尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI) 收藏
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描述
尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI),来源于枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1),蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG。UDG 与 UGI 按 1:1 比例进行可逆蛋白结合,发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG 与 DNA 的复合物。
浓度
2,000 units/ml
特点
·尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG。
·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。
·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。
来源
由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1)UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。
单位定义
1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。
反应条件
1X UDG 反应缓冲液,37℃ 温育。
热失活
不能热失活。
注意事项
1、由于 95℃ 热处理后, UDG 酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)来阻止产物 DNA 的降解。
2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效(NEB #M0280)。
3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI。
4、在四种 NEBuffer 中都有活性(NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004)。
5、UGI 的热稳定性极高,煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。
参考文献
Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.
Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.
Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.