产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白
核酸内切酶 III(Nth) 收藏
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#M0268S
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特性
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱性析出
碱解旋
碱解旋
概述
E. coli 核酸内切酶 III(Nth)既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则切割 AP 位点的 3´ 端,产生一个 5´ 磷酸和一个 3´ 磷酸-α,β不饱和醛。
被核酸内切酶 III 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。
来源
克隆有 nth 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件
1X Endonuclease III(Nth)反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1 mM DTT(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明
核酸内切酶 III(Nth)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
* AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG) 处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数:1:104~1:105。详细步骤见 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
彗星试验的推荐稀释倍数:1:104~1:105。详细步骤见 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
浓度
10,000 units/ml。
参考文献
关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。