0 WarmStart 的优势:无论刚建立反应(实线)或 25℃ 温育 2 小时后,都能使 LAMP 实验在相同的时间点迅速启动反应。没有 Bst 2.0 WarmStart 的保护,在室温条件下温育的 LAMP 实验结果不一致。Bst 2.0 WarmStart 让扩增结果更均一,可以室温和高通量建立反应。 

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有诱导启动子,可表达 Bst 2.0 DNA 聚合酶蛋白。  

反应缓冲液

1X 等温扩增缓冲液

[20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25℃),50 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM MgS04,0.1% Tween-20]。  

单位定义

1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。 

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。  

热失活

80℃ 20 分钟。  

使用注意

Bst 2.0 DNA 聚合酶不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶的反应温度可以为 60-72℃。Bst 2.0 DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。